लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप का कार्य सिद्धांत
लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोपी प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप इमेजिंग पर आधारित है जिसमें लेजर स्कैनिंग डिवाइस, कंप्यूटर इमेज प्रोसेसिंग का उपयोग, ऑप्टिकल इमेजिंग का रिज़ॉल्यूशन 30% - 40% तक बढ़ जाता है, फ्लोरोसेंट जांच के पराबैंगनी या दृश्य प्रकाश उत्तेजना का उपयोग होता है, ताकि कोशिकाओं या ऊतकों की आंतरिक सूक्ष्म संरचना की प्रतिदीप्ति छवि प्राप्त की जा सके, उपकोशिकीय स्तर पर शारीरिक संकेतों और सेलुलर आकारिकी परिवर्तनों का निरीक्षण किया जा सके, जैसे कि Ca2+, PH, झिल्ली क्षमता, आदि, आकृति विज्ञान, आणविक जीव विज्ञान, तंत्रिका विज्ञान, औषध विज्ञान, आनुवंशिकी और अन्य क्षेत्रों में शक्तिशाली अनुसंधान उपकरणों की एक नई पीढ़ी बन गई है। लेजर कन्फोकल इमेजिंग सिस्टम आकृति विज्ञान, आणविक जीव विज्ञान, तंत्रिका विज्ञान, औषध विज्ञान, आनुवंशिकी और इतने पर के क्षेत्रों में अनुसंधान उपकरणों की एक नई पीढ़ी है। लेजर कन्फोकल इमेजिंग सिस्टम का उपयोग विभिन्न प्रकार के दागदार, गैर-दागदार और फ्लोरोसेंटली लेबल वाले ऊतकों और कोशिकाओं आदि का निरीक्षण करने, विवो में ऊतक खंडों और कोशिकाओं के विकास और विकास का निरीक्षण और अध्ययन करने और पदार्थों और ऊर्जा रूपांतरण के इंट्रासेलुलर परिवहन का अध्ययन और माप करने के लिए किया जा सकता है। यह जीवित कोशिकाओं (RATIO) में आयन और PH परिवर्तनों का अध्ययन करने, न्यूरोट्रांसमीटर अनुसंधान, अंतर हस्तक्षेप और प्रतिदीप्ति टोमोग्राफी, बहु प्रतिदीप्ति टोमोग्राफी और ओवरलैप, समय-विलंबित स्कैनिंग के प्रतिदीप्ति नमूनों के मात्रात्मक विश्लेषण के प्रतिदीप्ति संकेतकों के प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोस्कोपी विश्लेषण और ऊतकों और कोशिकाओं की त्रि-आयामी गतिशील संरचना के गतिशील घटकों, प्रतिदीप्ति अनुनाद ऊर्जा के हस्तांतरण का विश्लेषण, प्रतिदीप्ति इन-सीटू हाइब्रिडाइजेशन अनुसंधान (FISH), साइटोस्केलेटल अनुसंधान (FISH), और साइटोस्केलेटन के अध्ययन को करने में सक्षम है। एफआईएसएच), साइटोस्केलेटन अनुसंधान, जीन स्थानीयकरण अनुसंधान, इन सीटू रियल-टाइम पीसीआर उत्पाद विश्लेषण, फ्लोरोसेंस ब्लीचिंग रिकवरी अनुसंधान (एफआरएपी), अंतरकोशिकीय संचार अनुसंधान, अंतर-प्रोटीन अनुसंधान, झिल्ली क्षमता और झिल्ली तरलता पर अनुसंधान आदि, छवि विश्लेषण और त्रि-आयामी पुनर्निर्माण और अन्य विश्लेषणों के विश्लेषण को पूरा करने के लिए।
लेजर कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप प्रणाली अनुप्रयोग क्षेत्र:
इसमें चिकित्सा, पशु और पौधों पर वैज्ञानिक अनुसंधान, जैव रसायन, विज्ञान, कोशिका जीव विज्ञान, ऊतक भ्रूण, खाद्य विज्ञान, आनुवंशिकी, औषध विज्ञान, शरीर क्रिया विज्ञान, प्रकाशिकी, विकृति विज्ञान, वनस्पति विज्ञान, तंत्रिका विज्ञान, समुद्री जीव विज्ञान, पदार्थ विज्ञान, इलेक्ट्रॉनिक विज्ञान, यांत्रिकी, पेट्रोलियम भूविज्ञान, खनिज विज्ञान शामिल हैं।
मूलरूप आदर्श
पारंपरिक ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप एक क्षेत्र प्रकाश स्रोत का उपयोग करता है, नमूने पर प्रत्येक बिंदु की छवि पड़ोसी बिंदुओं से प्रकाश के विवर्तन या बिखराव से बाधित होगी; लेजर कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप नमूने के फोकल तल पर प्रत्येक बिंदु को स्कैन करने के लिए एक बिंदु प्रकाश स्रोत बनाने के लिए प्रदीप्त पिनहोल के माध्यम से एक लेजर किरण का उपयोग करता है, नमूने पर विकिरणित बिंदु का पता लगाने वाले पिनहोल पर चित्र बनाया जाएगा, और फिर बिंदु-गुणन ट्यूब (पीएमटी) या कोल्ड इलेक्ट्रोकपलिंग डिवाइस (सीसीडी) के बाद पता लगाने वाले पिनहोल द्वारा बिंदु दर बिंदु या रेखा दर रेखा प्राप्त किया जाएगा, और फिर कंप्यूटर मॉनीटर पर तेजी से प्रदर्शित किया जाएगा। जांच पिनहोल के पीछे पीएमटी या सीसीसीडी द्वारा बिंदु दर बिंदु या रेखा दर रेखा प्राप्त रोशनी पिनहोल और पता लगाने वाले पिनहोल, ऑब्जेक्टिव लेंस के फोकल प्लेन के संबंध में संयुग्मित होते हैं, फोकल प्लेन पर स्थित बिंदु रोशनी पिनहोल और उत्सर्जन पिनहोल पर एक ही समय में केंद्रित होते हैं, और फोकल प्लेन के बाहर के बिंदुओं को पता लगाने वाले पिनहोल पर चित्रित नहीं किया जाएगा, ताकि प्राप्त की गई कॉन्फोकल छवि नमूने का एक ऑप्टिकल क्रॉस-सेक्शन हो, जो साधारण माइक्रोस्कोप की छवि के धुंधलेपन के नुकसान को दूर करता है।
