लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप का कार्य सिद्धांत
लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप का कार्य सिद्धांत
ओलंपस लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप एक डिटेक्टर है जो सिग्नल प्राप्त कर सकता है। इसका कार्य सिद्धांत यह है कि एक बिंदु प्रकाश स्रोत को प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप से गुजरने के बाद "हवादार डिस्क" नामक एक बढ़े हुए स्थान के रूप में चित्रित किया जाएगा। एक मानक श्वेत-प्रकाश इंटरफेरोमेट्रिक कन्फोकल माइक्रोस्कोप में, फोकल विमान के बाहर उत्सर्जित प्रकाश को एक पिनहोल द्वारा अवरुद्ध किया जाता है जिसका आकार यह निर्धारित करता है कि हवादार डिस्क का कितना हिस्सा डिटेक्टर में प्रवेश कर सकता है। पिनहोल जितना छोटा होगा, परिणामी छवि उतनी ही तेज होगी, और छवि उतनी ही धुंधली होगी क्योंकि अधिकांश प्रकाश नष्ट हो जाएगा। एपर्चर पिनहोल जितना छोटा होगा, रिज़ॉल्यूशन उतना ही बेहतर होगा, लेकिन - फिर से - अधिक प्रकाश संकेत खो जाता है। ओलिंप लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप एक ही समय में एक रंगीन सीसीडी छवि और एक लेजर स्कैनिंग कन्फोकल छवि प्रदान कर सकता है। ओलंपस कन्फोकल लेजर माइक्रोस्कोप एक प्रकाश स्रोत, एक नमूना और एक डिटेक्टर के कन्फोकल सेटअप के माध्यम से ऊंचाई मापने में सक्षम हैं। जब नमूना वस्तुनिष्ठ लेंस के फोकल तल पर स्थित होता है और नमूना सतह से परावर्तित लेजर प्रकाश कन्फोकल एपर्चर में केंद्रित होता है, तो फोटोडिटेक्टर को नमूने से संकेत प्राप्त होगा। जब नमूना फोकस से बाहर की स्थिति में होता है, तो कन्फोकल एपर्चर को लेजर सिग्नल प्राप्त नहीं होता है, इसलिए केवल इन-फोकस सिग्नल एकत्र किया जाता है। यह सुविधा ओलंपस लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप के ऑप्टिकल सेक्शनिंग फ़ंक्शन का एहसास कर सकती है।
कन्फोकल लेजर माइक्रोस्कोपी के लाभ
1. प्रकाश स्रोत के रूप में लेजर प्रकाश का उपयोग करते हुए, संबंधित फ्लोरोसेंट जांच को चिह्नित करने के बाद, परत दर परत द्वि-आयामी ऑप्टिकल क्रॉस-अनुभागीय छवियों को प्राप्त करने के लिए नमूने को बिंदु दर बिंदु स्कैन किया जाता है। इसमें "सेल सीटी" का कार्य है और त्रि-आयामी छवियां प्राप्त करने के लिए कंप्यूटर त्रि-आयामी पुनर्निर्माण सॉफ़्टवेयर द्वारा समर्थित किया जा सकता है, जिसे कोशिकाओं और ऊतकों के त्रि-आयामी आकार और स्थानिक संबंध का निरीक्षण करने के लिए किसी भी कोण पर घुमाया जा सकता है;
2. यह बिना किसी क्षति के जीवित कोशिकाओं और ऊतकों का निरीक्षण कर सकता है, और कोशिकाओं में सीए आयन एकाग्रता और पीएच मान जैसी जीवित कोशिकाओं की शारीरिक जानकारी को गतिशील रूप से माप सकता है;
3. यह कोशिका झिल्ली की तरलता, अंतरकोशिकीय संचार, कोशिका संलयन, साइटोस्केलेटन लोच आदि को माप सकता है, और इंट्रासेल्युलर "सर्जरी" को पूरा करने के लिए "हल्के चाकू" के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। यह तकनीक जीवित कोशिकाओं और ऊतकों के यथास्थान गतिशील और मात्रात्मक अवलोकन और माप को सक्षम बनाती है।
