तेल लेंस का आवर्धन सामान्य अभिदृश्यक लेंस से अधिक क्यों होता है?

तेल लेंस का आवर्धन सामान्य अभिदृश्यक लेंस से अधिक क्यों होता है?

सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रयोगों में धुंधला होने से पहले बैक्टीरिया को ठीक करने की आवश्यकता क्यों होती है:

1: कोशिकाओं को मारता है, डाई से दागना आसान है।

2: बैक्टीरिया को ग्लास स्लाइड पर चिपकाएं, और पानी से धोना आसान नहीं है।
ठीक करते समय इसे धीरे-धीरे सुखाना चाहिए। यदि आप वास्तव में गति बढ़ाना चाहते हैं, तो आप इसे अल्कोहल लैंप की लौ के ऊपर कुछ दूरी पर सुखा सकते हैं। ग्लास स्लाइड को गर्म न होने दें, अन्यथा यह बैक्टीरिया के जीवन रूप को नष्ट कर सकता है।
ग्राम धुंधलापन और बैक्टीरिया का सूक्ष्म अवलोकन

1. प्रायोगिक सिद्धांत
ग्राम स्टेनिंग सिद्धांत: बैक्टीरिया अपनी कोशिका दीवारों की संरचना और संरचना के कारण ग्राम स्टेनिंग पर अलग-अलग प्रतिक्रिया करते हैं। ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया की कोशिका भित्ति मुख्य रूप से पेप्टिडोग्लाइकन द्वारा निर्मित एक नेटवर्क गाँठ होती है। जब इथेनॉल के साथ इलाज किया जाता है, तो निर्जलीकरण के कारण नेटवर्क संरचना का छिद्र आकार छोटा हो जाता है, और पारगम्यता कम हो जाती है, जिससे कि क्रिस्टल वायलेट-आयोडीन पदार्थ का परिसर कोशिका में घुलना और बनाए रखना आसान नहीं होता है, और नीला- प्राथमिक धुंधला एजेंट का बैंगनी रंग रंग हटाने और प्रतिरंजित करने के बाद भी बरकरार रहता है। ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया की कोशिका भित्ति की पेप्टिडोग्लाइकन परत पतली होती है और लिपिड की मात्रा अधिक होती है, इसलिए जब रंग हटाने का उपचार किया जाता है, तो लिपिड इथेनॉल (या एसीटोन) द्वारा घुल जाता है, और कोशिका भित्ति की पारगम्यता बढ़ जाती है, इसलिए कि क्रिस्टल वायलेट-आयोडीन के कॉम्प्लेक्स को साफ़ करना आसान है, और काउंटरस्टेन के साथ काउंटरस्टेनिंग के बाद, कोशिकाओं को काउंटरस्टेन के लाल रंग से दाग दिया जाता है। माइक्रोस्कोप इमेजिंग सिद्धांत: आधुनिक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप छवि को बड़ा करने के लिए ऐपिस और ऑब्जेक्टिव लेंस के दो लेंस सिस्टम का उपयोग करते हैं, इसलिए उन्हें अक्सर मिश्रित माइक्रोस्कोप कहा जाता है। माइक्रोस्कोप की ऑप्टिकल प्रणाली में, ऑब्जेक्टिव लेंस का प्रदर्शन सबसे महत्वपूर्ण है, और तेल लेंस का आवर्धन सबसे बड़ा है, जो सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान के लिए सबसे महत्वपूर्ण है। ग्लास स्लाइड और लेंस के बीच विसर्जन तेल जोड़ने का मुख्य उद्देश्य रोशनी की चमक को बढ़ाना और माइक्रोस्कोप के रिज़ॉल्यूशन को बढ़ाना है। प्रकाश के अपवर्तन या पूर्ण परावर्तन को कम करने और प्रेक्षित छवि को स्पष्ट बनाने के लिए प्रकाश संचरण माध्यम के रूप में हवा के बजाय तेल का उपयोग किया जाता है।

2. प्रायोगिक उपकरण

1. कालोनियाँ:
एस्चेरिचिया कोली 24 घंटे पोषक तत्व अगर तिरछी संस्कृति,
स्टैफिलोकोकस ऑरियस लगभग 24 घंटे पोषक तत्व अगर तिरछा कल्चर, बैसिलस सबटिलिस 12-18 घंटे पोषक तत्व अगर तिरछा कल्चर।

2. समाधान या अभिकर्मक:
आसुत जल, आयोडीन घोल, क्रिस्टल वायलेट स्टेनिंग घोल, 95 प्रतिशत अल्कोहल, सैफ्रानिन स्टेनिंग घोल, देवदार का तेल। 3. साधन:
माइक्रोस्कोप, ग्लास स्लाइड, इनोक्यूलेशन लूप, अल्कोहल लैंप, चिमटी, लेंस ऊतक।

3. प्रायोगिक चरण
a:

1. धब्बा
स्लाइड को बाहर निकालें, स्लाइड को प्रज्वलित करें, स्लाइड पर मौजूद अल्कोहल को जलाएं और इसे स्टरलाइज़ करें, बीच में आसुत जल की एक छोटी बूंद डालें, परीक्षण के तिरछे माध्यम पर थोड़ी मात्रा में बैक्टीरिया को धीरे से चुनने के लिए इनोक्यूलेशन लूप का उपयोग करें। ट्यूब, पूरी प्रक्रिया के दौरान, टेस्ट ट्यूब का मुंह अल्कोहल लैंप के ऊपर होना चाहिए, और संस्कृति माध्यम के संदूषण को रोकने के लिए गति तेज होनी चाहिए। फिर पानी की छोटी-छोटी बूंदों को कांच की स्लाइड पर गोलाकार गति में लगाएं, जब पानी की बूंदें धुंधली हो जाएं तो रुकें और उनके सूखने और स्थिर होने की प्रतीक्षा करें।

2. प्राथमिक रंगाई
कॉलोनी पर क्रिस्टल वायलेट (केवल बैक्टीरिया फिल्म को कवर करना उचित है) गिराएं, 1-2 मिनट के लिए दाग लगाएं, दाग का घोल हटा दें, और स्लाइड के शीर्ष से बारीक पानी से तब तक धोएं जब तक कि एलुएट रंगहीन न हो जाए, और दाग को स्लाइड पर रखें। स्लाइस पर लगे पानी को हिलाएं।

3. मोर्डेंट
बचे हुए पानी को धोने के लिए बूंद-बूंद करके आयोडीन का घोल डालें, लगभग 1 मिनट के लिए ढककर रखें और पानी से धो लें।
4. रंगहीनता
ग्लास स्लाइड पर पानी को हिलाएं, ग्लास स्लाइड को झुकाएं, और सफेद पृष्ठभूमि के नीचे इसका रंग बदलने के लिए 95 प्रतिशत अल्कोहल मिलाएं, जब तक कि बाहर निकलने वाला अल्कोहल नीला न दिखाई दे, तुरंत अल्कोहल को पानी से धो लें और ग्लास स्लाइड को हिलाएं। स्लाइस पर से पानी हटा दीजिये.

5. पलटवार करना
सैफ्रानिन घोल से दाग को लगभग 1-2 मिनट तक धोएं, पानी से धोएं, और फिर सोखने वाले कागज से पोंछकर सुखा लें

6. सूक्ष्म परीक्षण:

कम आवर्धन लेंस के नीचे देखे जाने वाले जीवाणु कॉलोनी को देखें (स्लाइड को घुमाते रहें, यदि आपको लाल छाया महसूस हो, तो तुरंत रुकें, आवर्धन को समायोजित करें, यदि यह कॉलोनी नहीं है, तो ढूंढना जारी रखें), लेंस बैरल को ऊपर उठाएं, और फिर तेल दर्पण पर स्विच करें। नमूना क्षेत्र में देवदार के तेल की एक बूंद डालें, और मोटे समायोजक के साथ लेंस बैरल को सावधानी से नीचे करें ताकि तेल लेंस तेल में डूब जाए और लगभग नमूने को छू ले। कंडेनसर को उच्चतम स्थिति तक उठाएं और एपर्चर को पूरी तरह से खोलें, लेंस बैरल को धीरे-धीरे ऊपर उठाने के लिए मोटे समायोजक का उपयोग करें जब तक कि वस्तु की छवि दृश्य क्षेत्र में दिखाई न दे और इसे स्पष्ट और फोकस में लाने के लिए बारीक समायोजक का उपयोग करें।