तेल लेंस का आवर्धन सामान्य ऑब्जेक्टिव लेंस से अधिक क्यों होता है?
सूक्ष्मजीववैज्ञानिक प्रयोगों में अभिरंजन से पहले बैक्टीरिया को स्थिर करने की आवश्यकता क्यों होती है:
1: कोशिकाओं को मारें और रंग को आसान बनाएं।
दो: बैक्टीरिया को कांच की स्लाइड पर चिपकाये रखें और पानी से आसानी से न धुलें।
फिक्स करते समय, धीरे-धीरे सुखाएँ। यदि आप वास्तव में प्रक्रिया को गति देना चाहते हैं, तो आप इसे अल्कोहल लैंप की लौ से थोड़ी दूरी पर कुछ बार सुखा सकते हैं। कांच को इतना न सुखाएँ कि वह गर्म हो जाए, अन्यथा यह जीवाणु जीवन रूप को नष्ट कर सकता है।
ग्राम स्टेन और बैक्टीरिया का सूक्ष्म अवलोकन
प्रायोगिक सिद्धांत
ग्राम धुंधलापन का सिद्धांत: ग्राम धुंधलापन के लिए बैक्टीरिया की विभिन्न प्रतिक्रियाएँ उनकी कोशिका भित्ति की विभिन्न संरचना और संरचना के कारण होती हैं। ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया की कोशिका भित्ति मुख्य रूप से पेप्टिडोग्लाइकन का एक नेटवर्क है। इथेनॉल के साथ इलाज किए जाने पर, निर्जलीकरण के कारण नेटवर्क संरचना का छिद्र आकार छोटा हो जाता है, और पारगम्यता कम हो जाती है, जिससे क्रिस्टल वायलेट-आयोडीन का परिसर बनता है। पदार्थ आसानी से नहीं निकलता है और कोशिकाओं में रहता है। रंग हटाने और काउंटरस्टेनिंग के बाद, प्राथमिक डाई का नीला-बैंगनी रंग अभी भी बरकरार है। ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया की कोशिका भित्ति पेप्टिडोग्लाइकन परत पतली होती है और इसमें लिपिड की मात्रा अधिक होती है। इसलिए, रंग हटाने के दौरान, लिपिड इथेनॉल (या एसीटोन) द्वारा घुल जाते हैं, और कोशिका भित्ति की पारगम्यता बढ़ जाती है, जिससे क्रिस्टल वायलेट-आयोडीन परिसर को बाहर निकालना अपेक्षाकृत आसान हो जाता है। काउंटरस्टेन के साथ काउंटरस्टेनिंग के बाद, कोशिकाओं को काउंटरस्टेन के लाल रंग से रंगा जाता है। माइक्रोस्कोप इमेजिंग का सिद्धांत: आधुनिक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप छवियों को बड़ा करने के लिए दो लेंस सिस्टम, ऐपिस और ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते हैं, इसलिए उन्हें अक्सर मिश्रित माइक्रोस्कोप कहा जाता है। माइक्रोस्कोप की ऑप्टिकल प्रणाली में, ऑब्जेक्टिव लेंस का प्रदर्शन सबसे महत्वपूर्ण है। तेल लेंस में सबसे बड़ा आवर्धन होता है और यह माइक्रोबायोलॉजिकल शोध के लिए सबसे महत्वपूर्ण है। स्लाइड और लेंस के बीच लेंस तेल की बूंदें जोड़ने का मुख्य उद्देश्य रोशनी की चमक को बढ़ाना और माइक्रोस्कोप के रिज़ॉल्यूशन को बढ़ाना है। प्रकाश प्रसार माध्यम के रूप में हवा के बजाय तेल का उपयोग करने से प्रकाश का अपवर्तन या कुल परावर्तन कम हो जाता है, जिससे देखी गई छवि अधिक स्पष्ट हो जाती है।
कम आवर्धन वाले माइक्रोस्कोप के नीचे बैक्टीरिया की कॉलोनियों को देखें (स्लाइड को हिलाते रहें, अगर आपको लाल छाया महसूस हो, तो तुरंत रुकें, आवर्धन को समायोजित करें, अगर यह कॉलोनी नहीं है, तो देखना जारी रखें), लेंस बैरल को ऊपर उठाएं और फिर तेल लेंस पर स्विच करें। नमूने वाले क्षेत्र में देवदार के तेल की एक बूंद डालें, और लेंस बैरल को सावधानी से नीचे करने के लिए मोटे समायोजक का उपयोग करें ताकि तेल लेंस लेंस के तेल में डूब जाए और लगभग नमूने के संपर्क में आ जाए। कंडेनसर को सबसे ऊंची स्थिति में उठाएँ और एपर्चर खोलें। लेंस बैरल को धीरे-धीरे ऊपर उठाने के लिए मोटे समायोजक का उपयोग करें जब तक कि ऑब्जेक्ट की छवि दृश्य के क्षेत्र में दिखाई न दे और इसे स्पष्ट और फ़ोकस में लाने के लिए फ़ाइन समायोजक का उपयोग करें।
