प्रकाशीय पथ के आधार पर प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी दो प्रकार के होते हैं:

प्रकाशीय पथ के आधार पर प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी दो प्रकार के होते हैं:

1. संचरण प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी: उत्तेजना प्रकाश स्रोत प्रतिदीप्ति को उत्तेजित करने के लिए नमूना सामग्री के माध्यम से कंडेनसर दर्पण के माध्यम से होता है। आम तौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला डार्क-फील्ड कलेक्टर, साधारण कलेक्टर का भी इस्तेमाल किया जा सकता है, रिफ्लेक्टर को समायोजित करें ताकि उत्तेजना प्रकाश संचारित हो और नमूने को बाईपास कर सके। यह पुराने प्रकार का प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी है। लाभ यह है कि कम आवर्धन पर प्रतिदीप्ति मजबूत होती है, और नुकसान यह है कि आवर्धन में वृद्धि के साथ प्रतिदीप्ति कमजोर हो जाती है। इसलिए बड़े नमूने की सामग्री का निरीक्षण करना बेहतर है।

2. गिरते हुए प्रकार के प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी यह हाल के समय में विकसित प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का एक नया प्रकार है, और अंतर यह है कि उद्देश्य लेंस से नमूने की सतह तक प्रकाश की उत्तेजना, यानी, एक ही उद्देश्य लेंस के रूप में सांद्रक की रोशनी और प्रतिदीप्ति उद्देश्य लेंस के संग्रह। ऑप्टिकल पथ को दो-रंग बीम विभाजक में जोड़ा जाना चाहिए, जो प्रकाश यूरेनियम के साथ 45. कोण है, उत्तेजना प्रकाश उद्देश्य लेंस में परिलक्षित होता है, और नमूने में इकट्ठा होता है, नमूना और उद्देश्य लेंस लेंस सतह द्वारा उत्पादित प्रतिदीप्ति, एक ही समय में उद्देश्य लेंस में उत्तेजना प्रकाश के कवर ग्लास सतह प्रतिबिंब, और दो-रंग बीम विभाजक पर वापस, ताकि उत्तेजना प्रकाश और प्रतिदीप्ति अवशिष्ट उत्तेजना प्रकाश से अलग हो जाए और फिर अवरुद्ध फिल्टर द्वारा अवशोषित हो जाए। यदि आप अलग-अलग उत्तेजना फ़िल्टर / दोहरे रंग बीम विभाजक / अवरुद्ध फ़िल्टर संयोजन ब्लॉक बदलते हैं, तो विभिन्न प्रतिदीप्ति प्रतिक्रिया उत्पादों की जरूरतों को पूरा कर सकते हैं। इस प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का लाभ यह है कि इसका दृश्य क्षेत्र एकसमान प्रकाश वाला है, चित्र स्पष्ट है, प्रतिदीप्ति का आवर्धन जितना अधिक होगा, वह उतना ही मजबूत होगा।

(बी) प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी विधि.
1. प्रकाश स्रोत खोलें, अल्ट्रा-उच्च दबाव पारा लैंप को सबसे चमकीले बिंदु तक पहुंचने के लिए कुछ मिनट के लिए पहले से गरम करें।

2. ट्रांसमिशन फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप को प्रकाश स्रोत और फिल्टर को उत्तेजित करने के लिए आवश्यक कंसंट्रेटर के बीच, ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे संबंधित ब्लॉकिंग फिल्टर के साथ स्थापित किया जाना चाहिए। फॉलिंग फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप को आवश्यक उत्तेजना फिल्टर / दोहरे रंग बीम विभाजक / ब्लॉकिंग फिल्टर इंसर्ट के ऑप्टिकल पथ के स्लॉट में डाला जाना चाहिए।

3. कम आवर्धन लेंस से निरीक्षण करें और प्रकाश स्रोत के केंद्र को समायोजित करें ताकि यह प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के विभिन्न मॉडलों के समायोजन उपकरण के अनुसार पूरे प्रकाश स्थान के केंद्र में स्थित हो।

4. नमूना टुकड़ा रखें, ध्यान केंद्रित किया जा सकता है। उपयोग पर ध्यान देना चाहिए: फिल्टर की स्थापना के अंत में सीधे निरीक्षण करने के लिए आंख का उपयोग नहीं करते हैं, ताकि आंखों को नुकसान न पहुंचे; नमूना का निरीक्षण करने के लिए एक तेल दर्पण के साथ, आपको एक विशेष गैर-फ्लोरोसेंट तेल दर्पण का उपयोग करना चाहिए; उच्च दबाव पारा दीपक दीपक के बंद होने के तुरंत बाद फिर से नहीं खोला जा सकता है, आपको फिर से शुरू करने से पहले 5 मिनट की आवश्यकता होती है, अन्यथा यह अस्थिर हो जाएगा, पारा दीपक के जीवन को प्रभावित करेगा।

(सी) अवलोकन शिक्षण मंच पर नीले-बैंगनी प्रकाश फिल्टर के साथ प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के नीचे, 0.01% एमिडिन नारंगी फ्लोरोसेंट डाई से रंगे कोशिकाओं को देखा जा सकता है, और कोशिकाओं के नाभिक और कोशिका द्रव्य को प्रतिदीप्ति के दो अलग-अलग रंगों (गहरे हरे और नारंगी-लाल) का उत्पादन करने के लिए उत्तेजित किया जाता है।