उनके ऑप्टिकल पथ के आधार पर प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी दो प्रकार के होते हैं:

उनके ऑप्टिकल पथ के आधार पर प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी दो प्रकार के होते हैं:

1. ट्रांसमिशन प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप: प्रतिदीप्ति को उत्तेजित करने के लिए उत्तेजना प्रकाश स्रोत को एक कंडेनसर के माध्यम से नमूना सामग्री के माध्यम से प्रेषित किया जाता है। आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले डार्क फील्ड लाइट कलेक्टर, या साधारण लाइट कलेक्टर, का उपयोग नमूने पर उत्तेजना प्रकाश और साइड लाइट को परिवर्तित करने के लिए परावर्तक को समायोजित करने के लिए किया जा सकता है। यह अपेक्षाकृत पुराने ज़माने का प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी है। इसका लाभ यह है कि प्रतिदीप्ति कम आवर्धन पर मजबूत होती है, जबकि इसका नुकसान यह है कि आवर्धन बढ़ने पर प्रतिदीप्ति कमजोर हो जाती है। इसलिए, बड़े नमूना सामग्रियों का अवलोकन करना बेहतर है।

2. फॉलिंग बीम प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी यह आधुनिक समय में विकसित एक नए प्रकार का प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी है। पिछले वाले के विपरीत, उत्तेजना प्रकाश वस्तुनिष्ठ लेंस से नमूने की सतह तक गिरता है, प्रतिदीप्ति एकत्र करने के लिए रोशनी कंडेनसर और वस्तुनिष्ठ लेंस के समान वस्तुनिष्ठ लेंस का उपयोग करता है। ऑप्टिकल पथ में एक दोहरे रंग बीम विभाजक को जोड़ने की आवश्यकता है, जो प्रकाश यूरेनियम से 45 डिग्री के कोण पर है। उत्तेजना प्रकाश वस्तुनिष्ठ लेंस में परावर्तित होता है और नमूने पर केंद्रित होता है। नमूने द्वारा उत्पन्न प्रतिदीप्ति, साथ ही उद्देश्य लेंस और कवर ग्लास की सतह से परावर्तित उत्तेजना प्रकाश, एक साथ उद्देश्य लेंस में प्रवेश करते हैं और उत्तेजना और प्रतिदीप्ति को अलग करते हुए डाइक्रोइक बीम विभाजक पर लौट आते हैं। फिर अवशिष्ट उत्तेजना को अवरोधक फ़िल्टर द्वारा अवशोषित कर लिया जाता है। यदि विभिन्न उत्तेजना फिल्टर/दोहरे रंग बीम विभाजक/अवरुद्ध फिल्टर संयोजन का उपयोग किया जाता है, तो वे विभिन्न फ्लोरोसेंट प्रतिक्रिया उत्पादों की जरूरतों को पूरा कर सकते हैं। इस फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप का लाभ यह है कि दृष्टि रोशनी का क्षेत्र एक समान है, इमेजिंग स्पष्ट है, और आवर्धन जितना बड़ा होगा, प्रतिदीप्ति उतनी ही मजबूत होगी।

(2) प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का उपयोग

1. प्रकाश स्रोत चालू करें, और अति-उच्च दबाव पारा लैंप को अपने चरम तक पहुंचने के लिए कुछ मिनटों के लिए पहले से गरम करना होगा।

2. ट्रांसमिशन प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप को लैंप स्रोत और कंडेनसर के बीच आवश्यक उत्तेजना फ़िल्टर स्थापित करने की आवश्यकता होती है, और ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे संबंधित अवरोधक फ़िल्टर स्थापित किया जाना चाहिए। गिरती किरण प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप को ऑप्टिकल पथ के स्लॉट में आवश्यक उत्तेजना फ़िल्टर/दोहरी रंग बीम विभाजक/अवरुद्ध फ़िल्टर ब्लॉक डालने की आवश्यकता होती है।

3. कम-शक्ति वाले माइक्रोस्कोप से निरीक्षण करें और प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के विभिन्न मॉडलों के समायोजन उपकरणों के अनुसार प्रकाश स्रोत के केंद्र को समायोजित करें, ताकि यह संपूर्ण रोशनी वाले स्थान के केंद्र में स्थित हो।

4. नमूना स्लाइस रखें और उन्हें देखने के लिए फोकस करें। उपयोग के दौरान, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि आंखों की क्षति से बचने के लिए अंतिम फिल्टर को सीधे आंखों से नहीं देखा जाना चाहिए; तेल माइक्रोस्कोप से नमूनों का अवलोकन करते समय, एक विशेष गैर फ्लोरोसेंट तेल माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जाना चाहिए; उच्च दबाव पारा लैंप बंद होने के बाद, इसे तुरंत फिर से चालू नहीं किया जा सकता है। इसे फिर से शुरू करने के लिए 5 मिनट का समय चाहिए, अन्यथा यह अस्थिर हो जाएगा और पारा लैंप के जीवनकाल को प्रभावित करेगा।

(3) एक नीले बैंगनी प्रकाश फिल्टर का उपयोग करके शिक्षण मंच पर एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के तहत अवलोकन करने पर, यह देखा जा सकता है कि 0.01% एक्रिडीन नारंगी फ्लोरोसेंट डाई से सना हुआ कोशिकाएं, नाभिक और साइटोप्लाज्म दो अलग-अलग उत्पादन करने के लिए उत्तेजित होते हैं प्रतिदीप्ति के रंग (गहरा हरा और नारंगी लाल)।