प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की विशेष संरचनाओं में शामिल हैं:
(आई) फ़िल्टर सिस्टम
फ़िल्टर ब्लॉक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का एक महत्वपूर्ण हिस्सा है। इसके मुख्य घटकों में एक उत्तेजना फिल्टर (पहला बैरियर फिल्टर), एक उत्सर्जन फिल्टर (दूसरा बैरियर फिल्टर) और एक बीम-विभाजन दर्पण शामिल है। मॉडल पदनाम और फ़िल्टर के नाम निर्माताओं के बीच भिन्न-भिन्न होते हैं।
उत्तेजना फिल्टर और उत्सर्जन फिल्टर प्रकाश स्रोत और फ्लोरोक्रोम की विशेषताओं के आधार पर, निम्नलिखित तीन मिलान संयोजन आमतौर पर चुने जाते हैं। वे एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य सीमा के भीतर उत्तेजना प्रकाश प्रदान करते हैं और नमूने द्वारा उत्सर्जित प्रतिदीप्ति को इमेजिंग के लिए ऐपिस तक पहुंचाते हैं।
पराबैंगनी उत्तेजना: उत्तेजना फिल्टर पराबैंगनी प्रकाश संचारित करता है और 400 एनएम से ऊपर दृश्य प्रकाश को अवरुद्ध करता है। संबंधित उत्सर्जन फ़िल्टर नीली रोशनी को पारित करने की अनुमति देता है, जिससे दृश्य क्षेत्र में एक नीली छवि बनती है, उदाहरण के लिए, डीएपीआई धुंधलापन के लिए।
नीली रोशनी उत्तेजना: उत्तेजना फ़िल्टर नीली रोशनी प्रसारित करता है और अन्य तरंग दैर्ध्य की रोशनी को अवरुद्ध करता है। संबंधित उत्सर्जन फ़िल्टर हरी रोशनी को पारित करने की अनुमति देता है, उदाहरण के लिए, जीएफपी लेबलिंग के लिए।
हरी प्रकाश उत्तेजना: उत्तेजना फिल्टर हरी रोशनी प्रसारित करता है और अन्य तरंग दैर्ध्य की रोशनी को अवरुद्ध करता है। संबंधित उत्सर्जन फ़िल्टर आमतौर पर लाल रोशनी को पारित करने की अनुमति देता है, उदाहरण के लिए, रोडामाइन धुंधलापन के लिए।
बीम-स्प्लिटिंग मिरर यह उत्तेजना प्रकाश को पूरी तरह से अवरुद्ध और प्रतिबिंबित करता है, जबकि संबंधित तरंग दैर्ध्य रेंज के उत्सर्जन प्रकाश को प्रसारित करता है। इसका मॉडल उत्तेजना फिल्टर और उत्सर्जन फिल्टर से मेल खाता है।
(II) उद्देश्य और ऐपिस
अधिकांश उद्देश्यों का उपयोग किया जा सकता है, लेकिन अपोक्रोमैटिक, अक्रोमेटिक उद्देश्यों को प्राथमिकता दी जाती है। उनके पास प्रतिदीप्ति अनुप्रयोगों के लिए बेहद कम ऑटोफ्लोरेसेंस और उपयुक्त संप्रेषण (तरंग दैर्ध्य रेंज) है। माइक्रोस्कोप के दृश्य क्षेत्र में एक छवि की प्रतिदीप्ति चमक उद्देश्य संख्यात्मक एपर्चर के वर्ग के समानुपाती होती है और इसके आवर्धन के व्युत्क्रमानुपाती होती है। प्रतिदीप्ति छवियों की चमक में सुधार करने के लिए, बड़े संख्यात्मक एपर्चर वाले उद्देश्यों का उपयोग किया जाना चाहिए। विशेष रूप से कमजोर फ्लोरोसेंट नमूनों के लिए, बड़े संख्यात्मक एपर्चर और उच्च प्रकाश संप्रेषण वाले उद्देश्यों का चयन करें, जिन्हें न्यूनतम संभव आवर्धन ऐपिस के साथ जोड़ा गया है।
(III) अन्य ऑप्टिकल घटक
परावर्तक दर्पण: इसकी परावर्तक परत आमतौर पर एल्यूमीनियम-लेपित होती है। एल्युमीनियम में पराबैंगनी प्रकाश और दृश्य प्रकाश के नीले-बैंगनी बैंड के लिए कम अवशोषण होता है, जिसका परावर्तन 90% से अधिक होता है (चांदी केवल 70% तक ही पहुंचती है)। सामान्यतः समतल दर्पण अपनाए जाते हैं। कंडेनसर: प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के लिए विशेष रूप से डिज़ाइन किए गए कंडेनसर क्वार्ट्ज ग्लास या अन्य यूवी-पारदर्शी ग्लास से बने होते हैं। एपी-रोशनी इकाई: एक संचरित प्रकाश स्रोत के कार्य के अलावा, यह अपारदर्शी और अर्ध-पारदर्शी नमूनों जैसे मोटे स्लाइस, फिल्टर झिल्ली, बैक्टीरिया कालोनियों और ऊतक संस्कृतियों के प्रत्यक्ष अवलोकन के लिए अधिक उपयुक्त है। कई नव विकसित प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी एपि-रोशनी प्रणालियों को अपनाते हैं, जिन्हें एपिफ्लोरेसेंस सूक्ष्मदर्शी के रूप में जाना जाता है।
