चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी का उपयोग करने के लिए कई नोट्स और युक्तियाँ
फेज़ कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी का उपयोग
1) चरण कंट्रास्ट डिवाइस स्थापित करें: साधारण माइक्रोस्कोप के कंडेनसर लेंस को हटा दें, और एक मिलान माइक्रोस्कोप पर कुंडलाकार डायाफ्राम के साथ कंडेनसर लेंस स्थापित करें; माइक्रोस्कोप के सामान्य ऑब्जेक्टिव लेंस को हटा दें, और इसे चरण प्लेट वाले ऑब्जेक्टिव लेंस से बदल दें; चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप के लिए ऐपिस को फ़ोकसिंग ऐपिस से बदलें; प्रकाश स्रोत के प्रकाश प्रवेश द्वार पर विशेष हरे फिल्टर (कभी-कभी आवश्यक नहीं) लगाए जाते हैं।
2) प्रकाश संरेखण और फोकस: फोकसिंग ऐपिस और मोटाई समायोजन पेंच को तब तक समायोजित करें जब तक कि दृश्य क्षेत्र में एक सफेद वृत्त और एक काला वृत्त स्पष्ट रूप से दिखाई न दे। काले घेरे को ठीक कर दिया गया है, और सफेद घेरे को कंडेनसर डिवाइस पर स्क्रू को समायोजित करके स्थानांतरित किया जा सकता है, ताकि काला घेरा और सफेद घेरा पूरी तरह से मेल खा जाए। जांच करने के लिए फोकसिंग ऐपिस को हटा दें और इसे माइक्रोस्कोप के मूल ऐपिस से बदल दें।
चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप के उपयोग में समस्याओं का विश्लेषण
1. नमूना मोटाई का प्रभाव चरण कंट्रास्ट अवलोकन करते समय, नमूने की मोटाई 5 माइक्रोन या पतली होनी चाहिए। मोटे नमूने का उपयोग करते समय, नमूने की ऊपरी परत बहुत स्पष्ट होती है, लेकिन गहरी परत धुंधली हो जाएगी और चरण शिफ्ट हस्तक्षेप का कारण बनेगी। और प्रकाश का प्रकीर्णन।
2. कवर ग्लास और स्लाइड ग्लास का प्रभाव नमूना को कवर ग्लास से ढंकना चाहिए, अन्यथा कुंडलाकार डायाफ्राम की चमकदार रिंग और चरण प्लेट की डार्क रिंग को ओवरलैप करना मुश्किल होता है। चरण कंट्रास्ट अवलोकन में स्लाइड ग्लास और कवर ग्लास की ग्लास गुणवत्ता पर भी उच्च आवश्यकताएं हैं। जब खरोंच, असमान मोटाई या असमानता होगी, तो चमकदार रिंग विरूपण और चरण हस्तक्षेप होगा। इसके अलावा, जब स्लाइड बहुत मोटी या बहुत पतली होगी, तो कुंडलाकार डायाफ्राम की चमकदार रिंग बड़ी या छोटी हो जाएगी।
3. हेलो और फेडिंग प्रभाव चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप की इमेजिंग प्रक्रिया में, जब चरण विलंब के कारण एक निश्चित संरचना अंधेरा हो जाती है, तो यह प्रकाश की हानि नहीं है, बल्कि छवि तल पर प्रकाश के पुनर्वितरण का परिणाम है। तो प्रकाश जो स्पष्ट रूप से अंधेरे क्षेत्रों में खो जाता है वह गहरे रंग की वस्तुओं के चारों ओर एक उज्ज्वल प्रभामंडल के रूप में दिखाई देगा। यह चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी का एक नुकसान है, जो बारीक संरचनाओं के अवलोकन में बाधा डालता है, और जब कुंडलाकार डायाफ्राम बहुत संकीर्ण होता है तो हेलो घटना अधिक गंभीर होती है। चरण-कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी में एक और घटना छायांकन प्रभाव है, जो चरण कंट्रास्ट द्वारा देखे जाने पर समान चरण विलंब के साथ एक बड़े क्षेत्र के किनारों पर कंट्रास्ट के नुकसान को संदर्भित करता है।
4. चरण व्युत्क्रमण जब n'n होता है, तो छवि का प्रकाश और गहरा कंट्रास्ट ठीक विपरीत होता है, जिसे चरण व्युत्क्रमण कहा जाता है। यह पहचानने योग्य नहीं है जब चरण अंतर δ=0 होता है, और कंट्रास्ट δ की वृद्धि के साथ बड़ा हो जाता है, और चरण उलटा तब दिखाई देगा जब δ एक निश्चित मूल्य तक बढ़ता रहेगा। 90 प्रतिशत उच्च अवशोषक मान (उच्च कंट्रास्ट) ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते समय, यह परिवर्तन मान लगभग 0.55λ होता है, और 70 प्रतिशत मानक अवशोषण मान ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते समय, यह लगभग 0.33λ होता है . छोटे ऑप्टिकल पथ अंतरों को हल करने के लिए उच्च अवशोषण मूल्यों वाले उद्देश्यों का उपयोग किया जाना चाहिए।
