मल्टीफोटोन लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी के फायदे और नुकसान
मल्टी-फ़ोटॉन लेज़र स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी लेज़र स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी तकनीक पर आधारित एक प्रयोगात्मक विधि है जो 3D दृश्य में अधिक सटीक ऑप्टिकल सेक्शनिंग क्षमताएँ प्रदान करती है। मल्टीफ़ोटॉन प्रतिदीप्ति उत्तेजना विधि सक्रिय नमूनों की न्यूनतम हत्या के साथ नमूनों की उच्च-रिज़ॉल्यूशन वाली प्रतिदीप्ति छवियों को प्राप्त करने के लिए लाल या निकट-अवरक्त प्रकाश की लंबी तरंग दैर्ध्य का उपयोग करती है, जिससे यह जीवित कोशिकाओं, विशेष रूप से मस्तिष्क के स्लाइस, भ्रूण, पूरे अंगों और यहाँ तक कि पूरे जीवों जैसे मोटे जीवित ऊतकों की इमेजिंग के लिए उपयुक्त हो जाती है।
लाभ इस प्रकार हैं:
1, लाल बत्ती या अवरक्त प्रकाश उत्तेजना का उपयोग, प्रकाश बिखराव छोटा है (छोटे कणों के बिखराव और व्युत्क्रम अनुपात की चौथी शक्ति की तरंग दैर्ध्य)।
2, को पिनहोल की आवश्यकता नहीं होती है, यह इमेजिंग क्रॉस-सेक्शन से अधिक बिखरे हुए फोटॉन एकत्र कर सकता है।
3, पिनहोल आउट-ऑफ-फोकस क्षेत्र या फोकल क्षेत्र द्वारा उत्सर्जित बिखरे हुए फोटॉनों के बीच अंतर नहीं कर सकता है, गहरी इमेजिंग सिग्नल-टू-शोर अनुपात में बहु-फोटॉन अच्छा है।
4, एकल फोटॉन उत्तेजना पराबैंगनी या दृश्य प्रकाश में इस्तेमाल किया किरण फोकल विमान तक पहुँचने से पहले नमूना आसानी से अवशोषित और क्षीण हो जाता है, गहरी उत्तेजना के लिए आसान नहीं है।
5, जैविक माइक्रोस्कोप अवलोकन में, * पहला विचार जीव की सक्रिय स्थिति को नुकसान नहीं पहुंचाना है, पानी, आयन सांद्रता, ऑक्सीजन और पोषक तत्व परिसंचरण को बनाए रखना है। प्रकाश अवलोकन अवसरों में, थर्मल और फोटॉन ऊर्जा दोनों को विकिरण, प्रकाश ऊर्जा की मात्रा को नुकसान पहुंचाए बिना कोशिका में रहना चाहिए।
6, मल्टी-फोटोन माइक्रोस्कोप के भी कई फायदे हैं। जैसे कि तीन आयामी संकल्प, गहराई घुसपैठ, बिखराव दक्षता, पृष्ठभूमि प्रकाश, संकेत-से-शोर अनुपात, नियंत्रण, आदि में, पिछले लेजर माइक्रोस्कोप में ऐसी विशेषताएं नहीं हैं या अतुलनीय हैं।
मल्टी-फ़ोटॉन कॉन्फ़ोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोप को विभिन्न शोध और अनुप्रयोग क्षेत्रों में विस्तारित किया गया है। यह नमूनों के प्राकृतिक अवस्था में त्रि-आयामी गैर-विनाशकारी अवलोकन में सक्षम है, और सिस्टम के रिज़ॉल्यूशन और सिग्नल-टू-शोर अनुपात में सुधार कर सकता है। मल्टी-फ़ोटॉन उत्तेजना के बाद सामग्री गुणों के परिवर्तन का उपयोग करके, किसी भी दिशा में त्रि-आयामी ऊंचाई डेटा भंडारण और त्रि-आयामी माइक्रोफैब्रिकेशन को प्राप्त करना भी संभव है, जिसका उच्च अनुप्रयोग मूल्य है। यह माना जा सकता है कि मशीनरी, सामग्री, लेजर तकनीक और मल्टीफ़ोटॉन कॉन्फ़ोकल माइक्रोस्कोपी से संबंधित अन्य तकनीकों के आगे विकास के साथ, मल्टीफ़ोटॉन कॉन्फ़ोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोप का अधिक विकास और व्यापक अनुप्रयोग होगा।
नुकसान इस प्रकार हैं:
1, केवल प्रतिदीप्ति इमेजिंग.
2, यदि नमूने में क्रोमोफोर शामिल हैं जो उत्तेजना प्रकाश को अवशोषित कर सकते हैं, जैसे कि वर्णक, तो नमूना थर्मल रूप से क्षतिग्रस्त हो सकता है।
3, रिज़ॉल्यूशन थोड़ा कम हो गया है, हालांकि इसे कॉन्फोकल एपर्चर के एक साथ उपयोग से सुधारा जा सकता है, लेकिन सिग्नल हानि होगी।
4. महंगी अल्ट्राफास्ट लेजर की सीमाओं के कारण मल्टीफोटोन स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी की लागत अधिक है।
