जैविक सूक्ष्मदर्शी का उपयोग करके ऊतक ब्लॉक आयतन का मापन
अब तक, क्रायोफिक्सेशन, फ्रोज़न अल्ट्रा{0}}थिन सेक्शनिंग, और फ़्रीज़{1}सुखाना ऊतक और सेल एक्स{2}रे माइक्रोस्कोपी के लिए नियमित तरीके हैं। कृपया इस विधि के संबंध में निम्नलिखित विवरण प्रदान करें:
स्पॉटलाइट के साथ एक जैविक माइक्रोस्कोप मध्यम चमक प्राप्त करने के लिए स्पॉटलाइट को ऊपर और नीचे ले जा सकता है, और मध्यम चमक प्राप्त करने के लिए चर एपर्चर के एपर्चर को भी बदला जा सकता है। यदि प्रकाश सूर्य से है, तो स्पॉटलाइट को उचित रूप से उठाया जा सकता है और परिवर्तनशील प्रकाश के एपर्चर को उचित रूप से बढ़ाया जा सकता है। यदि प्रकाश बहुत तेज़ है, तो स्पॉटलाइट को उचित रूप से कम किया जा सकता है, और चौराहे के एपर्चर को उचित रूप से कम किया जा सकता है। यदि आप इस स्थिति में अभी भी चकाचौंध महसूस करते हैं, तो आप स्पॉटलाइट के नीचे ब्रैकेट पर एक उपयुक्त फ़िल्टर लगाना चुन सकते हैं। यह ओक ऐसी चमक प्राप्त कर सकता है जो आपको संतुष्ट करती है। बेशक, स्पॉटलाइट की ऊपरी और निचली स्थिति को समायोजित करने से प्रकाश पढ़ने के एपर्चर का आकार बदल सकता है और उपयुक्त फिल्टर का चयन किया जा सकता है, जिसके लिए एक निश्चित अवधि के अभ्यास और अनुभव की आवश्यकता होती है।
जैविक माइक्रोस्कोपी में एक बहुत ही महत्वपूर्ण मुद्दा कोशिकाओं के नमूने लेने और उन्हें अलग करने की प्रक्रिया है। फ़्रीज़{1}सुखाने और रेज़िन एंबेडिंग (एफडी) के बाद, फ्रोज़न अल्ट्रा{2}}पतले खंडों को सावधानीपूर्वक संसाधित किया जाना चाहिए ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि अवलोकन और विश्लेषण के दौरान प्रत्येक भाग की 65 तत्व सामग्री क्षतिग्रस्त न हो। एक्स-रे माइक्रोएनालिसिस में शामिल कई चरणों और उच्च लागत के कारण, यदि विश्लेषण की गई कोशिकाएं लंबे और बहु-चरणीय प्रसंस्करण के बाद क्षतिग्रस्त या मृत हो जाती हैं, तो गलत निष्कर्ष निकालना खेदजनक है। जिलेटिनेज़ उपचार द्वारा अलग की गई मायोकार्डियल कोशिकाओं के दो रूप होते हैं, एक लंबी छड़ के आकार का और दूसरा गोलाकार। उत्तरार्द्ध मरने वाली कोशिकाओं को संदर्भित करता है जो कोशिका पृथक्करण की प्रक्रिया के दौरान क्षतिग्रस्त हो जाती हैं।
इन दो प्रकार की कोशिकाओं में इलेक्ट्रोलाइट्स की सामग्री और वितरण एक जैविक माइक्रोस्कोप के तहत बहुत भिन्न होते हैं। सर्कुलर कार्डियोमायोसाइट्स में Na बहुत अधिक है और K बेहद कम है, और रैखिक डेंड्राइट्स में Ca की सांद्रता बहुत अधिक है। अन्य विश्लेषणात्मक तरीकों से सत्यापन के बाद, यह साबित हो गया है कि गोलाकार कोशिकाओं में उच्च Na और निम्न K और माइटोकॉन्ड्रिया में उच्च Ca कोशिका पृथक्करण के दौरान झिल्ली क्षति का परिणाम है। कोशिकाओं और ऊतकों के लिए शीत स्थिरीकरण विधि में अक्सर पहले शमन और फिर उन्हें तरल नाइट्रोजन में संग्रहीत करना शामिल होता है। संरक्षण प्रभाव के लिए शमन निर्धारण महत्वपूर्ण है। जीवित कोशिकाएं या ताजे ऊतक पानी से समृद्ध होते हैं, और जब बुझते हैं, तो कोशिकाओं या ऊतकों के वे हिस्से जो रेफ्रिजरेंट के सीधे संपर्क में आते हैं (विशेषकर जब ठंडा करने के लिए तरल नाइट्रोजन का उपयोग करते हैं) अक्सर पहले जम जाते हैं और स्थिर हो जाते हैं, जिससे एक "शेल" बनता है जो कोशिकाओं के मध्य भाग को कुचलने और स्थिर होने से रोकता है। इसलिए, एक्स-रे माइक्रोएनालिसिस करते समय, अक्सर यह पाया जाता है कि बड़ी कोशिकाओं के मध्य भाग में बर्फ के क्रिस्टल मौजूद होते हैं। इस स्थिति को होने से रोकने के लिए, तरल नाइट्रोजन से अधिक लेकिन 806c से कम गलनांक वाले पदार्थ को रेफ्रिजरेंट के रूप में उपयोग किया जाता है। इनमें से कई पदार्थ हैं, लेकिन उन्हें प्राप्त करना आसान है और सबसे किफायती केंद्रित प्रोपेन (क्वथनांक 42.120 सी, पिघलने बिंदु 187.10 सी, आणविक भार 44.1) है, जिसकी शीतलन दर भी तेज है। लेकिन इसका नुकसान यह है कि यह ज्वलनशील होता है।
