बहु-फोटॉन लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी के फायदे और नुकसान का परिचय
1। लाल या अवरक्त प्रकाश से उत्साहित, प्रकाश प्रकीर्णन छोटा है, और छोटे कणों का बिखरना तरंग दैर्ध्य की चौथी शक्ति के विपरीत आनुपातिक है।
2। इमेजिंग क्रॉस-सेक्शन से अधिक बिखरे हुए फोटॉन को पिनहोल की आवश्यकता के बिना एकत्र किया जा सकता है।
3। पिनहोल डिफोक्यूज्ड या फोकल क्षेत्रों से उत्सर्जित बिखरे हुए फोटॉनों को अलग नहीं कर सकते हैं, और मल्टीफ़ोटन में गहरी इमेजिंग में बेहतर सिग्नल-टू-शोर अनुपात होता है।
4। एकल फोटॉन उत्तेजना के लिए उपयोग किए जाने वाले पराबैंगनी या दृश्यमान प्रकाश को आसानी से अवशोषित कर लिया जाता है और नमूना द्वारा बीम को फोकल विमान तक पहुंचने से पहले देखा जाता है, जिससे गहरी परतों को उत्तेजित करना मुश्किल हो जाता है।
5। जैविक माइक्रोस्कोपी अवलोकन के संदर्भ में, पहला विचार जीव की सक्रिय स्थिति को नुकसान नहीं पहुंचाना है, पानी, आयन एकाग्रता, ऑक्सीजन और पोषक तत्वों के संचलन को बनाए रखना है। प्रकाश अवलोकन के क्षेत्र में, थर्मल और फोटॉन ऊर्जा दोनों को विकिरण खुराक और प्रकाश ऊर्जा के भीतर रहना चाहिए जो कोशिकाओं को नुकसान नहीं पहुंचाता है।
6। मल्टीहोटन माइक्रोस्कोपी के कई फायदे हैं। त्रि-आयामी संकल्प, गहराई आक्रमण, बिखरने की दक्षता, पृष्ठभूमि प्रकाश, सिग्नल-टू-शोर अनुपात, नियंत्रण, आदि के संदर्भ में, ऐसी विशेषताएं हैं जो पिछले लेजर माइक्रोस्कोप के पास नहीं हैं या न ही पार नहीं कर सकते हैं
मल्टीहोटन लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोप के नुकसान:
1। केवल प्रतिदीप्ति इमेजिंग के लिए।
2। यदि नमूने में क्रोमोफोर शामिल हैं जो उत्तेजना प्रकाश को अवशोषित कर सकते हैं, तो नमूना थर्मल क्षति के अधीन हो सकता है।
3। संकल्प थोड़ा कम हो गया है, हालांकि इसे एक साथ कन्फोकल छोटे छेदों का उपयोग करके सुधार किया जा सकता है, सिग्नल लॉस है।
4। महंगे अल्ट्राफास्ट लेज़रों की सीमाओं के कारण, मल्टीहोटन स्कैनिंग माइक्रोस्कोप की लागत अपेक्षाकृत अधिक है।
