प्रत्यक्ष सूक्ष्मजीववैज्ञानिक सूक्ष्म गणना
हेमेटोक्रिट प्लेट का उपयोग करके माइक्रोस्कोप के नीचे प्रत्यक्ष गिनती सूक्ष्मजीव गणना की एक आम तौर पर इस्तेमाल की जाने वाली विधि है। इस विधि का लाभ यह है कि यह सहज और तेज़ है। उचित रूप से पतला बैक्टीरिया निलंबन (या बीजाणु निलंबन) हेमेटोक्रिट प्लेट की स्लाइड और कवरस्लिप के बीच गिनती कक्ष में रखा जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे गिना जाता है। चूँकि गिनती कक्ष का आयतन स्थिर (0.1 mm2) है, इसलिए माइक्रोस्कोप के नीचे देखे गए सूक्ष्मजीवों की संख्या को प्रति इकाई आयतन में कुल सूक्ष्मजीवों की संख्या में परिवर्तित किया जा सकता है। इस विधि को कुल बैक्टीरिया गिनती के रूप में भी जाना जाता है क्योंकि यह जीवित और मृत जीवों की कुल संख्या की गणना करता है।
हेमेटोक्रिट प्लेट, आमतौर पर तीन प्लेटफ़ॉर्म वाली एक विशेष स्लाइड जिसमें चार स्लॉट होते हैं। बीच के प्लेटफ़ॉर्म को एक छोटे क्षैतिज खांचे द्वारा दो हिस्सों में विभाजित किया गया है, प्लेटफ़ॉर्म के प्रत्येक पक्ष पर एक वर्गाकार ग्रिड उकेरा गया है, प्रत्येक वर्गाकार ग्रिड को कुल नौ बड़े वर्गों में विभाजित किया गया है, बड़े वर्ग का मध्य भाग गिनती कक्ष है, गिनती कक्ष में माइक्रोबियल गिनती की जाती है। रक्त गिनती प्लेट को चित्र VIII-1 में दिखाया गया है।
गणना कक्ष का पैमाना आम तौर पर दो आकारों का होता है, एक जिसमें एक बड़ा वर्ग 16 मध्यम वर्गों में विभाजित होता है, जिनमें से प्रत्येक 25 छोटे वर्गों में विभाजित होता है (चित्र VIII-2), और दूसरा जिसमें एक बड़ा वर्ग 25 मध्यम वर्गों में विभाजित होता है, जिनमें से प्रत्येक 16 छोटे वर्गों में विभाजित होता है (चित्र VIII-1, C)। हालाँकि, प्रत्येक बड़े वर्ग में छोटे वर्गों की संख्या गणना बोर्ड के किसी भी आकार के लिए समान होती है, यानी, 16 × 25=400 छोटे वर्ग, जैसा कि चित्र VIII-2 में दिखाया गया है।
प्रत्येक बड़े वर्ग की भुजा की लम्बाई 1 मिमी है, इसलिए प्रत्येक बड़े वर्ग का क्षेत्रफल 1 मिमी2 है, और कवरस्लिप को ढकने के बाद, स्लाइड और कवरस्लिप के बीच की ऊंचाई 0.1 मिमी है, इसलिए गणना कक्ष का आयतन 0.1 मिमी3 है।
गिनती करते समय, आमतौर पर पांच मध्य वर्गों में बैक्टीरिया की कुल संख्या की गणना करें, और फिर प्रत्येक मध्य वर्ग का औसत मूल्य प्राप्त करें, फिर एक बड़े वर्ग में बैक्टीरिया की कुल संख्या प्राप्त करने के लिए इसे 16 या 25 से गुणा करें, और फिर इसे 1 मिलीलीटर बैक्टीरिया समाधान में बैक्टीरिया की कुल संख्या में परिवर्तित करें।
