माइक्रोबियल माइक्रोस्कोपी के लिए प्रत्यक्ष गिनती विधि

Apr 12, 2025

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माइक्रोबियल माइक्रोस्कोपी के लिए प्रत्यक्ष गिनती विधि

 

एक माइक्रोस्कोप के तहत सूक्ष्मजीवों को सीधे गिनने के लिए हेमोसाइटोमीटर का उपयोग करना माइक्रोबियल गिनती के लिए आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है। इस पद्धति का लाभ इसकी सहजता और गति है। हेमोसाइटोमीटर स्लाइड और कवर स्लाइड के बीच गिनती कक्ष में उचित रूप से पतला बैक्टीरियल निलंबन (या बीजाणु निलंबन) रखें, और एक माइक्रोस्कोप के नीचे गिनती करें। काउंटिंग रूम (0। 1MM2) की निरंतर मात्रा के कारण, माइक्रोस्कोप के तहत देखे गए सूक्ष्मजीवों की संख्या के आधार पर प्रति यूनिट मात्रा में सूक्ष्मजीवों की कुल संख्या को परिवर्तित किया जा सकता है। इस तथ्य के कारण कि यह विधि जीवित और मृत जीवाणु कोशिकाओं के योग की गणना करती है, इसे कुल बैक्टीरियल काउंट विधि के रूप में भी जाना जाता है।


एक ब्लड सेल काउंटिंग प्लेट आमतौर पर एक विशेष रूप से डिज़ाइन की गई ग्लास स्लाइड होती है जिसमें तीन प्लेटफॉर्म होते हैं। मध्य मंच को आधे में एक छोटे क्षैतिज नाली से विभाजित किया गया है, और मंच के प्रत्येक पक्ष को एक ग्रिड के साथ उत्कीर्ण किया गया है। प्रत्येक ग्रिड को नौ बड़े वर्गों में विभाजित किया गया है, और बीच में बड़ा वर्ग गिनती कक्ष है, जहां माइक्रोबियल गिनती की जाती है।


गिनती कक्ष के पैमाने के लिए आम तौर पर दो विनिर्देश हैं। एक यह है कि एक बड़े वर्ग को 16 मध्य वर्गों में विभाजित किया गया है, और प्रत्येक मध्य वर्ग को आगे 25 छोटे वर्गों (चित्रा VIII -2) में विभाजित किया गया है; एक अन्य विधि एक बड़े वर्ग को 25 मध्य वर्गों में विभाजित करना है, और प्रत्येक मध्य वर्ग को आगे 16 छोटे वर्गों (चित्रा VIII -1, c) में विभाजित किया गया है। लेकिन काउंटिंग बोर्ड के आकार की परवाह किए बिना, प्रत्येक बड़े वर्ग में छोटे वर्गों की संख्या समान है, अर्थात, 16 × 25=400 छोटे वर्ग।


यदि प्रत्येक बड़े वर्ग की साइड की लंबाई 1 मिमी है, तो प्रत्येक बड़े वर्ग का क्षेत्र 1 मिमी 2 है। कवर ग्लास के साथ कवर करने के बाद, स्लाइड और कवर ग्लास के बीच की ऊंचाई 0 1 मिमी है, इसलिए काउंटिंग रूम की मात्रा 0 है। 1 मिमी 3।


गिनती करते समय, पांच वर्गों में बैक्टीरिया की कुल संख्या को आमतौर पर गिना जाता है, और फिर प्रत्येक वर्ग का औसत मूल्य प्राप्त किया जाता है। इसे 16 या 25 से गुणा करने से एक बड़े वर्ग में बैक्टीरिया की कुल संख्या मिलती है, जो तब बैक्टीरिया के समाधान के 1ml में बैक्टीरिया की कुल संख्या में परिवर्तित हो जाती है।

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