सूक्ष्मजीवों की संख्या का निर्धारण - सूक्ष्मदर्शी प्रत्यक्ष गणना विधि!
मौलिक
सूक्ष्मदर्शी प्रत्यक्ष गिनती विधि एक निश्चित क्षेत्र और आयतन के साथ एक विशेष ग्लास स्लाइड (जिसे बैक्टीरिया काउंटर के रूप में भी जाना जाता है) पर परीक्षण किए जाने वाले नमूने के निलंबन की एक छोटी मात्रा रखने और सीधे नीचे गिनती करने की एक सरल, तेज़ और सहज विधि है। एक माइक्रोस्कोप. वर्तमान में, देश और विदेश में आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले बैक्टीरिया काउंटरों में शामिल हैं: रक्त कोशिका गिनती बोर्ड, पीटरऑफ़-हौसर बैक्टीरिया काउंटर और हॉक्सले बैक्टीरिया काउंटर, आदि। इन सभी का उपयोग खमीर, बैक्टीरिया और मोल्ड बीजाणुओं जैसे निलंबन की गिनती के लिए किया जा सकता है, और मूल सिद्धांत समान हैं. बाद के दो बैक्टीरिया काउंटरों का कुल आयतन 0 है। कवर ग्लास से ढकने के बाद 2 मिमी 3 है, और कवर ग्लास और स्लाइड के बीच की दूरी केवल 0.02 मिमी है, इसलिए छोटी कोशिकाएँ जैसे बैक्टीरिया को तेल विसर्जन उद्देश्य लेंस से देखा और गिना जा सकता है। इन बैक्टीरिया काउंटरों का उपयोग करने के अलावा, माइक्रोस्कोप के तहत स्मीयर क्षेत्र और दृश्य क्षेत्र क्षेत्र के अनुपात को सीधे देखने की एक अनुमान विधि भी है। इस विधि का उपयोग आम तौर पर दूध की जीवाणुविज्ञानी जांच के लिए किया जाता है। माइक्रोस्कोप प्रत्यक्ष गणना पद्धति का लाभ यह है कि यह सहज, तेज़ और संचालित करने में आसान है। लेकिन इस पद्धति का नुकसान यह है कि मापे गए परिणाम आमतौर पर मृत और जीवित जीवाणुओं का योग होते हैं। वर्तमान में, इस कमी को दूर करने के लिए कुछ तरीके हैं, जैसे कि जीवित जीवाणुओं को माइक्रोचैम्बर कल्चर (अल्पकालिक) से धुंधला करना और केवल जीवित जीवाणुओं की गिनती के उद्देश्य को प्राप्त करने के लिए कोशिका विभाजन अवरोधकों को जोड़ना।
इस प्रयोग में, माइक्रोस्कोप के तहत सीधी गिनती करने के लिए एक हेमोसाइटोमीटर का उपयोग एक उदाहरण के रूप में किया गया था। अन्य दो बैक्टीरिया काउंटरों के उपयोग के तरीकों के लिए, कृपया प्रत्येक निर्माता के निर्देश देखें। हेमोसाइटोमीटर के साथ माइक्रोस्कोप के तहत सीधी गिनती आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली माइक्रोबियल गिनती विधि है। काउंटिंग बोर्ड एक विशेष रूप से बनाई गई ग्लास स्लाइड है, जिस पर चार स्लॉट तीन प्लेटफॉर्म बनाते हैं; बीच में चौड़े मंच को एक छोटे क्षैतिज स्लॉट द्वारा दो हिस्सों में विभाजित किया गया है, और मंच के प्रत्येक किनारे को एक ग्रिड के साथ पंक्तिबद्ध किया गया है। प्रत्येक ग्रिड को नौ बड़े वर्गों में विभाजित किया गया है, और बीच का बड़ा वर्ग गिनती कक्ष है। मतगणना कक्ष के पैमाने में आम तौर पर दो विशिष्टताएं होती हैं, एक यह कि एक बड़े वर्ग को 25 मध्य वर्गों में विभाजित किया जाता है, और प्रत्येक मध्य वर्ग को 16 छोटे वर्गों में विभाजित किया जाता है; दूसरा यह है कि एक बड़े वर्ग को 16 मध्य वर्गों में विभाजित किया गया है, और प्रत्येक मध्य वर्ग को 25 छोटे वर्गों में विभाजित किया गया है, लेकिन इससे कोई फर्क नहीं पड़ता कि किस प्रकार का काउंटिंग बोर्ड है, इसमें 4{8}}0 छोटे वर्ग हैं प्रत्येक बड़ा वर्ग. प्रत्येक बड़े वर्ग की भुजा की लंबाई 1 मिमी है, और फिर प्रत्येक बड़े वर्ग का क्षेत्रफल 1 मिमी 2 है। कवर ग्लास को कवर करने के बाद, कवर ग्लास और स्लाइड ग्लास के बीच की ऊंचाई 0.1 मिमी है, इसलिए का आयतन गिनती कक्ष 0.1 मिमी (एक मिलीलीटर का दस हजारवां हिस्सा) है।
