कन्फोकल माइक्रोस्कोप और साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप की तुलना
माइक्रोस्कोप कोशिकाओं का निरीक्षण करने का मुख्य उपकरण है। प्रकाश स्रोत के आधार पर, इसे दो श्रेणियों में विभाजित किया जा सकता है: ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप। पहला दृश्य प्रकाश (पराबैंगनी प्रकाश के लिए पराबैंगनी माइक्रोस्कोप) को प्रकाश स्रोत के रूप में उपयोग करता है, जबकि दूसरा प्रकाश स्रोत के रूप में इलेक्ट्रॉन बीम का उपयोग करता है। साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और लेजर कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप एक ही ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप से संबंधित हैं।
I. सामान्य ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप
साधारण जैविक सूक्ष्मदर्शी में तीन भाग होते हैं, अर्थात्: ① रोशनी प्रणाली, जिसमें प्रकाश स्रोत और कंडेनसर शामिल हैं; ② ऑप्टिकल आवर्धन प्रणाली, जिसमें उद्देश्य और ऐपिस शामिल हैं, माइक्रोस्कोप का मुख्य निकाय है, गोलाकार विचलन और रंगीन विचलन को खत्म करने के लिए, ऐपिस और उद्देश्य एक जटिल लेंस समूह से बने होते हैं; ③ यांत्रिक उपकरण, सामग्री को ठीक करने और सुविधा के अवलोकन के लिए उपयोग किया जाता है।
माइक्रोस्कोप वस्तु स्पष्ट न केवल आवर्धन द्वारा निर्धारित है, लेकिन यह भी माइक्रोस्कोप के संकल्प शक्ति (संकल्प) के साथ, संकल्प शक्ति माइक्रोस्कोप (या लक्ष्य से मानव आंख 25cm) वस्तु zui छोटे अंतराल भेद कर सकते हैं को संदर्भित करता है संकल्प शक्ति के आकार भेद करने की क्षमता प्रकाश की तरंग दैर्ध्य और दर्पण मुंह दर और माध्यम के अपवर्तक सूचकांक, सूत्र में व्यक्त द्वारा निर्धारित किया जाता है:
आर=0.61λ /NANA=nsin /2 जहाँ: n=माध्यम का अपवर्तनांक;=दर्पण मुख कोण (तनाव के कोण के ऑब्जेक्टिव लेंस मुख पर नमूना), NA=दर्पण मुख दर (संख्यात्मक एपर्चर)। दर्पण के मुख का कोण हमेशा 180° से कम होना चाहिए, इसलिए sina/2 का zui मान अनिवार्य रूप से 1 से कम होना चाहिए।
ऑप्टिकल लेंस के उत्पादन में उपयोग किए जाने वाले कांच का अपवर्तनांक 1.65 ~ 1.78 है, उपयोग किए जाने वाले माध्यम का अपवर्तनांक कांच के जितना करीब होगा उतना बेहतर होगा। शुष्क ऑब्जेक्टिव लेंस के लिए, हवा के लिए माध्यम, दर्पण मुंह की दर आम तौर पर 0.05 ~ 0.95 होती है; देवदार के तेल को माध्यम के रूप में इस्तेमाल करने वाले तेल लेंस, दर्पण मुंह की दर 1.5 के करीब हो सकती है।
साधारण प्रकाश तरंगदैर्ध्य 400~700nm है, इसलिए माइक्रोस्कोप संकल्प शक्ति मूल्य 0.2μm से कम नहीं होगा, मानव आंख की संकल्प शक्ति 0.2 मिमी है, इसलिए माइक्रोस्कोप ज़ुई आवर्धन का सामान्य डिजाइन आमतौर पर 1000X है।
दूसरा, लेजर कॉन्फोकल स्कैनिंग माइक्रोस्कोप
लेजर कन्फोकल स्कैनिंग माइक्रोस्कोप (लेजर कन्फोकल स्कैनिंग माइक्रोस्कोप), एक स्कैनिंग प्रकाश स्रोत के रूप में एक लेजर के साथ, बिंदु दर बिंदु, रेखा दर रेखा, सतह दर सतह तेजी से स्कैनिंग इमेजिंग, एक सामान्य उद्देश्य के स्कैनिंग लेजर और प्रतिदीप्ति संग्रह, उद्देश्य स्कैनिंग लेजर फोकसिंग बिंदु, लेकिन वस्तु बिंदु की तात्कालिक इमेजिंग भी। लेजर बीम की छोटी तरंग दैर्ध्य के कारण, बीम बहुत महीन होती है, इसलिए कन्फोकल लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोप में एक उच्च रिज़ॉल्यूशन होता है, जो कि सामान्य ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप से लगभग 3 गुना अधिक होता है। सिस्टम एक बार केंद्रित होता है और स्कैन नमूने के एक तल तक सीमित होता है। जब फोकसिंग गहराई समान नहीं होती है, तो नमूने के विभिन्न गहराई स्तरों की छवियां प्राप्त की जा सकती हैं, और इन छवि सूचनाओं को कंप्यूटर में संग्रहीत किया जाता है, कंप्यूटर विश्लेषण और सिमुलेशन के माध्यम से, यह सेल नमूने की त्रि-आयामी संरचना दिखा सकता है।
