कन्फोकल माइक्रोस्कोपी और पारंपरिक ऑप्टिकल माइक्रोस्कोपी के बीच तुलना
माइक्रोस्कोप कोशिकाओं के अवलोकन का मुख्य उपकरण है। विभिन्न प्रकाश स्रोतों के अनुसार, इसे दो श्रेणियों में विभाजित किया जा सकता है: ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप। पहला प्रकाश स्रोत के रूप में दृश्य प्रकाश (पराबैंगनी माइक्रोस्कोप पराबैंगनी प्रकाश का उपयोग करता है) का उपयोग करता है, जबकि दूसरा प्रकाश स्रोत के रूप में इलेक्ट्रॉन किरण का उपयोग करता है। साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप दोनों ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप से संबंधित हैं।
साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप
एक सामान्य जैविक माइक्रोस्कोप में तीन भाग होते हैं, अर्थात्: ① प्रकाश व्यवस्था, जिसमें प्रकाश स्रोत और कंडेनसर शामिल हैं; ② ऑप्टिकल प्रवर्धन प्रणाली, जिसमें एक उद्देश्य और एक ऐपिस शामिल है, माइक्रोस्कोप का मुख्य भाग है। गोलाकार और रंगीन विपथन को खत्म करने के लिए, ऐपिस और ऑब्जेक्टिव दोनों जटिल लेंस समूहों के यांत्रिक उपकरण से बने होते हैं, जिनका उपयोग सामग्री को ठीक करने और अवलोकन की सुविधा के लिए किया जाता है।
माइक्रोस्कोप की छवि की स्पष्टता न केवल उसके आवर्धन पर निर्भर करती है, बल्कि उसके रिज़ॉल्यूशन पर भी निर्भर करती है। रिज़ॉल्यूशन छोटे अंतराल पर वस्तुओं को अलग करने के लिए माइक्रोस्कोप (या लक्ष्य से 25 सेमी की दूरी पर एक मानव आंख) की क्षमता को संदर्भित करता है। रिज़ॉल्यूशन का परिमाण प्रकाश की तरंग दैर्ध्य, एपर्चर सूचकांक और माध्यम के अपवर्तक सूचकांक पर निर्भर करता है। इसे इस प्रकार व्यक्त किया जाता है: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, जहां n=माध्यम का अपवर्तनांक; {{6}एपर्चर कोण (वह कोण जिस पर नमूना वस्तुनिष्ठ लेंस एपर्चर खोलता है), NA=संख्यात्मक एपर्चर। क्या दर्पण का कोना हमेशा 180 से कम होता है?, इसलिए sina/2 के लिए ज़ुई का अधिकतम मान 1 से कम होना चाहिए।
ऑप्टिकल लेंस के उत्पादन में उपयोग किए जाने वाले कांच का अपवर्तनांक 1.65-1.78 है, और उपयोग किए गए माध्यम का अपवर्तनांक कांच के जितना करीब होगा, उतना बेहतर होगा। शुष्क वस्तुनिष्ठ लेंस के लिए, माध्यम हवा है, और एपर्चर अनुपात आम तौर पर 0 होता है। 05-0.95; तेल लेंस माध्यम के रूप में देवदार के तेल का उपयोग करता है, और एपर्चर अनुपात 1.5 के करीब हो सकता है।
साधारण प्रकाश की तरंग दैर्ध्य {{0}}nm है, इसलिए माइक्रोस्कोप का रिज़ॉल्यूशन मान 0.2 μ मीटर से कम नहीं होगा, और मानव आंख का रिज़ॉल्यूशन 0.2 मिमी है। इसलिए, माइक्रोस्कोप डिज़ाइन के लिए अधिकतम आवर्धन आमतौर पर 1000X होता है।
