प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप में प्रत्येक फ़िल्टर के कार्य
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी के साथ सबसे महत्वपूर्ण मुद्दा ऑप्टिकल फिल्टर का संयोजन है। उत्तेजना फ़िल्टर और परिरक्षण फ़िल्टर दोनों ही प्रेक्षित फ्लोरोसेंट सामग्री के लिए उपयुक्त होने चाहिए और एक दूसरे से मेल खाने चाहिए। कुछ विशिष्ट अनुप्रयोगों के लिए, यदि फ़िल्टर चुनने में त्रुटियाँ हैं, तो इससे गलतफहमी हो सकती है और गलत परिणाम भी हो सकते हैं। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी तकनीक की उपलब्धियाँ उच्च गुणवत्ता वाले फिल्टर और चतुराई से मेल खाने वाले फिल्टर समूहों से अविभाज्य हैं। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी के लिए कई प्रकार के फिल्टर हैं।
1. ऊष्मा अवशोषक फिल्टर
प्रकाश स्रोत स्पेक्ट्रम में थर्मल विकिरण को ऑप्टिकल सिस्टम को नुकसान पहुंचाने से रोकने के लिए गर्मी अवशोषित फिल्टर एक आवश्यक फिल्टर है। प्रारंभिक उन्नत सूक्ष्मदर्शी ड्रम के आकार की बोतलों से सुसज्जित थे जो गर्मी को अवशोषित करने वाले उपकरणों के रूप में आसुत जल को धारण कर सकते थे। आधुनिक बड़े पैमाने के अनुसंधान सूक्ष्मदर्शी प्रकाश स्रोत प्रकाश बक्सों या लैंप कक्षों में कांच के ताप अवशोषित फिल्टर से सुसज्जित होते हैं, जो पारदर्शी और थोड़े पीले रंग की कांच की चादरें होती हैं। लीट्ज़ के KG1 (2 मिमी) और BG38 (4 मिमी) फिल्टर 98% तक की प्रकाश संचरण दर के साथ लगभग सभी पराबैंगनी और दृश्य प्रकाश स्पेक्ट्रा संचारित कर सकते हैं। यह केवल अवरक्त फोटोथर्मल विकिरण को चुनिंदा रूप से अवशोषित करता है।
2. उत्तेजना फिल्टर
उत्तेजना फिल्टर लंबी तरंग दैर्ध्य वर्णक्रमीय रेखाओं को चुनिंदा रूप से अवशोषित कर सकते हैं और केवल पराबैंगनी प्रकाश संचारित कर सकते हैं। बैंगनी, नीला और हरा प्रकाश फिल्टर उत्तेजना फिल्टर हैं। ज़ीस, रीचर्ट, ओलंपस की बी सीरीज़, जी सीरीज़, बीजी सीरीज़, शॉट की यूजी सीरीज़, ऑप्टन की एच, जी, बीपी सीरीज़, लेइट्ज़ की बीपी सीरीज़ और अन्य ऑप्टिकल फिल्टर सभी उत्तेजना फिल्टर हैं।
3. फ़िल्टर को अवरुद्ध करना
ब्लॉकिंग फ़िल्टर एक ऐसा फ़िल्टर है जो लंबी तरंगों को देखने की अनुमति देते हुए चुनिंदा रूप से छोटी तरंग वर्णक्रमीय रेखाओं और अवरक्त किरणों को अवशोषित करता है। इसका कार्य पर्यवेक्षक को निरीक्षण की जा रही वस्तु से उत्तेजित प्रतिदीप्ति को देखने में सक्षम बनाना है, साथ ही पर्यवेक्षक के कॉर्निया को यूवी क्षति से बचाना है।
4. रंग पृथक्करण फ़िल्टर
रंग पृथक्करण फ़िल्टर एक फ़िल्टर दर्पण है जो निरीक्षण की जा रही वस्तु पर उत्तेजना प्रकाश को प्रतिबिंबित करता है, जिससे वस्तु प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करती है, और फिर प्रतिदीप्ति को ऐपिस तक पहुंचाती है। इस प्रकार के फिल्टर का उपयोग केवल गिरते प्रकाश कंडेनसर में किया जा सकता है, जबकि एक संचरित प्रकाश प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप को रंग पृथक्करण की आवश्यकता नहीं होती है।
5. हस्तक्षेप फ़िल्टर
हस्तक्षेप फ़िल्टर एक प्रकार का उच्च प्रदर्शन उत्तेजना फ़िल्टर है। यह दो पॉलिश ग्लास शीटों के बीच कई पतली धातु की फिल्मों को जमा करके बनाया गया एक फिल्टर है। प्रत्येक पतली धातु फिल्म का अपवर्तनांक अलग-अलग होता है, इसलिए रोशनी प्रकाश स्रोत की विभिन्न तरंग दैर्ध्य की वर्णक्रमीय रेखाएं प्रत्येक धातु फिल्म पर बार-बार प्रतिबिंबित होती हैं। कुछ तरंग दैर्ध्य की कुछ वर्णक्रमीय रेखाओं को विनाशकारी हस्तक्षेप द्वारा रद्द कर दिया जाता है, जबकि अन्य को योगात्मक हस्तक्षेप द्वारा मजबूत किया जाता है और इसके माध्यम से प्रसारित किया जाता है। इसके परिणामस्वरूप एक संकीर्ण ट्रांसमिशन स्पेक्ट्रम और केवल 6-20nm की आधी शिखर चौड़ाई वाला फ़िल्टर प्राप्त होता है। संप्रेषण 60% -70% तक पहुंच सकता है।
