ऊतक ब्लॉकों के आयतन पर जैविक माइक्रोस्कोपी का प्रदर्शन किया गया
जैविक सूक्ष्मदर्शी कंडेनसर युक्त सूक्ष्मदर्शी कंडेनसर को ऊपर-नीचे घुमाकर उसकी चमक को मध्यम बना सकते हैं, तथा मध्यम 9बी चमक प्राप्त करने के लिए चर प्रकाश विस्तार के एपर्चर को भी बदल सकते हैं। यदि प्रकाश धूप वाला है, तो कंडेनसर को ऊपर की ओर ले जाया जा सकता है तथा चर प्रकाश के एपर्चर को बढ़ाया जा सकता है। यदि प्रकाश बहुत अधिक तीव्र है, तो स्पॉटलाइट दर्पण को उचित रूप से नीचे किया जा सकता है, चर प्रकाश के एपर्चर को उचित रूप से कम करने के लिए छलांग लगाई जा सकती है। यदि इस मामले में भी चकाचौंध महसूस होती है, तो आप स्पॉटलाइट के नीचे ब्रैकेट में रखे उपयुक्त फ़िल्टर को चुन सकते हैं। इससे आप चमक से संतुष्ट हो सकते हैं। बेशक, कंडेनसर लेंस की ऊपरी और निचली स्थिति के समायोजन में प्रकाश पढ़ने के एपर्चर के आकार को बदलना और उपयुक्त फ़िल्टर का चयन करना, जो कि अभ्यास और अनुभव की एक निश्चित अवधि के बाद होता है।
जैविक सूक्ष्मदर्शी एक बहुत ही महत्वपूर्ण मुद्दा कोशिकाओं के नमूने और पृथक्करण की प्रक्रिया में है, फ्रीज-ड्रायिंग और रेजिन एम्बेडिंग (एफडी) अल्ट्रा-बुकलेट को फ्रीज करने के बाद, 65 तत्व संरचना सामग्री के प्रत्येक भाग के ठीक चलने के बाद फ्रीज-ड्रायिंग को बहुत सावधानी से संभाला जाना चाहिए, और देखे जाने और विश्लेषण किए जाने वाले कोशिकाओं को नुकसान नहीं पहुंचाना चाहिए। क्योंकि एक्स-रे माइक्रो-एरिया विश्लेषण न केवल बहुत सारे कदम हैं, और लागत बहुत अधिक है, अगर लंबे समय और प्रसंस्करण के कई चरणों के बाद, विश्लेषण की गई कोशिकाएं क्षतिग्रस्त कोशिकाएं या मृत कोशिकाएं हैं, तो गलत निष्कर्ष निकालना बहुत अफसोसजनक है। उदाहरण के लिए, कोलेजनेज उपचार द्वारा अलग किए गए कार्डियोमायोसाइट्स में दो आकृति विज्ञान हैं, एक लंबी छड़ के आकार का है और दूसरा गोल है
जैविक सूक्ष्मदर्शी मायोफाइबर को एक विशेष रैक पर रखा जा सकता है, ताकि इस मायोफाइबर का संकुचन एक निश्चित समय चरण तक पहुँच जाए जब इसे ठीक करने की आवश्यकता होती है, और फिर तुरंत नोजल को सक्रिय करें, ताकि तरल प्रोपेन को मायोफाइबर पर स्प्रे किया जाए, ताकि इसे बुझाया जा सके और ठंडा किया जा सके। फिर मांसपेशी फाइबर को रैक के साथ बाहर निकाला जाता है और तरल नाइट्रोजन में डाल दिया जाता है। यदि रक्त कोशिकाओं या अलग-थलग कोशिकाओं को ठीक करना है, तो पहले कम गति वाले सेंट्रीफ्यूजेशन से कोशिकाओं को केंद्रित किया जाता है, कोशिकाओं को चांदी की ट्यूब की अच्छी तापीय चालकता में स्थानांतरित किया जाएगा, ट्यूब को तरल प्रोपेन शव में ठंडा किया जाएगा। हॉल प्रयोगशाला ने चूहे के अग्न्याशय को ठीक किया, पहले दो स्टील के टुकड़ों को तरल हीलियम (या तरल नाइट्रोजन) से पहले ठंडा किया, एक क्लैंप के साथ तांबे के दो टुकड़ों को अग्न्याशय के सामने और पीछे रखा जाएगा, ताकि ग्रंथि की चाची को ठंडा किया जा सके। ऊतकों या कोशिकाओं को शमन और फिक्सिंग के बाद उन्हें तरल नाइट्रोजन में स्थानांतरित करके लंबे समय तक संग्रहीत किया जा सकता है।
बायोमाइक्रोस्कोपी वर्तमान में *प्रचारित* जमे हुए अल्ट्राथिन सेक्शन की विधि के अलावा, वैज्ञानिकों द्वारा उपयोग की जाने वाली एक और जमावट तकनीक का वर्णन यहां किया गया है। विश्लेषण से पहले एक पदार्थ मिलाया जाता है ताकि यह विश्लेषण किए जाने वाले घटक के साथ जमा हो जाए ताकि इसे स्थिर किया जा सके, और फिर जमा का विश्लेषण किया जाता है। उदाहरण के लिए, ऑक्सालेट और पाइरोएंटिमोनेट का उपयोग आमतौर पर मायोसाइट्स में सीए जमा करने के लिए किया जाता है; पूर्व कोशिका द्रव्य में सीए की कम सांद्रता के लिए पर्याप्त संवेदनशील नहीं है; पाइरोएंटिमोनेट में उच्च संवेदनशीलता होती है और यह प्लाज्मा में मुक्त सीए के साथ इलेक्ट्रॉनिक रूप से सघन जमाव बनाता है, लेकिन पाइरोएंटिमोनेट सोडियम, मैंगनीज, बेरियम और आयरन के साथ भी जमाव बनाता है, जिनकी विशिष्टता कम होती है। नमूना तैयार करने की प्रक्रिया सामान्य ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी अल्ट्राथिन सेक्शन नमूनों के समान थी, अंतर यह था कि 3% पोटेशियम पाइरोएंटिमोनेट (फॉस्फेट बफर, पीएच 7.6) को स्थिरीकरण से पहले 6 घंटे के लिए स्थिर किया गया था, और मांसपेशियों के दागदार अल्ट्राथिन सेक्शन पर, प्रत्येक मायोनेक्टोमी सेक्शन के ए और 2 बैंड की मध्य रेखा में एक काला अवक्षेप देखा गया था, और फिर बिना दाग वाले सेक्शन का उपयोग एक्स-रे माइक्रो-एरिया विश्लेषण के लिए किया गया था। हीमोग्लोबिन युक्त सामग्री को अवक्षेपित करने के लिए डायमिनोबेंज़िडाइन टेट्राहाइड्रोक्लोराइड (DAB) का उपयोग किया गया है। हिस्टोकेमिस्ट्री और एक्स-रे माइक्रो-एरिया ब्रिज की इस तरह की अवक्षेपण प्रतिक्रिया का उपयोग उन प्रयोगशालाओं में किया जा सकता है, जिनमें जमे हुए अल्ट्रा-थिन सेक्शन की स्थिति नहीं होती है। विश्लेषण किए जाने वाले तत्वों की चरम ऊंचाइयों का उपयोग अर्ध-मात्रात्मक विश्लेषण के लिए किया जा सकता है।
