प्रकाश सूक्ष्मदर्शी की इमेजिंग ऑप्टिकल पथ प्रणाली का समायोजन और सूक्ष्म परीक्षण की रूपरेखा

प्रकाश सूक्ष्मदर्शी की इमेजिंग ऑप्टिकल पथ प्रणाली का समायोजन और सूक्ष्म परीक्षण की रूपरेखा

इमेजिंग ऑप्टिकल पथ प्रणाली और सूक्ष्म परीक्षण रूपरेखा का समायोजन

माइक्रोस्कोप के इमेजिंग ऑप्टिकल सिस्टम का समायोजन विभिन्न माइक्रोस्कोपी तकनीकों की ज़रूरतों के अनुसार किया जाता है। संक्षेप में, तथाकथित माइक्रोस्कोपी, माइक्रोस्कोप के माध्यम से किसी नमूने का निरीक्षण करते समय उपयोग की जाने वाली रोशनी की विधि है, और नमूने द्वारा बनाई गई छवि में बेहतर कंट्रास्ट प्राप्त करने की तकनीक और विधि है। निम्नलिखित संक्षेप में माइक्रोस्कोपी के कई तरीकों और इसी माइक्रोस्कोप इमेजिंग ऑप्टिकल सिस्टम समायोजन विधि का वर्णन करता है।

1. संचरण उज्ज्वल क्षेत्र:
माइक्रोस्कोप के आविष्कार के बाद से यह सबसे पारंपरिक और सामान्य अनुप्रयोग विधि है। बुनियादी घटक: a. ऑब्जेक्टिव लेंस: किसी भी ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग उज्ज्वल क्षेत्र अवलोकन के लिए किया जा सकता है; b. स्पॉटिंग स्कोप: सभी प्रकार के स्पॉटिंग स्कोप का उपयोग किया जा सकता है, अधिमानतः एपर्चर डायाफ्राम से सुसज्जित। समायोजन विधि: उपरोक्त माइक्रोस्कोप के कुहलर रोशनी प्रणाली को समायोजित करने के बाद, उज्ज्वल क्षेत्र विधि को लागू किया जा सकता है। आवेदन का दायरा: सभी दाग ​​वाले ऊतक अनुभाग, रक्त स्मीयर, आदि। सावधानियां: a. अवलोकन की उज्ज्वल क्षेत्र विधि का उपयोग करते समय, कुहलर रोशनी प्रणाली को समायोजित किया जाना चाहिए; b. दृश्य क्षेत्र के डायाफ्राम को मनमाने ढंग से नहीं खोला जाना चाहिए, और 10 ×, 10 × से कम और 10 × से अधिक के ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते समय कंडेनसर दर्पण के सामने के लेंस को क्रमशः ऑप्टिकल पथ से बाहर और अंदर तथ्यात्मक रूप से रखा जाना चाहिए कंडेनसर दर्पण के एपर्चर डायाफ्राम का उपयोग दृश्य क्षेत्र की चमक को समायोजित करने के लिए नहीं किया जाना चाहिए, और कंडेनसर दर्पण की ऊंचाई को अंधाधुंध रूप से समायोजित नहीं किया जाना चाहिए, अन्यथा माइक्रोस्कोप का संकल्प कम हो जाएगा और दाग वाले ऊतक का संकल्प क्षतिग्रस्त हो जाएगा। माइक्रोस्कोप का संकल्प और क्षति कुहलर रोशनी प्रणाली में समायोजित की गई है; डी। माइक्रोग्राफ के लिए, उद्देश्य लेंस के आवर्धन के उपयोग में हर बदलाव के लिए, आपको कंडेनसर लेंस के एपर्चर डायाफ्राम को समायोजित करना होगा, ताकि इसका आकार 2/3 के उद्देश्य लेंस में उपयोग किए गए संख्यात्मक एपर्चर के बराबर हो।

2. प्रेषित प्रकाश चरण विपरीत विधि:
यह कंट्रास्ट बढ़ाने की एक आधुनिक माइक्रोस्कोप जांच विधि है। बुनियादी घटक: चरण कंट्रास्ट ऑब्जेक्टिव लेंस, देखने का उज्ज्वल क्षेत्र और चरण कंट्रास्ट बहुउद्देश्यीय स्पॉटिंग स्कोप, फोकसिंग टेलीस्कोप, ग्रीन फिल्टर।

समायोजन विधियाँ:
क. कुहलर रोशनी प्रणाली के समायोजन के आधार पर, उज्ज्वल क्षेत्र विधि का उपयोग करके नमूने को स्पष्ट रूप से फोकस करें

बी. डायल स्केल स्थिति को संरेखित करने के लिए स्पॉटिंग स्कोप को Ph1 पर घुमाएं, 10 × चरण कंट्रास्ट ऑब्जेक्टिव लेंस चुनें, और देखे जाने वाले पारदर्शी नमूने को बदलें।

ग. किसी एक ऐपिस को निकाल दें, उसे एक केंद्रित दूरबीन से बदल दें और दृश्य क्षेत्र में दो फेज कंट्रास्ट रिंगों (ऑब्जेक्टिव लेंस का काला फेज कंट्रास्ट रिंग और कंडेनसर लेंस का प्रकाश संचरण फेज कंट्रास्ट रिंग) पर ध्यान केंद्रित करें।

d. दृश्य क्षेत्र में दो फेज कंट्रास्ट रिंग जरूरी नहीं कि एक ही जैसी हों, स्पॉटिंग स्कोप पर दो एडजस्टिंग डिवाइस को एडजस्ट करें (फेज कंट्रास्ट रिंग एडजस्टमेंट लीवर की बाईं और दाईं स्थिति को एडजस्ट करें और फ्रिक्शन नॉब की आगे और पीछे की स्थिति को एडजस्ट करें), ताकि आगे और पीछे के लिए दाईं और बाईं ओर लाइट ट्रांसमिशन रिंग काली रिंग के साथ मेल खाए

ई. समायोजन के बाद, अवलोकन के लिए ऐपिस को वापस बदलें और नमूने की चरण विपरीत छवि का निरीक्षण करने के लिए हरे रंग के फिल्टर को ऑप्टिकल पथ में दबाएं।

च. जब अवलोकन के लिए 20× और 40× ऑब्जेक्टिव लेंस हों, तो स्पॉटिंग लेंस को Ph2 स्थिति पर सेट किया जाना चाहिए, और 100 ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते समय, स्पॉटिंग लेंस को Ph3 स्थिति पर सेट किया जाना चाहिए।

अनुप्रयोग का दायरा: यह पारदर्शी, अ-रंग या अ-रंगनीय नमूनों के अवलोकन के लिए उपयुक्त है, जैसे कि सभी प्रकार की कोशिकाएं, जीवित ऊतक, अ-रंग या अ-रंगयुक्त ऊतक खंड, जलीय जीव आदि।

3. विभेदक हस्तक्षेप चरण विपरीत विधि:
एक प्रभामंडल के साथ छवि के चारों ओर नमूना विवरण के अवलोकन के चरण विपरीत विधि पर काबू पाने के लिए, उन विवरणों को मुखौटा कर दिया जाएगा जिन्हें देखा जाना चाहिए था, साथ ही नमूने या ऊतक वर्गों को काफी पतली मोटाई की आवश्यकता होती है, सिद्धांत रूप में, 10? मीटर से अधिक मोटा हो सकता है और अन्य सीमाएं, उप-विभेदक हस्तक्षेप चरण विपरीत विधि को डिजाइन करने के लिए दोहरे बीम हस्तक्षेप के सिद्धांत का उपयोग करें।

समायोजन विधियाँ:
क. डीआईसी पद्धति को इस आधार पर समायोजित किया जाना चाहिए कि कुलेमिन प्रणाली को पहले ही समायोजित किया जा चुका है

ख. 10× ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करके, ऑब्जेक्टिव लेंस की फोकसिंग स्थिति निर्धारित करें जो नमूने को उज्ज्वल दृश्य क्षेत्र के साथ स्पष्ट रूप से देख सके।

ग. ध्रुवीकरण यंत्र को प्रकाश पथ में रखें, ध्यान रखें कि यह पूर्व-पश्चिम दिशा में होना चाहिए।

डी. कंडेनसर डायल को 10 × ऑब्जेक्टिव लेंस, यानी, DIC 0.3-0.4 के उपयोग के अनुरूप स्थिति में घुमाएं।

ई. 10× ऑब्जेक्टिव लेंस के लिए DIC स्लाइडर को ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे या ऑब्जेक्टिव कनवर्टर पर डालें।

एफ. विश्लेषक को इमेजिंग ऑप्टिकल पथ में डालें, और ध्यान दें कि इसका अभिविन्यास दक्षिण-उत्तर होना चाहिए।

छ. अवलोकन किए जाने वाले पारदर्शी नमूने को बदलें, नमूने को स्पष्ट रूप से फोकस करने के लिए प्रकाश स्रोत चालू करें।

एच. डीआईसी सम्मिलन को समायोजित करें ताकि अंतर हस्तक्षेप विपरीत छवि सबसे अच्छा प्रभाव प्राप्त कर सके, यानी, सबसे स्पष्ट राहत प्रभाव।

i. साथ ही, कंडेनसर दर्पण के एपर्चर डायाफ्राम को समायोजित करें, ताकि कंट्रास्ट का प्रभाव भी इष्टतम हो।

j. फिर विभिन्न स्तरों पर नमूने की संरचना को देखने के लिए नमूने के विवरण को ठीक करें।

क. यदि पूरक रंग (प्रथम क्रम लाल मंदता प्लेट) डाला जाता है और उसी समय DIC इंसर्ट को समायोजित किया जाता है, तो दृश्य क्षेत्र में हमेशा बदलते चमकीले रंग देखे जा सकते हैं, जिसमें लाल, नारंगी, पीला, हरा, नीला, बैंगनी, गुलाबी, गुलाबी-बैंगनी और सुनहरा-पीला शामिल है। आवेदन का दायरा: पारदर्शी या बिना दाग वाले ऊतक खंड, लगभग 100? मीटर तक की मोटाई, संस्कृति में जीवित ऊतक और जीवित कोशिकाएँ, छोटे जीवित जीव और इसी तरह।