आपको कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप का उपयोग करने की आवश्यकता क्यों है?

आपको कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप का उपयोग करने की आवश्यकता क्यों है?

1. ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप हमारे महान पूर्ववर्तियों के प्रयासों और सुधारों के माध्यम से पूर्णता की स्थिति तक पहुँच चुके हैं। वास्तव में, साधारण माइक्रोस्कोप हमें आसानी से और जल्दी से सुंदर सूक्ष्म चित्र प्रदान कर सकते हैं। हालाँकि, एक ऐसी घटना घटी जिसने माइक्रोस्कोपी की इस लगभग परिपूर्ण दुनिया में क्रांतिकारी नवाचार लाया। यह "लेजर स्कैनिंग कॉन्फ़ोकल माइक्रोस्कोप" का आविष्कार था। इस नए प्रकार के माइक्रोस्कोप की विशेषता यह है कि यह एक ऑप्टिकल सिस्टम का उपयोग करता है जो केवल उस सतह पर छवि जानकारी निकालता है जहाँ फ़ोकस केंद्रित है, और फ़ोकस बदलते समय छवि मेमोरी में प्राप्त जानकारी को पुनर्स्थापित करता है, जिससे पूर्ण 3D जानकारी प्राप्त होती है। बुद्धिमत्ता की एक ज्वलंत छवि। इस पद्धति के माध्यम से, सतह के आकार के बारे में जानकारी जो सामान्य माइक्रोस्कोप से पुष्टि नहीं की जा सकती है, आसानी से प्राप्त की जा सकती है। इसके अलावा, साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के लिए, "बढ़ते रिज़ॉल्यूशन" और "फोकस की गहराई को गहरा करना" परस्पर विरोधी स्थितियाँ हैं, खासकर उच्च आवर्धन पर। हालाँकि, कॉन्फ़ोकल माइक्रोस्कोपी में, यह समस्या आसानी से हल हो जाती है।

2. कॉन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम के लाभ
कॉन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम नमूने पर बिंदु रोशनी करता है, और परावर्तित प्रकाश भी प्रकाश प्राप्त करने के लिए एक बिंदु रिसेप्टर का उपयोग करता है। जब नमूना फोकस स्थिति पर रखा जाता है, तो लगभग सभी परावर्तित प्रकाश फोटोरिसेप्टर तक पहुंच सकता है। जब नमूना फोकस से बाहर होता है, तो परावर्तित प्रकाश फोटोरिसेप्टर तक नहीं पहुंच सकता है। दूसरे शब्दों में, कॉन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम में, केवल वह छवि जो फोकस के साथ मेल खाती है, आउटपुट होगी, और प्रकाश स्पॉट और बेकार बिखरे हुए प्रकाश को परिरक्षित किया जाएगा।

3. लेजर का उपयोग क्यों करें?
कन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम में, नमूने को एक बिंदु पर प्रकाशित किया जाता है, और परावर्तित प्रकाश को भी एक बिंदु फोटोरिसेप्टर का उपयोग करके प्राप्त किया जाता है। इसलिए, बिंदु प्रकाश स्रोत आवश्यक हो जाते हैं। लेजर बहुत बिंदु प्रकाश स्रोत हैं। अधिकांश मामलों में, कन्फोकल माइक्रोस्कोप के प्रकाश स्रोत लेजर प्रकाश स्रोतों का उपयोग करते हैं। इसके अलावा, लेजर की विशेषताएं जैसे मोनोक्रोमैटिकिटी, डायरेक्टिविटी और उत्कृष्ट बीम आकार भी इसके व्यापक रूप से अपनाए जाने के महत्वपूर्ण कारण हैं।

4. उच्च गति स्कैनिंग पर आधारित वास्तविक समय अवलोकन संभव हो जाता है
लेजर स्कैनिंग के लिए, क्षैतिज दिशा में एक ध्वनिक ऑप्टिकल डिफ्लेक्टर (एओ तत्व) का उपयोग किया जाता है और ऊर्ध्वाधर दिशा में एक सर्वो विद्युत नियंत्रित बीम स्कैनिंग दर्पण (सर्वो गैल्वेनो-मिरर) का उपयोग किया जाता है। चूंकि ध्वनिक-ऑप्टिकल डिफ्लेक्शन यूनिट में यांत्रिक कंपन भाग नहीं होता है, इसलिए यह उच्च गति पर स्कैन कर सकता है, जिससे मॉनिटरिंग स्क्रीन पर वास्तविक समय का अवलोकन संभव हो जाता है। इस तरह की इमेजिंग की उच्च गति एक बहुत ही महत्वपूर्ण वस्तु है जो सीधे फोकस करने और स्थिति पुनर्प्राप्ति की गति को प्रभावित करती है।

5. फोकस स्थिति और चमक के बीच संबंध
कॉन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम में, जब नमूना सही ढंग से फोकस स्थिति पर रखा जाता है, तो चमक अधिकतम होती है, और इसके सामने और पीछे इसकी चमक तेजी से कम हो जाएगी (चित्र 4 में ठोस रेखा)। फोकल प्लेन की यह संवेदनशील चयनात्मकता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप की ऊंचाई दिशा निर्धारण और फोकस गहराई विस्तार के पीछे का सिद्धांत भी है। इसके विपरीत, एक सामान्य ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप में फोकस स्थिति से पहले और बाद में स्पष्ट चमक परिवर्तन नहीं होता है (चित्र 4 में बिंदीदार रेखा)।

6. उच्च कंट्रास्ट और उच्च रिज़ॉल्यूशन
साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप में, आउट-ऑफ-फोकस भाग से परावर्तित प्रकाश फोकस इमेजिंग भाग के साथ हस्तक्षेप करेगा और ओवरलैप करेगा, जिसके परिणामस्वरूप छवि कंट्रास्ट में कमी आएगी। इसके विपरीत, कॉन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम में, फोकस के बाहर भटकने वाला प्रकाश और ऑब्जेक्टिव लेंस के अंदर भटकने वाला प्रकाश लगभग पूरी तरह से हटा दिया जाता है, इसलिए बहुत उच्च कंट्रास्ट वाली छवि प्राप्त की जा सकती है। इसके अलावा, क्योंकि प्रकाश दो बार ऑब्जेक्टिव लेंस से गुजरता है, इसलिए बिंदु छवि तेज होती है, जो माइक्रोस्कोप की संकल्प शक्ति में भी सुधार करती है।