हमें कन्फोकल माइक्रोस्कोप की आवश्यकता क्यों है?
1. हमारे महान पूर्ववर्तियों के प्रयासों और सुधारों के बाद, ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप एक आदर्श स्तर पर पहुंच गया है। वास्तव में, साधारण सूक्ष्मदर्शी हमें आसानी से और शीघ्रता से सुंदर सूक्ष्म चित्र प्रदान कर सकते हैं। हालाँकि, इस लगभग पूर्ण माइक्रोस्कोप की दुनिया में क्रांतिकारी नवाचार लाने वाली घटना घटी, जो "लेजर स्कैनिंग कन्फोकल माइक्रोस्कोप" का आविष्कार था। इस नए प्रकार के माइक्रोस्कोप की विशेषता यह है कि यह एक ऑप्टिकल प्रणाली को अपनाता है जो केवल उस सतह से छवि जानकारी निकालता है जहां फोकस केंद्रित होता है। छवि मेमोरी में प्राप्त जानकारी को पुनर्स्थापित करते समय फोकस को बदलकर, यह पूर्ण त्रि-आयामी सूचना बुद्धिमत्ता के साथ एक ज्वलंत छवि प्राप्त कर सकता है। इस विधि के माध्यम से, सतह के आकार के बारे में जानकारी जो पारंपरिक सूक्ष्मदर्शी द्वारा पुष्टि नहीं की जा सकती है, आसानी से प्राप्त की जा सकती है। इसके अलावा, विशिष्ट ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के लिए, "रिज़ॉल्यूशन में सुधार" और "फोकल गहराई को गहरा करना" विरोधाभासी स्थितियां हैं, खासकर उच्च आवर्धन पर। हालाँकि, कन्फोकल माइक्रोस्कोप में यह समस्या आसानी से हल हो जाती है।
2. कन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम के लाभ
लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोप का योजनाबद्ध आरेख
कॉन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम का उपयोग बिंदुओं के साथ नमूने को रोशन करने के लिए किया जाता है, जबकि परावर्तित प्रकाश भी एक बिंदु सेंसर द्वारा प्राप्त किया जाता है। जब नमूना को फोकल बिंदु पर रखा जाता है, तो लगभग सभी परावर्तित प्रकाश प्रकाश संवेदनशील उपकरण तक पहुंच सकता है। जब नमूना फोकस बिंदु से विचलित हो जाता है, तो परावर्तित प्रकाश प्रकाश संवेदनशील उपकरण तक नहीं पहुंच पाता है। कहने का तात्पर्य यह है कि, एक कन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम में, केवल फोकल बिंदु के साथ मेल खाने वाली छवियां आउटपुट होंगी, और प्रकाश स्थान और बेकार बिखरी हुई रोशनी को संरक्षित किया जाएगा।
लेजर का उपयोग क्यों करें?
एक कन्फोकल ऑप्टिकल प्रणाली में, नमूना प्रकाशित होता है और परावर्तित प्रकाश भी एक बिंदु सेंसर द्वारा प्राप्त होता है। इसलिए, बिंदु प्रकाश स्रोत आवश्यक हो जाते हैं। लेज़र एक अत्यंत बिंदु प्रकाश स्रोत है। ज्यादातर मामलों में, कन्फोकल माइक्रोस्कोप का प्रकाश स्रोत एक लेजर प्रकाश स्रोत होता है। इसके अलावा, लेज़रों की मोनोक्रोमैटिकिटी, दिशात्मकता और उत्कृष्ट बीम आकार भी उनके व्यापक रूप से अपनाने के महत्वपूर्ण कारण हैं।
4. हाई-स्पीड स्कैनिंग पर आधारित वास्तविक समय अवलोकन संभव हो जाता है
लेजर स्कैनिंग क्षैतिज दिशा में ध्वनिक ऑप्टिकल डिफ्लेक्टर (एओ प्राइम) और ऊर्ध्वाधर दिशा में सर्वो गैल्वेनो दर्पण का उपयोग करती है। ऑडियो ऑप्टिकल बायस यूनिट में यांत्रिक कंपन की अनुपस्थिति के कारण, उच्च गति स्कैनिंग करना और मॉनिटरिंग स्क्रीन पर वास्तविक समय में निरीक्षण करना संभव है। इस प्रकार के कैमरे की उच्च गति प्रकृति एक बहुत ही महत्वपूर्ण वस्तु है जो सीधे फोकस करने और स्थिति पुनर्प्राप्ति की गति को प्रभावित करती है।
5. फोकल स्थिति और चमक के बीच संबंध
एक कन्फोकल ऑप्टिकल सिस्टम में, नमूने की चमक तब अधिक होती है जब इसे फोकल स्थिति में सही ढंग से रखा जाता है, और इसके पहले और बाद में इसकी चमक तेजी से कम हो जाती है (चित्रा 4 में ठोस रेखा)। इस फोकल विमान की संवेदनशील चयनात्मकता कन्फोकल माइक्रोस्कोपी में ऊंचाई दिशा के निर्धारण और फोकल गहराई के विस्तार के पीछे का सिद्धांत है। इसकी तुलना में, विशिष्ट ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप फोकल स्थिति से पहले और बाद में महत्वपूर्ण चमक परिवर्तन नहीं दिखाते हैं (चित्रा 4 में बिंदीदार रेखा)।
6. उच्च कंट्रास्ट और रिज़ॉल्यूशन
आमतौर पर, ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप में, परावर्तित प्रकाश जो फोकस बिंदु से विचलित होता है, घटित होगा
