प्रकाश माइक्रोस्कोपी के लिए कौन से नमूना विनिर्देशों की आवश्यकता है?
ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप की नमूना तैयार करने की प्रक्रिया में, नमूने की स्लाइस मोटाई 2-25um के बीच होती है; इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप की स्लाइस मोटाई 50-100nm के भीतर है (हाई-वोल्टेज इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप को छोड़कर, जिसकी नमूना मोटाई 1um तक पहुंच सकती है), इसलिए उपयोग की जाने वाली स्लाइस विधि सभी समान नहीं है।
वाहक के संदर्भ में, ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप अनुभाग का वाहक ग्लास स्लाइड है, जबकि इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप अनुभाग का वाहक ग्रिड है।
निर्धारण के संदर्भ में, ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के स्लाइस को एक यौगिक फिक्सेटिव के साथ तय किया जाता है, जबकि इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप के स्लाइस को एक ही फिक्सेटिव के साथ बार-बार तय किया जाता है।
धुंधलापन के संदर्भ में, ऑप्टिकल नमूनों का धुंधलापन अपेक्षाकृत सरल है। विभिन्न अवलोकन नमूनों और ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के प्रकारों के अनुसार, यह आमतौर पर कुछ निश्चित धुंधला एजेंटों के साथ दागने के लिए पर्याप्त है। इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप नमूनों को पुनः धुंधला करने के लिए कई और जटिल तरीके हैं, जैसे नकारात्मक धुंधलापन, चांदी का धुंधलापन और इसी तरह।
एम्बेडिंग के संदर्भ में, पैराफिन, कोलोडियन, जिलेटिन, आदि का उपयोग ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप अनुभागों के लिए एम्बेडिंग एजेंट के रूप में किया जाता है; एपॉक्सी राल, पॉलीस्टाइनिन राल, आइसोब्यूटिलीन राल और पानी में घुलनशील राल का उपयोग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप अनुभागों के लिए एम्बेडिंग एजेंट के रूप में किया जाता है।
यह सुनिश्चित करने के लिए कि माइक्रोस्कोप के दृश्य क्षेत्र को समान रूप से और पूरी तरह से रोशन किया जा सकता है, जब माइक्रोस्कोप पहली बार स्थापित और डीबग किया जाता है तो रोशनी ऑप्टिकल सिस्टम को समायोजित किया जाना चाहिए। यह माइक्रोस्कोप का सही ढंग से उपयोग करने और सही और विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने का एक महत्वपूर्ण साधन और सबसे बुनियादी तरीका है। आवश्यकताएं। इसके अलावा, माइक्रोस्कोप के उपयोग के दौरान प्रकाश स्रोत बल्ब को बदलने के बाद रोशनी ऑप्टिकल पथ प्रणाली के समायोजन में सही ढंग से महारत हासिल करना एक आवश्यक कदम है, और यह दैनिक उपयोग के दौरान समय-समय पर माइक्रोस्कोप के प्रदर्शन की जांच करने का एक आवश्यक साधन भी है। उपयोग। माइक्रोस्कोप रोशनी ऑप्टिकल पथ प्रणाली के समायोजन में मुख्य रूप से निम्नलिखित चार आइटम शामिल हैं: 1. माइक्रोस्कोप के बाहर प्रकाश स्रोत लैंप कक्ष का प्रारंभिक समायोजन ① पहले लैंप कक्ष का खोल खोलें, हैलोजन बल्ब को अंदर डालने के लिए स्प्रिंग क्लिप दबाएं सॉकेट, और स्थापना के दौरान अपनी उंगलियों के साथ बल्ब के सीधे संपर्क से बचें (मुलायम कपड़े या कागज से अलग किया जा सकता है) बल्ब पर उंगलियों के निशान और अन्य गंदगी से बचने के लिए, जो बल्ब के सेवा जीवन को प्रभावित करेगा। ②लैंप हाउस को मेज पर रखें, बिजली चालू करने के बाद, लैंप के फोकस नॉब छेद ("←→" से चिह्नित) को समायोजित करने के लिए एक विशेष स्क्रूड्राइवर का उपयोग करें, ताकि फिलामेंट दीवार पर प्रक्षेपित हो सके 1-2 मी दूर, और फिलामेंट छवि समायोजित की गई है। फिर लैंप की ऊंचाई समायोजित करें और फिलामेंट की स्थिति को उचित बनाने के लिए थ्रेड होल ("──" से चिह्नित) को समायोजित करें; फिर फिलामेंट की बाईं और दाईं स्थिति को उपयुक्त बनाने के लिए स्क्रू होल ("──" से चिह्नित) को समायोजित करने के लिए लैंप की बाईं और दाईं स्थिति को समायोजित करें।
2. माइक्रोस्कोप में प्रकाश स्रोत इलुमिनेंट (फिलामेंट) की स्थिति की जाँच करने और उसे सही करने का उद्देश्य इलुमिनेंट की छवि के अंत को ऑब्जेक्टिव लेंस के दृश्य क्षेत्र में वर्गाकार रूप से समायोजित करना है, और यह सुनिश्चित करना है कि देखने का क्षेत्र प्रकाश स्रोत के परिप्रेक्ष्य से माइक्रोस्कोप पूरी तरह और समान रूप से प्रकाशित होता है। प्रकाश व्यवस्था, जो कुहलर प्रकाश व्यवस्था को समायोजित करने के लिए एक शर्त है। आवश्यक बुनियादी उपकरण: जब माइक्रोस्कोप खरीदा जाता है तो सेंटरिंग टेलीस्कोप सुसज्जित होता है। ① लैंप हाउस में फ्रॉस्टेड ग्लास स्लीव को अनप्लग करें, और लैंप हाउस को वापस माइक्रोस्कोप पर रखें। ② एक 10× ऑब्जेक्टिव लेंस चुनें, नमूना ढूंढने और उसे स्पष्ट रूप से फोकस करने के लिए प्रकाश स्रोत प्रोग्राम चालू करें, और फिर नमूने को स्पष्ट रूप से फोकस करने के लिए 40× ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करें (40× ऑब्जेक्टिव लेंस आप फिलामेंट की पूरी तस्वीर देख सकते हैं ); ③ कंडेनसर के एपर्चर डायाफ्राम और फ़ील्ड डायाफ्राम को अधिकतम तक खोलें; ④ एक ऐपिस को अनप्लग करें, एक सेंटरिंग टेलीस्कोप से बदलें, सफेद भाग को पकड़ें, दूसरे हाथ से काली ऐपिस को खींचें, आप दृष्टि के क्षेत्र में फिलामेंट छवि देख सकते हैं; ⑤ यदि फिलामेंट की स्थिति उपयुक्त नहीं है, तो फिलामेंट छवि को क्षैतिज दिशा में समायोजित करने के लिए "──" छेद को समायोजित करें, और फिलामेंट छवि को समायोजित करने तक ऊर्ध्वाधर दिशा में फिलामेंट छवि को समायोजित करने के लिए "──" छेद को समायोजित करें। प्रकाश वृत्ताकार छवि के लिए जो केवल अभिदृश्यक लेंस के छिद्र को भरती है; ⑥ समायोजन के बाद, फ्रॉस्टेड ग्लास स्लीव को वापस मूल स्थिति में डालें, सेंटरिंग टेलीस्कोप को अनप्लग करें, और अगले समायोजन के लिए ऐपिस को बदलें। माइक्रोस्कोप के बाहर रोशनी प्रकाश स्रोत लैंप कक्ष का उपर्युक्त समायोजन और माइक्रोस्कोप के अंदर प्रकाश स्रोत चमकदार शरीर की स्थिति का सत्यापन केवल तभी किया जाना चाहिए जब माइक्रोस्कोप पहली बार स्थापित और डीबग किया गया हो और जब बल्ब बदला गया हो , और माइक्रोस्कोप का उपयोग करते समय माइक्रोस्कोप को यादृच्छिक रूप से समायोजित नहीं किया जा सकता है। भ्रम की स्थिति में, इसे उपरोक्त चरणों के अनुसार वापस मूल स्थिति में समायोजित किया जा सकता है।
3. कोहलर रोशनी प्रणाली का सही समायोजन माइक्रोस्कोप के सही समायोजन का एक मुख्य कार्य रोशनी ऑप्टिकल पथ प्रणाली का समायोजन है, और कुंजी कोहलर रोशनी प्रणाली का समायोजन है। प्रत्येक व्यक्ति जो माइक्रोस्कोप का उपयोग करता है, विशेष रूप से जो फोटोमाइक्रोग्राफ करते हैं, उनके पास माइक्रोस्कोप के कार्यों को पूरा करने और तस्वीरें लेने के लिए कुहलर रोशनी प्रणाली के सिद्धांत और इसके समायोजन चरणों की एक निश्चित समझ और महारत होनी चाहिए। जो तस्वीरें सामने आती हैं वे प्रभाव में अधिक सुसंगत और परिपूर्ण हो सकती हैं। कोहलर रोशनी प्रणाली का सिद्धांत सरल है: प्रकाश स्रोत प्रकाशक पर किसी भी बिंदु द्वारा उत्सर्जित प्रकाश माइक्रोस्कोप के दृश्य क्षेत्र को रोशन कर सकता है, और प्रकाश स्रोत प्रकाशक पर प्रत्येक बिंदु द्वारा उत्सर्जित प्रकाश एकत्र किया जाता है, और क्षेत्र में माइक्रोस्कोप के दृश्य से एक बहुत ही पूर्ण और समान रोशनी प्राप्त होती है। कुहलर प्रकाश प्रणाली को समायोजित करने का उद्देश्य दृश्य क्षेत्र के लिए एक समान और पर्याप्त रोशनी प्राप्त करना है, और आवारा प्रकाश को इमेजिंग सिस्टम को प्रभावित या हस्तक्षेप करने से रोकना है, ताकि फोटोग्राफी के दौरान फिल्म पर फॉगिंग से बचा जा सके। उच्च-समायोजन कोहलर रोशनी प्रणाली के लिए आवश्यक घटक: फ़ील्ड डायाफ्राम, कंडेनसर लेंस प्रणाली जिसे अक्ष पर समायोजित किया जा सकता है। ① 10× ऑब्जेक्टिव लेंस और 10× ऐपिस का चयन करें ② कंडेनसर के फ्रंट लेंस को ऑप्टिकल पथ में रखें, एपर्चर डायाफ्राम को मध्यम स्थिति में समायोजित करें (बहुत बड़ा या छोटा नहीं), फिर कंडेनसर को ऊपर उठाएं शीर्ष स्थिति, और कंडेनसर टर्नटेबल को ब्राइट फ़ील्ड "जे" स्थिति में समायोजित करें ③ फ़ील्ड डायाफ्राम को न्यूनतम (0.1) पर समायोजित करें
④ सीलबंद जैविक नमूने को मंच पर रखें, प्रकाश स्रोत चालू करें, और स्पष्ट रूप से ध्यान केंद्रित करें
⑤ दृश्य क्षेत्र में आंशिक रूप से प्रकाशित क्षेत्र या उज्ज्वल स्थान होगा, जो क्षेत्र डायाफ्राम की धुंधली छवि है, जिसमें नमूने का विवरण स्पष्ट रूप से देखा जा सकता है; इसके बाहर देखने का एक गहरा क्षेत्र है, जो जरूरी नहीं कि नमूने का विवरण स्पष्ट रूप से देख सके
⑥ कंडेनसर को थोड़ा नीचे की ओर समायोजित करें, ताकि दृश्य क्षेत्र में उज्ज्वल स्थान धीरे-धीरे सिकुड़ जाए, और धीरे-धीरे एक स्पष्ट बहुभुज छवि बन जाए, जो क्षेत्र डायाफ्राम की स्पष्ट छवि है;
⑦आम तौर पर, बहुभुज छवि दृश्य के क्षेत्र के केंद्र में नहीं होती है, और क्षेत्र डायाफ्राम की बहुभुज छवि को केंद्रीय स्थिति में समायोजित करने के लिए कंडेनसर के केंद्रित स्क्रू की एक जोड़ी को समायोजित करना आवश्यक है;
⑧बहुभुज छवि को दृश्य क्षेत्र का एक उत्कीर्ण बहुभुज बनाने के लिए दृश्य क्षेत्र के डायाफ्राम को धीरे-धीरे खोलें, और संरेखण स्थिति की जांच करें। यदि संरेखण आदर्श नहीं है, तो संरेखण पेंच को ठीक करना जारी रखें;
⑨दृश्य क्षेत्र के डायाफ्राम को थोड़ा सा खोलें, ताकि इसकी बहुभुज छवि दृश्य क्षेत्र के किनारे पर गायब हो जाए। अब तक, कोहलर रोशनी प्रणाली का समायोजन पूरा हो चुका है। कोहलर प्रकाश प्रणाली को समायोजित करने के बाद, दृश्य का पूरा क्षेत्र समान रूप से प्रकाशित होता है, और लिए गए माइक्रोग्राफ सामान्य कंट्रास्ट के साथ उज्ज्वल और स्पष्ट होते हैं।
