प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी और पारंपरिक सूक्ष्मदर्शी के बीच क्या अंतर है?
मैंने हाल ही में चूहों के कुछ जमे हुए हिस्से बनाने की कोशिश की। इसके बाद, मैं एक फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप का उपयोग करके देखूंगा कि मैंने जो वायरस इंजेक्ट किया है, वह मेरे इच्छित मस्तिष्क क्षेत्र में है या नहीं। फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोपी के कुछ बुनियादी सिद्धांतों को संक्षेप में सीखने की आवश्यकता है, और मैं उन्हें यहाँ साझा करूँगा।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी पराबैंगनी प्रकाश का उपयोग प्रकाश स्रोत के रूप में निरीक्षण की जा रही वस्तु को रोशन करने के लिए करते हैं, जिससे वस्तु प्रकाश उत्सर्जित करती है, और फिर माइक्रोस्कोप के नीचे वस्तु का निरीक्षण करती है। इसका उपयोग मुख्य रूप से इम्यूनोफ्लोरेसेंस कोशिकाओं के लिए किया जाता है। यह मुख्य रूप से एक प्रकाश स्रोत, एक फिल्टर प्लेट प्रणाली और एक ऑप्टिकल प्रणाली से बना होता है। नमूने की प्रतिदीप्ति छवि ऐपिस और ऑब्जेक्टिव लेंस के आवर्धन के माध्यम से देखी जाती है। आइए एक प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी और एक साधारण ऑप्टिकल सूक्ष्मदर्शी के बीच अंतर पर एक नज़र डालें।
1. प्रकाश व्यवस्था का तरीका देखें
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की प्रकाश विधि आम तौर पर एपी-रोशनी है, जिसका अर्थ है कि प्रकाश स्रोत को ऑब्जेक्टिव लेंस के माध्यम से परीक्षण नमूने पर रखा जाता है।
2. संकल्प को देखो
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी प्रकाश स्रोत के रूप में पराबैंगनी प्रकाश का उपयोग करते हैं, जिसकी तरंगदैर्घ्य छोटी होती है, लेकिन साधारण प्रकाशीय सूक्ष्मदर्शी की तुलना में इसका रिजोल्यूशन अधिक होता है।
3. फिल्टर में अंतर
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी दो विशेष फिल्टर का उपयोग करते हैं। इनका उपयोग प्रकाश स्रोत के सामने दृश्य प्रकाश को फ़िल्टर करने के लिए किया जाता है, और ऑब्जेक्टिव लेंस और ऐपिस के बीच पराबैंगनी किरणों को फ़िल्टर करने के लिए किया जाता है, जो मानव आँखों की रक्षा कर सकते हैं।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी भी एक प्रकार का ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप है। इसका मुख्य कारण यह है कि प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी द्वारा उत्तेजित तरंगदैर्घ्य छोटा होता है, इसलिए यह प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी और साधारण सूक्ष्मदर्शी के बीच संरचना और उपयोग में अंतर की ओर जाता है। अधिकांश प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी में कमजोर प्रकाश को पकड़ने का अच्छा कार्य होता है। इसलिए इसकी इमेजिंग क्षमता अत्यंत कमजोर प्रतिदीप्ति के तहत भी अच्छी होती है। हाल के वर्षों में प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के निरंतर सुधार के साथ, शोर भी बहुत कम हो गया है। इसलिए, अधिक से अधिक प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का उपयोग किया जा रहा है।
