डार्कफील्ड माइक्रोस्कोपी क्या है? एक कोशिका कितनी छोटी दिखाई देती है?
डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप एक प्रकार का ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप है, जिसे अल्ट्रामाइक्रोस्कोप भी कहा जाता है। डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप के कंडेनसर के केंद्र में एक प्रकाश ढाल होती है ताकि रोशनी की रोशनी सीधे मानव लेंस में प्रवेश न करे। केवल नमूने द्वारा परावर्तित और विवर्तित प्रकाश को ही ऑब्जेक्टिव लेंस में प्रवेश करने दिया जाता है। इसलिए, दृश्य क्षेत्र की पृष्ठभूमि काली होती है और वस्तुओं के किनारे चमकीले होते हैं। इस तरह के माइक्रोस्कोप 4 ~ 200nm जितने छोटे कणों को देख सकते हैं, और इसका रिज़ॉल्यूशन साधारण माइक्रोस्कोप की तुलना में 50 गुना अधिक हो सकता है।
सिद्धांत
डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप को टिंडल ऑप्टिकल प्रभाव के सिद्धांत का उपयोग करके साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप की संरचना के आधार पर संशोधित किया गया है। डार्कफील्ड कंडेनसर प्रकाश स्रोत की केंद्रीय किरण को अवरुद्ध करने की अनुमति देते हैं। नीचे से ऊपर तक नमूने के माध्यम से ऑब्जेक्टिव लेंस में प्रवेश करना संभव नहीं है। नतीजतन, प्रकाश अपना रास्ता बदल देता है और देखे गए नमूने पर तिरछा विकिरण करता है। प्रकाश का सामना करने पर नमूना परावर्तित या बिखर जाता है। बिखरा हुआ प्रकाश ऑब्जेक्टिव लेंस में फेंका जाता है, इसलिए देखने का पूरा क्षेत्र अंधेरा हो जाता है।
डार्क फील्ड माइक्रोस्कोपी का मूल सिद्धांत टिंडल प्रभाव है। जब प्रकाश की किरण अंधेरे कमरे से गुजरती है, तो घटना प्रकाश के लंबवत दिशा से हवा में एक चमकदार धूल "मार्ग" देखा जा सकता है। यह घटना टिंडल प्रभाव है। एक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप पर एक डार्क-फील्ड कंडेनसर के साथ एक डार्क-फील्ड माइक्रोस्कोप को बदलने के बाद, कंडेनसर की आंतरिक परवलयिक संरचना के अवरोध के कारण, निरीक्षण की जाने वाली वस्तु की सतह पर विकिरणित प्रकाश सीधे ऑब्जेक्टिव लेंस और ऐपिस में प्रवेश नहीं कर सकता है, और केवल बिखरा हुआ प्रकाश ही गुजर सकता है, इस प्रकार दृश्य क्षेत्र को कम कर सकता है। अंधेरा है। चूंकि डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप प्रत्यक्ष अवलोकन प्रणाली में पारदर्शी प्रकाश का उत्सर्जन नहीं करता है, जब कोई वस्तु नहीं होती है, तो दृश्य क्षेत्र अंधेरा होता है और किसी भी वस्तु का निरीक्षण करना असंभव होता है; जब कोई वस्तु होती है, तो वस्तु द्वारा वापस विवर्तित प्रकाश और बिखरा हुआ प्रकाश अंधेरे पृष्ठभूमि में उज्ज्वल रूप से दिखाई देता है। अंधेरे क्षेत्र में किसी वस्तु का अवलोकन करते समय, अधिकांश रोशनी प्रकाश अपवर्तित हो जाता है। वस्तु (नमूना) के स्थान, संरचना और मोटाई के कारण प्रकाश का प्रकीर्णन और अपवर्तन बहुत भिन्न होता है।
संरचना और संशोधन
डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप की मूल संरचना एक साधारण माइक्रोस्कोप ऑप्टिकल सेट प्लस एक प्रकाश अवरोधक है। एक साधारण माइक्रोस्कोप को डार्क-फील्ड माइक्रोस्कोप में परिवर्तित किया जा सकता है जब तक कि कंडेनसर हटाने योग्य हो और ब्रैकेट का व्यास डार्क-फील्ड कंडेनसर स्थापित करने के लिए उपयुक्त हो। जब कोई डार्क फील्ड कंडेनसर नहीं होता है, तो आप एक केंद्रीय प्रकाश ढाल बनाने के लिए मोटे काले कागज का उपयोग कर सकते हैं और इसे डार्क फील्ड प्रभाव प्राप्त करने के लिए एक साधारण माइक्रोस्कोप के कंडेनसर के नीचे फिल्टर फ्रेम पर रख सकते हैं। प्रकाश ढाल का उपयोग प्रकाश स्रोत के बीच में प्रकाश को अवरुद्ध करने के लिए किया जाता है ताकि प्रकाश केवल आसपास से नमूने में प्रवेश कर सके। आकार एपर्चर के आकार के समान ही होता है। विभिन्न आवर्धन विभिन्न एपर्चर का उपयोग करते हैं, इसलिए विभिन्न प्रकाश ब्लॉक बनाने की आवश्यकता होती है।
व्यावहारिक अनुप्रयोग
डार्कफील्ड माइक्रोस्कोपी का उपयोग अक्सर बिना दाग वाले पारदर्शी नमूनों को देखने के लिए किया जाता है। क्योंकि इन नमूनों का अपवर्तनांक आस-पास के वातावरण के समान होता है, इसलिए उन्हें सामान्य उज्ज्वल क्षेत्र की स्थितियों में स्पष्ट रूप से देखना मुश्किल होता है। इसलिए, नमूने और पृष्ठभूमि के बीच के अंतर को बेहतर बनाने के लिए डार्क फील्ड स्थितियों का उपयोग किया जाता है। इस तरह का माइक्रोस्कोप 4 ~ 200nm तक के छोटे कणों को देख सकता है। यह केवल वस्तु के अस्तित्व, गति और सतह की विशेषताओं को देख सकता है, लेकिन वस्तु की बारीक संरचना को अलग नहीं कर सकता है। चिकित्सकीय रूप से, डार्कफील्ड माइक्रोस्कोपी का उपयोग आमतौर पर पेलिड स्पाइरोकेट्स की जांच करने के लिए किया जाता है। यह एक रोगज़नक़ परीक्षण है, जो प्रारंभिक सिफलिस के निदान के लिए बहुत महत्वपूर्ण है।
