सूक्ष्मदर्शी के लिए कौन सी रोशनी विधियाँ उपलब्ध हैं?
1. ट्रांस-रोशनी
जैविक सूक्ष्मदर्शी का उपयोग ज्यादातर पारदर्शी नमूनों का निरीक्षण करने के लिए किया जाता है और इन्हें संचरित प्रकाश से प्रकाशित करने की आवश्यकता होती है। प्रकाश व्यवस्था की दो विधियाँ हैं
(1) महत्वपूर्ण रोशनी प्रकाश स्रोत कंडेनसर से गुजरने के बाद, इसे ऑब्जेक्ट प्लेन पर चित्रित किया जाता है, जैसा कि चित्र 5 में दिखाया गया है। यदि प्रकाश ऊर्जा के नुकसान को नजरअंदाज किया जाता है, तो प्रकाश स्रोत छवि की चमक प्रकाश के समान होती है स्रोत ही, इसलिए यह विधि प्रकाश स्रोत को वस्तु तल पर रखने के बराबर है। जाहिर है, गंभीर रोशनी में, यदि प्रकाश स्रोत की सतह की चमक एक समान नहीं है, या स्पष्ट रूप से छोटी संरचनाएं, जैसे फिलामेंट्स इत्यादि दिखाती है, तो माइक्रोस्कोप का अवलोकन प्रभाव गंभीर रूप से प्रभावित होगा, जो कि नुकसान है आलोचनात्मक रोशनी. इसका उपाय प्रकाश स्रोत के सामने दूधिया सफेद और गर्मी-अवशोषित रंग फिल्टर लगाना है ताकि रोशनी अधिक समान हो और प्रकाश स्रोत के दीर्घकालिक विकिरण के कारण निरीक्षण की जाने वाली वस्तु को होने वाले नुकसान से बचाया जा सके। संचरित प्रकाश से प्रकाशित होने पर, ऑब्जेक्टिव लेंस के इमेजिंग बीम का एपर्चर कोण कंडेनसर दर्पण के वर्गाकार बीम के एपर्चर कोण द्वारा निर्धारित किया जाता है। ऑब्जेक्टिव लेंस के संख्यात्मक एपर्चर का पूर्ण उपयोग करने के लिए, कंडेनसर लेंस में ऑब्जेक्टिव लेंस के समान या थोड़ा बड़ा संख्यात्मक एपर्चर होना चाहिए।
(2) कोला प्रकाश महत्वपूर्ण प्रकाश व्यवस्था में वस्तु की सतह पर असमान रोशनी के नुकसान को कोला प्रकाश में समाप्त किया जा सकता है। प्रकाश स्रोत 1 और कंडेनसर लेंस 5 के बीच एक सहायक कंडेनसर लेंस 2 जोड़ा जाता है, जैसा कि चित्र में दिखाया गया है। 6 . यह देखा जा सकता है कि ऑब्जेक्टिव लेंस का दृश्य क्षेत्र (नमूना) समान रूप से प्रकाशित होता है क्योंकि प्रकाश स्रोत सीधे प्रकाशित नहीं होता है, लेकिन प्रकाश स्रोत द्वारा समान रूप से प्रकाशित सहायक कंडेनसर 2 (जिसे कोलार दर्पण भी कहा जाता है) की छवि लेंस पर दिखाई देती है। नमूना 6.
2. एपी-रोशनी
अपारदर्शी वस्तुओं का अवलोकन करते समय, जैसे मेटलोग्राफिक माइक्रोस्कोप के माध्यम से धातु पीसने वाली डिस्क को देखना, इसे अक्सर किनारे से या ऊपर से प्रकाशित किया जाता है। इस समय, देखी जाने वाली वस्तु की सतह पर कोई कवर ग्लास नहीं होता है, और नमूने की छवि ऑब्जेक्टिव लेंस में प्रवेश करने वाले परावर्तित या बिखरे हुए प्रकाश द्वारा उत्पन्न होती है। जैसा कि चित्र 7 में दिखाया गया है।
3. डार्क फील्ड का उपयोग करके कणों के अवलोकन के लिए रोशनी विधि
अल्ट्रामाइक्रोस्कोपिक कणों को डार्क फील्ड विधि से देखा जा सकता है। तथाकथित अल्ट्रामाइक्रोस्कोपिक कण उन छोटे कणों को संदर्भित करते हैं जो माइक्रोस्कोप की रिज़ॉल्यूशन सीमा से छोटे होते हैं। अंधेरे क्षेत्र रोशनी का सिद्धांत है: मुख्य रोशनी प्रकाश को उद्देश्य लेंस में प्रवेश न करने दें, और केवल कणों द्वारा बिखरा हुआ प्रकाश इमेजिंग के लिए उद्देश्य लेंस में प्रवेश कर सकता है।
अत: गहरे रंग की पृष्ठभूमि पर चमकीले कणों का प्रतिबिम्ब दिया जाता है। हालाँकि देखने के क्षेत्र का बैकग्राउंड गहरा है, कंट्रास्ट (कंट्रास्ट) बहुत अच्छा है, जो रिज़ॉल्यूशन में सुधार कर सकता है।
डार्क फील्ड रोशनी को एक-तरफ़ा और दो-तरफ़ा में विभाजित किया जा सकता है
(1) एक तरफ़ा डार्क फ़ील्ड रोशनी चित्र 8 एक तरफ़ा डार्क फ़ील्ड रोशनी का एक योजनाबद्ध आरेख है। यह चित्र से देखा जा सकता है कि प्रकाशक 2 द्वारा उत्सर्जित प्रकाश अपारदर्शी नमूना शीट 1 द्वारा प्रतिबिंबित होने के बाद, मुख्य प्रकाश उद्देश्य लेंस 3 में प्रवेश नहीं करता है, और उद्देश्य लेंस में प्रवेश करने वाला प्रकाश मुख्य रूप से कणों या असमान द्वारा बिखरा हुआ है विवरण। जाहिर है, यह एकतरफा अंधेरे क्षेत्र की रोशनी कणों के अस्तित्व और गति को देखने के लिए प्रभावी है, लेकिन यह वस्तुओं के विवरण को पुन: प्रस्तुत करने के लिए प्रभावी नहीं है, यानी "विरूपण" की घटना है।
(2) दो-तरफ़ा डार्क फ़ील्ड रोशनी दो-तरफ़ा डार्क फ़ील्ड रोशनी एक-तरफ़ा के कारण होने वाले विरूपण दोष को समाप्त कर सकती है। सामान्य तीन-लेंस कंडेनसर के सामने, दो-तरफा अंधेरे क्षेत्र की रोशनी का एहसास करने के लिए, जैसा कि चित्र 9 में दिखाया गया है, एक कुंडलाकार डायाफ्राम रखें। तरल कंडेनसर के अंतिम टुकड़े और ऑब्जेक्टिव ग्लास के बीच डूबा हुआ है, जबकि कवर ग्लास और ऑब्जेक्टिव लेंस के बीच का स्थान सूखा है। इसलिए, कंडेनसर से गुजरने वाली अंगूठी के आकार की किरण पूरी तरह से कवर ग्लास में परिलक्षित होती है और ऑब्जेक्टिव लेंस में प्रवेश नहीं कर पाती है, जिससे एक लूप बनता है जैसा कि चित्र में दिखाया गया है। केवल नमूने पर कणों द्वारा बिखरा हुआ प्रकाश ही वस्तुनिष्ठ लेंस में प्रवेश करता है, जिससे दो-तरफ़ा डार्कफ़ील्ड रोशनी बनती है।