प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी क्या करता है?
अनुसंधान अनुप्रयोगों के लिए प्रयुक्त प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी ऑप्टिकल फिल्टरों के एक सेट के आधार पर काम करते हैं:
एक उत्तेजना फ़िल्टर
एक किरण विभाजक
उत्सर्जन फ़िल्टर
इन फिल्टरों को आमतौर पर एक फिल्टर ब्लॉक (यौगिक सूक्ष्मदर्शी) या एक सपाट पात्र (मुख्यतः स्टीरियो सूक्ष्मदर्शी) में एक साथ डाला जाता है।
उत्तेजना फ़िल्टर नमूने के भीतर एक विशेष डाई को उत्तेजित करने के लिए तरंग दैर्ध्य का चयन करेगा, और उत्सर्जन फ़िल्टर एक गुणवत्ता नियंत्रण के रूप में कार्य करता है, जो केवल एक विशेष फ्लोरोफोर द्वारा उत्सर्जित तरंग दैर्ध्य को गुजरने देता है। शास्त्रीय प्रतिदीप्ति घटना प्रकाश का उत्पादन करने के लिए उत्तेजना बैंड में प्रकाश को प्रतिबिंबित करने और उत्सर्जन बैंड में प्रकाश को पारित करने के लिए डाइक्रोइक फ़िल्टर का उपयोग किया जाता है।
प्रतिदीप्ति जैविक और विश्लेषणात्मक माइक्रोस्कोपी में सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली भौतिक घटनाओं में से एक है, मुख्य रूप से इसकी उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता के कारण। प्रतिदीप्ति ठंडी चमक का एक रूप है।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी से उपयोगकर्ता को कोशिका के भीतर व्यक्तिगत आणविक प्रजातियों के वितरण और संख्या तथा उनके स्थान का निर्धारण करने की भी अनुमति मिलती है। सह-क्षेत्रीकरण और अंतःक्रियाओं, आयन सांद्रता के अध्ययन के साथ-साथ कोशिकाओं के बीच साइटोसिस और साइटोटॉक्सिसिटी प्रक्रियाओं का अवलोकन भी किया जा सकता है।
सुपर-रिजॉल्यूशन फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोपी की सहायता से, यहां तक कि सब-रिजॉल्यूशन संरचनाओं का भी चित्र लिया जा सकता है।
