सूक्ष्मजीवविज्ञानी तेल दर्पणों के कुल आवर्धन और विभेदन के बीच संबंध
सूक्ष्म जीव विज्ञान अनुसंधान में उपयोग किए जाने वाले सूक्ष्मदर्शी के वस्तुनिष्ठ लेंस आमतौर पर तेल कम आवर्धन वाले वस्तुनिष्ठ लेंस (1{{21%) x), उच्च आवर्धन वाले वस्तुनिष्ठ लेंस (4{{26%) x), और तेल लेंस (1{{31%) होते हैं। 0 x). इसमें "ओआई" (तेल विसर्जन) शब्द भी है जो दर्शाता है कि यह तीनों में सबसे अधिक आवर्धन वाला है। भिन्न-भिन्न आवर्धन वाली ऐपिस के उपयोग के अनुसार, निरीक्षण की गई वस्तु को 1000-1600 गुना तक बढ़ाया जा सकता है। उपयोग में होने पर, तेल लेंस और अन्य वस्तुनिष्ठ लेंस के बीच अंतर यह है कि स्लाइड और वस्तुनिष्ठ लेंस के बीच हवा की एक परत नहीं होती है, बल्कि तेल की एक परत होती है, जिसे तेल विसर्जन प्रणाली कहा जाता है। इस प्रकार के तेल में अक्सर देवदार के तेल का उपयोग किया जाता है क्योंकि इसका अपवर्तनांक n=1.52 है, जो कांच के समान है। जब प्रकाश कांच की स्लाइड से होकर गुजरता है, तो यह बिना अपवर्तन के देवदार के तेल के माध्यम से सीधे वस्तुनिष्ठ लेंस में प्रवेश कर सकता है। यदि ग्लास स्लाइड और ऑब्जेक्टिव लेंस के बीच का माध्यम हवा है, तो इसे शुष्क प्रणाली कहा जाता है। जब प्रकाश कांच की स्लाइड से होकर गुजरता है, तो अपवर्तन के कारण बिखर जाता है, और वस्तुनिष्ठ लेंस में प्रवेश करने वाले प्रकाश की मात्रा स्पष्ट रूप से कम हो जाती है, जिससे देखने के क्षेत्र की रोशनी कम हो जाती है। तेल दर्पणों के उपयोग से न केवल रोशनी बढ़ सकती है, बल्कि मुख्य रूप से संख्यात्मक एपर्चर भी बढ़ सकता है, क्योंकि माइक्रोस्कोप की आवर्धन दक्षता उसके संख्यात्मक एपर्चर से निर्धारित होती है। तथाकथित संख्यात्मक एपर्चर अधिकतम कोण के आधे साइन के उत्पाद को संदर्भित करता है जिस पर प्रकाश को ऑब्जेक्टिव लेंस (एपर्चर कोण के रूप में जाना जाता है) पर ग्लास स्लाइड और ऑब्जेक्टिव लेंस के बीच माध्यम के अपवर्तक सूचकांक से गुणा किया जाता है। . इसे निम्नलिखित सूत्र द्वारा व्यक्त किया जा सकता है: NA=nx पाप, जहां NA=संख्यात्मक छिद्र; N=माध्यम का अपवर्तनांक; अधिकतम आपतित कोण का आधा, अर्थात एपर्चर कोण का आधा। इसलिए, जिस कोण पर प्रकाश को ऑब्जेक्टिव लेंस पर प्रक्षेपित किया जाता है, माइक्रोस्कोप की दक्षता उतनी ही अधिक होती है, और इस कोण का परिमाण ऑब्जेक्टिव लेंस के व्यास और फोकल लंबाई से निर्धारित होता है। इस बीच, a की सैद्धांतिक सीमा 90.. syn90.＝1 है, इसलिए, माध्यम के रूप में हवा का उपयोग करते समय (n=1), संख्यात्मक एपर्चर 1 से अधिक नहीं हो सकता है। उदाहरण के लिए, टार को माध्यम के रूप में उपयोग करने पर, n बढ़ता है, और इसका संख्यात्मक एपर्चर भी बढ़ता है। यदि प्रकाश का आपतित कोण 12{47}}o है और उसकी ज्या का आधा भाग पाप6{60}}o=0.87 है, तो: माध्यम के रूप में हवा का उपयोग करते समय: NA =1 x 0.87=0.87, जब माध्यम के रूप में पानी का उपयोग किया जाता है: NA=1.33 x 0.87=1.15, जब माध्यम के रूप में टार का उपयोग किया जाता है: NA =1.52 x 0.87=1.32. माइक्रोस्कोप का रिज़ॉल्यूशन दो बिंदुओं के बीच न्यूनतम दूरी को अलग करने की क्षमता को संदर्भित करता है। यह वस्तुनिष्ठ लेंस के संख्यात्मक एपर्चर के समानुपाती और तरंग दैर्ध्य लंबाई के व्युत्क्रमानुपाती होता है। इसलिए, ऑब्जेक्टिव लेंस का संख्यात्मक एपर्चर जितना बड़ा होगा, प्रकाश तरंग की तरंग दैर्ध्य उतनी ही कम होगी, और माइक्रोस्कोप का रिज़ॉल्यूशन उतना अधिक होगा। परीक्षण की जा रही वस्तु की बारीक संरचनाओं को भी स्पष्ट रूप से पहचाना जा सकता है। इसलिए, एक उच्च रिज़ॉल्यूशन का मतलब एक छोटी अलग दूरी है, और ये दोनों कारक व्युत्क्रमानुपाती हैं। कुछ लोग अक्सर रिज़ॉल्यूशन को माइक्रोमीटर या नैनोमीटर की संख्या के रूप में संदर्भित करते हैं, जो वास्तव में न्यूनतम रिज़ॉल्यूशन दूरी के साथ रिज़ॉल्यूशन को भ्रमित करता है। माइक्रोस्कोप का रिज़ॉल्यूशन न्यूनतम दूरी द्वारा दर्शाया जाता है जिसे हल किया जा सकता है। दो बिंदुओं के बीच की न्यूनतम दूरी जिसे पहचाना जा सकता है वह λ/2NA है। सूत्र में, प्रकाश तरंग की तरंग दैर्ध्य λ= है, और नग्न आंखों द्वारा देखी जा सकने वाली प्रकाश तरंग की औसत लंबाई 0.55 μ मीटर है। यदि 0.65 के संख्यात्मक एपर्चर के साथ एक उच्च-शक्ति उद्देश्य का उपयोग किया जाता है, तो यह दो बिंदुओं के बीच की दूरी को 0.42 μ मीटर के रूप में अलग कर सकता है। हालाँकि, 0.42 μ मीटर से नीचे के दो बिंदुओं के बीच की दूरी को अलग नहीं किया जा सकता है, यहाँ तक कि बड़े आवर्धन ऐपिस के साथ भी, माइक्रोस्कोप के कुल आवर्धन को अभी भी अलग नहीं किया जा सकता है। केवल बड़े संख्यात्मक एपर्चर वाले बड़े ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करके ही उनके रिज़ॉल्यूशन को बढ़ाया जा सकता है। उदाहरण के लिए, 1.25 के संख्यात्मक एपर्चर के साथ एक तेल दर्पण का उपयोग करते समय, दो बिंदुओं के बीच की न्यूनतम दूरी जिसे पहचाना जा सकता है वह 0.55/(2 x 1.25)=0.22 μ मीटर है। इसलिए, हम देख सकते हैं कि यदि 40 गुना (NA=0.65) के आवर्धन के साथ एक उच्च-शक्ति उद्देश्य और 24 गुना के आवर्धन के साथ एक ऐपिस का उपयोग किया जाता है, हालांकि कुल आवर्धन 960 गुना है, न्यूनतम रिज़ॉल्यूशन दूरी केवल 0.42 μ मीटर है। यदि 90 गुना आवर्धन वाला एक तेल दर्पण (NA{{63%).25) और 9 गुना आवर्धन वाली एक ऐपिस का उपयोग किया जाता है, हालांकि कुल आवर्धन 810 गुना है, तो 0.22 μ मीटर की दूरी को पहचाना जा सकता है।
