अल्ट्रा-डेप्थ-ऑफ-फील्ड माइक्रोस्कोपी के बारे में ज्ञान के मुख्य बिंदुओं को एक बार में सीखा जा सकता है
चूंकि त्रि-आयामी सुपर डेप्थ-ऑफ-फील्ड माइक्रोस्कोप की कार्य दूरी बहुत छोटी है, इसलिए ऑपरेशन के दौरान ऑब्जेक्टिव लेंस और सैंपल ग्लास पर लेंस को नुकसान से बचाने के लिए ऑयल लेंस का उपयोग करते समय सभी को सावधान रहना चाहिए।
उपयोग की प्रक्रिया आम तौर पर कम-शक्ति वाले लेंस से शुरू होकर उच्च-शक्ति वाले लेंस और फिर तेल वाले लेंस तक की प्रक्रिया का अनुसरण करती है। यदि आप उच्च-शक्ति वाले लेंस का उपयोग कर रहे हैं, तो उसे कम-शक्ति वाले लेंस में बदलने और फिर से शुरू करने की कोई आवश्यकता नहीं है। आप इसे सीधे तेल वाले लेंस में बदल सकते हैं।
यदि आप जिस माइक्रोस्कोप का उपयोग कर रहे हैं, उसमें एंटी-ड्रॉप फ़ंक्शन है, तो इसका उपयोग करते समय, निरीक्षण के तहत स्लाइड पर देवदार के तेल की एक बूंद डालें, तेल माइक्रोस्कोप को तेल की बूंद में नीचे ले जाएं जब तक कि यह गिरना बंद न हो जाए, और फिर एक स्पष्ट वस्तु छवि प्राप्त होने तक सूक्ष्म समायोजन करने के लिए फाइन-ट्यूनिंग का उपयोग करें; और यदि उपयोग किए गए माइक्रोस्कोप में स्वचालित स्टॉप फ़ंक्शन नहीं है, तो स्लाइड पर देवदार के तेल की बूंदें डालने के बाद, जब ऑब्जेक्टिव लेंस को नीचे ले जाया जाता है, तो आपको इसे किनारे से देखना चाहिए और ऑब्जेक्टिव लेंस को नीचे करना चाहिए। इसे तब तक हिलाएं जब तक कि यह स्लाइड के संपर्क में थोड़ा न हो जाए, और फिर इसे तब तक ऊपर की ओर फाइन-ट्यून करें जब तक कि फोकस सही न हो जाए।
त्रि-आयामी अल्ट्रा-डेप्थ-ऑफ-फील्ड माइक्रोस्कोप का कार्य सिद्धांत:
1. अपवर्तन और अपवर्तनांक:
प्रकाश एकसमान समदैशिक माध्यम में दो बिंदुओं के बीच एक सीधी रेखा में प्रसारित होता है। विभिन्न घनत्व वाले मीडिया के पारदर्शी वस्तुओं से गुजरते समय, अपवर्तन होता है। यह विभिन्न मीडिया में प्रकाश की अलग-अलग प्रसार गति के कारण होता है। जब प्रकाश किरणें जो पारदर्शी वस्तु की सतह पर लंबवत नहीं होती हैं, हवा से पारदर्शी वस्तु (जैसे कांच) पर आती हैं, तो प्रकाश किरण अपने इंटरफ़ेस पर दिशा बदलती है और सामान्य के साथ अपवर्तन कोण बनाती है।
2. लेंस प्रदर्शन:
लेंस एक बुनियादी ऑप्टिकल तत्व है जो तीन-आयामी सुपर डेप्थ-ऑफ-फील्ड माइक्रोस्कोप की ऑप्टिकल प्रणाली बनाता है। ऑब्जेक्टिव लेंस, ऐपिस, कंडेनसर और अन्य घटक एकल या एकाधिक लेंस से बने होते हैं। उनके अलग-अलग आकार के अनुसार, उन्हें दो श्रेणियों में विभाजित किया जा सकता है: उत्तल लेंस (पॉजिटिव लेंस) और अवतल लेंस (नेगेटिव लेंस)।
जब प्रकाश किरणों की किरण ऑप्टिकल अक्ष के समानांतर उत्तल लेंस से होकर गुजरती है और एक बिंदु पर प्रतिच्छेद करती है, तो इस बिंदु को "फोकस" कहा जाता है, और वह तल जो प्रतिच्छेद बिंदु से होकर गुजरता है और ऑप्टिकल अक्ष के लंबवत होता है, उसे "फोकल प्लेन" कहा जाता है। दो फोकल बिंदु होते हैं। ऑब्जेक्ट-स्पेस स्पेस में फोकस को "ऑब्जेक्ट-स्पेस फोकस" कहा जाता है, और वहां के फोकल प्लेन को "ऑब्जेक्ट-स्पेस फोकल प्लेन" कहा जाता है। इसके विपरीत, इमेज-स्पेस स्पेस में फोकस को "इमेज-स्पेस फोकस" कहा जाता है। फोकल प्लेन को "इमेज स्क्वायर फोकल प्लेन" कहा जाता है।
अवतल लेंस से प्रकाश गुजरने के बाद, यह एक सीधा आभासी प्रतिबिंब बनाता है, जबकि उत्तल लेंस एक सीधा वास्तविक प्रतिबिंब बनाता है। वास्तविक छवियाँ स्क्रीन पर दिखाई दे सकती हैं, लेकिन आभासी छवियाँ नहीं।
