प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की संरचना और मुख्य घटक

प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की संरचना और मुख्य घटक

प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी इम्यूनोफ्लोरेसेंट साइटोकैमिस्ट्री में एक आवश्यक उपकरण है। यह प्रकाश स्रोत, फिल्टर प्लेट सिस्टम और ऑप्टिकल सिस्टम जैसे मुख्य घटकों से बना है। यह प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करने के लिए नमूने को उत्तेजित करने के लिए प्रकाश की एक निश्चित तरंग दैर्ध्य का उपयोग करना है, और उद्देश्य लेंस और ऐपिस प्रणाली को बढ़ाकर नमूने की प्रतिदीप्ति छवि का निरीक्षण करना है।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की संरचना और मुख्य घटक

(1) प्रकाश स्रोत

आजकल, 200W अल्ट्रा-हाई प्रेशर पारा लैंप का उपयोग अक्सर प्रकाश स्रोतों के रूप में किया जाता है। ये क्वार्ट्ज ग्लास से बने होते हैं, जिनके बीच में गोलाकार आकृति होती है और अंदर एक निश्चित मात्रा में पारा भरा होता है। काम के दौरान, दो इलेक्ट्रोडों के बीच डिस्चार्ज के कारण पारा वाष्पित हो जाता है, और गेंद में हवा का दबाव तेजी से बढ़ जाता है। जब पारा पूरी तरह से वाष्पित हो जाता है, तो यह मानक वायुमंडलीय दबाव 50-70 तक पहुंच सकता है, और इस प्रक्रिया में आम तौर पर लगभग 5-15 मिनट लगते हैं। अल्ट्रा-हाई प्रेशर पारा लैंप की चमक इलेक्ट्रोड के बीच डिस्चार्ज द्वारा पारा अणुओं के निरंतर पृथक्करण और कमी के दौरान प्रकाश क्वांटा के उत्सर्जन का परिणाम है। यह मजबूत पराबैंगनी और नीले-बैंगनी प्रकाश का उत्सर्जन करता है, जो विभिन्न फ्लोरोसेंट पदार्थों को उत्तेजित करने के लिए पर्याप्त है, इसलिए इसका व्यापक रूप से फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोपी में उपयोग किया जाता है।

अल्ट्रा-उच्च दबाव पारा लैंप भी बहुत अधिक गर्मी उत्सर्जित करते हैं। इसलिए, लैंप हाउस में अच्छी गर्मी लंपटता की स्थिति होनी चाहिए, और काम के माहौल का तापमान बहुत अधिक नहीं होना चाहिए।

नए अल्ट्रा-हाई प्रेशर मर्करी लैंप को उपयोग की शुरुआत में उच्च वोल्टेज के बिना प्रज्वलित किया जा सकता है। उपयोग की अवधि के बाद, इसे उच्च वोल्टेज (लगभग 15000V) पर शुरू करने की आवश्यकता होती है। शुरू करने के बाद, रखरखाव कार्यशील वोल्टेज आम तौर पर 50-60V होता है, और कार्यशील धारा लगभग 4A होती है। 200W अल्ट्रा-हाई प्रेशर पारा लैंप का औसत जीवनकाल लगभग 200 घंटे है यदि इसे हर बार 2 घंटे के लिए उपयोग किया जाता है। काम करने का समय जितना कम होगा, जीवन काल उतना ही कम होगा। यदि इसे केवल 20 मिनट के लिए उपयोग किया जाए, तो जीवनकाल 50 प्रतिशत कम हो जाएगा। इसलिए, इसका उपयोग करते समय प्रारंभ की संख्या कम से कम करें। बल्ब के उपयोग के दौरान इसकी चमकदार प्रभावकारिता धीरे-धीरे कम हो जाती है। लाइट बुझने के बाद, पुनः चालू करने से पहले इसके ठंडा होने की प्रतीक्षा करें। बल्ब को जलाने के तुरंत बाद उसे बंद न करें, ताकि अधूरे पारे के वाष्पीकरण के कारण इलेक्ट्रोड को नुकसान न पहुंचे। आम तौर पर इसके लिए 15 मिनट तक इंतजार करना पड़ता है। अति-उच्च दबाव पारा लैंप के उच्च दबाव और मजबूत पराबैंगनी किरणों के कारण, बल्ब को प्रज्वलित करने से पहले लैंप कक्ष में रखा जाना चाहिए, ताकि आंखों को नुकसान न पहुंचे और विस्फोट की स्थिति में ऑपरेशन करना पड़े। .

अल्ट्रा-हाई प्रेशर मरकरी लैंप (100W या 200W) प्रकाश स्रोत का सर्किट और ट्रांसफार्मर, गिट्टी और स्टार्ट सहित कई हिस्से। लैंप कक्ष में बल्ब के चमकदार केंद्र को समायोजित करने की एक प्रणाली है। बल्ब के पीछे एक एल्यूमीनियम-प्लेटेड अवतल परावर्तक स्थापित किया गया है, और सामने एक प्रकाश-संग्रह लेंस स्थापित किया गया है।

घरेलू अल्ट्रा-हाई प्रेशर मर्करी लैंप GCQ-200 का प्रदर्शन अच्छा है और यह HBO-200 जैसे आयातित बल्बों की जगह ले सकता है। औसत जीवनकाल 200h से अधिक है और कीमत अपेक्षाकृत कम है।

मेरे देश में विकसित एक सरल और पोर्टेबल उच्च रंग तापमान ब्रोमीन टंगस्टन फ्लोरोसेंट प्रकाश स्रोत उपकरण छोटे आकार, हल्के वजन, कम बिजली, एसी और डीसी दोहरे उपयोग (डीसी बिजली आपूर्ति के साथ), ले जाने में आसान, उपयोग में आसान है। लोकप्रिय बनाया गया और लागू किया गया।

(2) रंग फिल्टर प्रणाली

रंग फ़िल्टर प्रणाली प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का एक महत्वपूर्ण हिस्सा है, जिसमें एक उत्तेजना फ़िल्टर प्लेट और एक दबाने वाली फ़िल्टर प्लेट होती है। फ़िल्टर प्लेट मॉडल और प्रत्येक निर्माता का नाम अक्सर एक समान नहीं होता है। फ़िल्टर प्लेटों को आम तौर पर मूल रंग के नाम पर रखा जाता है, सामने के अक्षर रंग का प्रतिनिधित्व करते हैं, पीछे के अक्षर ग्लास का प्रतिनिधित्व करते हैं, और संख्याएँ मॉडल की विशेषताओं का प्रतिनिधित्व करती हैं। ओलिंप माइक्रोस्कोप

(3) वस्तुनिष्ठ लेंस

विभिन्न वस्तुनिष्ठ लेंसों का उपयोग किया जा सकता है, लेकिन अक्रोमैटिक वस्तुनिष्ठ लेंसों का उपयोग किया जाता है क्योंकि उनका ऑटोफ्लोरेसेंस न्यूनतम होता है और उनके प्रकाश संचरण गुण (तरंग दैर्ध्य रेंज) प्रतिदीप्ति के लिए उपयुक्त होते हैं। चूँकि माइक्रोस्कोप के दृश्य क्षेत्र में छवि की प्रतिदीप्ति चमक वस्तुनिष्ठ लेंस के एपर्चर अनुपात के वर्ग के समानुपाती होती है और इसके आवर्धन के व्युत्क्रमानुपाती होती है, प्रतिदीप्ति छवि की चमक में सुधार करने के लिए, एक बड़े वस्तुनिष्ठ लेंस की आवश्यकता होती है एपर्चर अनुपात का उपयोग किया जाना चाहिए. विशेषकर उच्च आवर्धन पर इसका प्रभाव बहुत स्पष्ट होता है। इसलिए, अपर्याप्त प्रतिदीप्ति वाले नमूनों के लिए, बड़े एपर्चर अनुपात वाले एक ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग यथासंभव कम ऐपिस (4×, 5×, 6.3×, आदि) के साथ किया जाना चाहिए।

(4) दर्पण

परावर्तक की परावर्तक परत आम तौर पर एल्यूमीनियम-प्लेटेड होती है, क्योंकि एल्यूमीनियम पराबैंगनी प्रकाश और दृश्य प्रकाश के नीले-बैंगनी क्षेत्र में कम अवशोषित होता है, और प्रतिबिंब 90 प्रतिशत से अधिक होता है, जबकि चांदी का प्रतिबिंब केवल 70 प्रतिशत होता है। आम तौर पर, एक फ्लैट रिफ्लेक्टर का उपयोग किया जाता है।

(5) कंडेनसर

प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी के लिए डिज़ाइन किए गए कंडेनसर क्वार्ट्ज ग्लास या अन्य यूवी-पारदर्शी ग्लास से बने होते हैं। क्लियर फील्ड कंडेनसर और डार्क फील्ड कंडेनसर दो प्रकार के होते हैं। चरण कंट्रास्ट प्रतिदीप्ति सांद्रक भी हैं।

(6) एपि-लाइट डिवाइस

नए प्रकार का एपि-लाइट उपकरण यह है कि प्रकाश स्रोत से प्रकाश हस्तक्षेप स्पेक्ट्रोस्कोपिक फिल्टर से टकराने के बाद, फिल्टर पर कोटिंग के गुणों के कारण लघु तरंग दैर्ध्य भाग (पराबैंगनी और बैंगनी नीला) परिलक्षित होता है। जब फ़िल्टर प्रकाश स्रोत का सामना करता है, तो कोण 45 होता है। जब यह झुका हुआ होता है, तो यह ऑब्जेक्टिव लेंस पर लंबवत रूप से शूट करता है, और ऑब्जेक्टिव लेंस के माध्यम से नमूने पर शूट करता है, ताकि नमूना उत्तेजित हो जाए। इस समय, ऑब्जेक्टिव लेंस सीधे प्रकाश संग्राहक के रूप में कार्य करता है। इसी समय, फ़िल्टर का लंबा हिस्सा (हरा, पीला, लाल, आदि) फ़िल्टर के लिए पारदर्शी होता है, इसलिए यह ऑब्जेक्टिव लेंस की दिशा में प्रतिबिंबित नहीं करता है, और फ़िल्टर एक उत्तेजना फ़िल्टर प्लेट के रूप में कार्य करता है, क्योंकि नमूने की प्रतिदीप्ति दृश्य प्रकाश के लंबे-तरंग दैर्ध्य क्षेत्र में है, फिल्टर के माध्यम से गुजर सकती है और अवलोकन के लिए ऐपिस तक पहुंच सकती है, आवर्धन में वृद्धि के साथ फ्लोरोसेंट छवि की चमक बढ़ जाती है, और संचरित प्रकाश की तुलना में अधिक मजबूत होती है उच्च आवर्धन पर स्रोत. ट्रांसमिशन प्रकाश स्रोत के कार्य के अलावा, यह अपारदर्शी और पारभासी नमूनों, जैसे मोटी स्लाइस, फिल्टर झिल्ली, कॉलोनियों और ऊतक संस्कृति नमूनों के प्रत्यक्ष अवलोकन के लिए अधिक उपयुक्त है। हाल के वर्षों में विकसित नए प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी ज्यादातर एपि-लाइट उपकरणों का उपयोग करते हैं, जिन्हें एपि-प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप कहा जाता है।