चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के उपयोग में कई मुद्दे:
(1) चरण उत्क्रमण जब n '
(2) चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी की इमेजिंग प्रक्रिया में प्रभामंडल और क्रमिक मद्धिम प्रभाव, जब चरण विलंब के कारण कोई संरचना अधिक गहरी हो जाती है, तो प्रकाश की हानि नहीं होती है, बल्कि छवि तल पर प्रकाश के पुनर्वितरण का परिणाम होता है। इसलिए, अंधेरे क्षेत्रों में स्पष्ट रूप से गायब होने वाला प्रकाश गहरे रंग की वस्तुओं के चारों ओर एक उज्ज्वल प्रभामंडल के रूप में दिखाई देगा। यह चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी का एक नुकसान है, जो बारीक संरचनाओं के अवलोकन में बाधा डालता है। जब कुंडलाकार छिद्र बहुत संकीर्ण होता है, तो प्रभामंडल घटना अधिक गंभीर होती है। चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी की एक अन्य घटना डिमिंग प्रभाव है, जो चरण कंट्रास्ट अवलोकन के दौरान देखे गए समान चरण विलंब के साथ एक बड़े क्षेत्र के किनारों पर कंट्रास्ट में कमी को संदर्भित करता है।
(3) नमूना मोटाई का प्रभाव अंतर देखते समय, नमूने की मोटाई 5 μ मीटर या पतली होनी चाहिए। मोटे नमूनों का उपयोग करते समय, नमूने की ऊपरी परत स्पष्ट होती है, जबकि गहरी परत धुंधली होगी और चरण शिफ्ट हस्तक्षेप और प्रकाश प्रकीर्णन हस्तक्षेप उत्पन्न करेगी।
(4) नमूने पर कवर ग्लास और स्लाइड के प्रभाव को कवर ग्लास से ढंकना चाहिए, अन्यथा कुंडलाकार एपर्चर की चमकदार रिंग और चरण प्लेट की डार्क रिंग को ओवरलैप करना मुश्किल होता है। विभेदक अवलोकन में स्लाइड और कवर ग्लास के ग्लास की गुणवत्ता के लिए भी उच्च आवश्यकताएं होती हैं। जब खरोंच, असमान मोटाई, या असमान असमानता होती है, तो यह उज्ज्वल रिंग और चरण हस्तक्षेप के विरूपण का कारण बन सकता है। इसके अलावा, यदि ग्लास स्लाइड बहुत मोटी या बहुत पतली है, तो इससे कुंडलाकार छिद्र बड़ा या छोटा हो जाएगा।
वर्तमान में, ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप पारंपरिक जैविक सूक्ष्मदर्शी से विभिन्न प्रकार के विशेष सूक्ष्मदर्शी तक विकसित हो गए हैं। उनके इमेजिंग सिद्धांतों के अनुसार, उन्हें इसमें विभाजित किया जा सकता है:
① ज्यामितीय ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप: जैविक माइक्रोस्कोप, गिरने वाले प्रकाश माइक्रोस्कोप, उल्टे माइक्रोस्कोप, मेटलोग्राफिक माइक्रोस्कोप, डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप आदि सहित।
② भौतिक ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप: चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप, ध्रुवीकरण माइक्रोस्कोप, हस्तक्षेप माइक्रोस्कोप, चरण कंट्रास्ट ध्रुवीकरण माइक्रोस्कोप, चरण कंट्रास्ट हस्तक्षेप माइक्रोस्कोप, चरण कंट्रास्ट प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप, आदि सहित।
③ सूचना रूपांतरण सूक्ष्मदर्शी: प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी, माइक्रोस्पेक्ट्रोमीटर, छवि विश्लेषण सूक्ष्मदर्शी, ध्वनिक सूक्ष्मदर्शी, फोटोग्राफिक सूक्ष्मदर्शी, टेलीविजन सूक्ष्मदर्शी, आदि सहित।
सूक्ष्मदर्शी के कई उपयोगों की सूची बनाएं: एक जैविक सूक्ष्मदर्शी: सामान्यतया, सूक्ष्मदर्शी को स्टीरियो माइक्रोस्कोप और जैविक सूक्ष्मदर्शी में विभाजित किया जा सकता है। विभिन्न प्रयोजनों एवं आवश्यकताओं के कारण अनेक शाखाएँ उभरीं, परन्तु मूल सिद्धान्त वही रहे। ध्रुवीकरण, चरण कंट्रास्ट, संचरण और गिरती रोशनी को अभी भी जैविक सूक्ष्मदर्शी के रूप में वर्गीकृत किया गया है। स्टीरियोस्कोपिक माइक्रोस्कोप, जिसे एनाटोमिकल माइक्रोस्कोप, सॉलिड माइक्रोस्कोप और स्टीरियो माइक्रोस्कोप के रूप में भी जाना जाता है, एक बहुमुखी माइक्रोस्कोप है। इसे संचालित करना आसान है, नमूनों के लिए कम आवश्यकताएं हैं, लंबी कार्य दूरी है, और अवलोकन करते समय त्रि-आयामीता की मजबूत भावना है। इसका उपयोग भौतिक वस्तुओं का निरीक्षण करने या अवलोकन करते समय नमूनों पर कुछ ऑपरेशन करने के लिए किया जा सकता है। नमूने को जैविक माइक्रोस्कोप की तरह काटने के बजाय, टुकड़ा करने के लिए संबंधित तकनीक और उपकरण की आवश्यकता होती है। इसलिए, स्टीरियो माइक्रोस्कोप में माइक्रोइलेक्ट्रॉनिक्स, सटीक उपकरण असेंबली और रखरखाव, और माइक्रो उत्कीर्णन जैसे क्षेत्रों में अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला होती है। जीव विज्ञान और चिकित्सा (वर्तमान में सर्जिकल माइक्रोस्कोप के रूप में वर्गीकृत) के क्षेत्र में शरीर रचना विज्ञान और माइक्रोसर्जरी में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, जीव विज्ञान और चिकित्सा में उपयोग किया जाने वाला प्रकाश स्रोत केवल एक ठंडा प्रकाश स्रोत (फाइबर ऑप्टिक) हो सकता है; उद्योग में छोटे भागों और एकीकृत सर्किट के अवलोकन, संयोजन, निरीक्षण और अन्य कार्यों के लिए उपयोग किया जाता है। मेटलोग्राफिक माइक्रोस्कोप: कई लोग इसे "मेटलोग्राफिक माइक्रोस्कोप" के रूप में लिखना पसंद करते हैं। मेटलोग्राफिक माइक्रोस्कोप एक माइक्रोस्कोप है जिसका उपयोग विशेष रूप से धातुओं और खनिजों जैसी अपारदर्शी वस्तुओं की मेटलोग्राफिक संरचना का निरीक्षण करने के लिए किया जाता है। इन अपारदर्शी वस्तुओं को एक नियमित ट्रांसमिशन माइक्रोस्कोप में नहीं देखा जा सकता है, इसलिए उनके और एक नियमित माइक्रोस्कोप के बीच मुख्य अंतर यह है कि पहला परावर्तित प्रकाश का उपयोग करता है, जबकि दूसरा रोशनी के लिए प्रसारित प्रकाश का उपयोग करता है। मेटलोग्राफिक माइक्रोस्कोप में, रोशनी की किरण वस्तुनिष्ठ लेंस से प्रेक्षित वस्तु की सतह तक निर्देशित होती है, सतह से परावर्तित होती है, और फिर इमेजिंग के लिए वस्तुनिष्ठ लेंस पर वापस आ जाती है। एकीकृत सर्किट सिलिकॉन वेफर्स का पता लगाने में इस परावर्तक प्रकाश विधि का भी व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।
