प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी के सिद्धांत, विशेषताएँ और उपयोग
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का सिद्धांत और संरचनात्मक विशेषताएं: एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप एक उच्च चमकदार दक्षता बिंदु प्रकाश स्रोत का उपयोग करता है, जो एक रंग फ़िल्टरिंग प्रणाली के माध्यम से प्रकाश की एक निश्चित तरंग दैर्ध्य (जैसे पराबैंगनी प्रकाश 3650 इंच या पराबैंगनी नीली रोशनी 4200 इंच) उत्सर्जित करता है। उत्तेजना प्रकाश. नमूने में प्रतिदीप्ति पदार्थ प्रतिदीप्ति के विभिन्न रंगों को उत्सर्जित करने के लिए उत्तेजित होता है, और फिर उद्देश्य और ऐपिस के आवर्धन के माध्यम से देखा जाता है। इस तरह, कमजोर प्रतिदीप्ति के साथ भी, यह आसानी से पहचानने योग्य है और मजबूत विपरीत पृष्ठभूमि के तहत अत्यधिक संवेदनशील है, जिसका उपयोग मुख्य रूप से कोशिका संरचना और कार्य, साथ ही रासायनिक संरचना का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप की मूल संरचना एक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और कुछ सहायक उपकरण (जैसे फ्लोरोसेंट प्रकाश स्रोत, उत्तेजना फिल्टर, बाइक्रोमैटिक बीम विभाजक, और अवरुद्ध फिल्टर इत्यादि) से बनी होती है। फ्लोरोसेंट प्रकाश स्रोत - आमतौर पर अल्ट्रा-हाई प्रेशर पारा लैंप (50-200W) का उपयोग करते हैं, जो विभिन्न तरंग दैर्ध्य का प्रकाश उत्सर्जित कर सकते हैं। हालाँकि, प्रत्येक फ्लोरोसेंट पदार्थ में एक उत्तेजना प्रकाश तरंग दैर्ध्य होता है जो सबसे मजबूत प्रतिदीप्ति उत्पन्न करता है, इसलिए उत्तेजना प्रकाश की केवल एक निश्चित तरंग दैर्ध्य को गुजरने और रोशन करने की अनुमति देने के लिए उत्तेजना फिल्टर (आमतौर पर पराबैंगनी, बैंगनी, नीला और हरा उत्तेजना फिल्टर) को जोड़ने की आवश्यकता होती है। नमूना, अन्य सभी प्रकाश को अवशोषित करते हुए। उत्तेजित प्रकाश से विकिरणित होने के बाद, प्रत्येक पदार्थ बहुत कम समय में विकिरण की तुलना में लंबी तरंग दैर्ध्य के साथ दृश्यमान प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करता है। प्रतिदीप्ति में विशिष्टता होती है और यह आमतौर पर उत्तेजना प्रकाश से कमजोर होती है। विशिष्ट प्रतिदीप्ति का निरीक्षण करने के लिए, ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे एक अवरुद्ध (या दबाने वाला) फ़िल्टर जोड़ने की आवश्यकता होती है।
इसके दो कार्य हैं: सबसे पहले, यह प्रतिदीप्ति को परेशान करने और आंखों को नुकसान पहुंचाने से बचने के लिए उत्तेजना प्रकाश को ऐपिस में प्रवेश करने से रोकता है और रोकता है; दूसरे, यह एक विशिष्ट प्रतिदीप्ति रंग प्रदर्शित करते हुए विशिष्ट प्रतिदीप्ति का चयन करता है और उसे गुजरने की अनुमति देता है। एक साथ उपयोग के लिए दोनों प्रकार के फ़िल्टर का चयन किया जाना चाहिए।