प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के सिद्धांत और संरचनात्मक विशेषताएं
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी बिंदु प्रकाश स्रोत की उच्च चमकदार दक्षता का उपयोग है, रंग फ़िल्टरिंग प्रणाली के माध्यम से प्रकाश की एक निश्चित तरंग दैर्ध्य (जैसे पराबैंगनी 3650 या बैंगनी-नीला 4200) को उत्तेजित प्रकाश के रूप में उत्सर्जित करने के लिए, नमूने के भीतर प्रतिदीप्ति सामग्री का उत्तेजना प्रतिदीप्ति के विभिन्न रंगों की एक किस्म का उत्सर्जन करता है, और फिर अवलोकन के लिए उद्देश्य और ऐपिस के माध्यम से बढ़ाया जाता है। इस तरह, मजबूत विपरीत पृष्ठभूमि में, भले ही प्रतिदीप्ति बहुत कमजोर हो, इसे पहचानना आसान है, उच्च संवेदनशीलता, मुख्य रूप से कोशिका संरचना और कार्य और रासायनिक संरचना के अध्ययन के लिए उपयोग किया जाता है। प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की मूल संरचना एक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और कुछ सहायक उपकरण (जैसे प्रतिदीप्ति प्रकाश स्रोत, उत्तेजना फिल्टर, दोहरे रंग बीम विभाजक और अवरोध फिल्टर, आदि) से बनी होती है। फ्लोरोसेंट प्रकाश स्रोत - आम तौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला अल्ट्राहाई-प्रेशर मर्करी लैंप (50-200W), जो प्रकाश की विभिन्न तरंगदैर्ध्य का उत्सर्जन कर सकता है, लेकिन प्रत्येक फ्लोरोसेंट पदार्थ में सबसे मजबूत फ्लोरोसेंस उत्तेजना तरंगदैर्ध्य होता है, इसलिए उत्तेजना फिल्टर (आमतौर पर पराबैंगनी, बैंगनी, नीला और हरा उत्तेजना फिल्टर) जोड़ने की आवश्यकता होती है, ताकि नमूनों के विकिरण के माध्यम से केवल एक निश्चित तरंगदैर्ध्य का उत्तेजना प्रकाश गुजर सके, जबकि अन्य प्रकाश अवशोषित हो जाता है। इसलिए एक उत्तेजना फिल्टर (आमतौर पर पराबैंगनी, बैंगनी, नीला और हरा उत्तेजना फिल्टर) जोड़ना आवश्यक है, ताकि नमूने के माध्यम से केवल एक निश्चित तरंगदैर्ध्य का उत्तेजना प्रकाश गुजर सके, जबकि अन्य प्रकाश अवशोषित हो जाता है। जब प्रत्येक पदार्थ को उत्तेजना प्रकाश से विकिरणित किया जाता है, तो यह बहुत ही कम समय के भीतर विकिरणित प्रकाश की तुलना में लंबी तरंगदैर्ध्य का दृश्यमान प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करता है। प्रतिदीप्ति में एक विशिष्टता होती है, जो आम तौर पर उत्तेजना प्रकाश से कमजोर होती है, ताकि विशिष्ट प्रतिदीप्ति का निरीक्षण करने में सक्षम होने के लिए, एक अवरोध (या दमन) फिल्टर जोड़ने की आवश्यकता के पीछे उद्देश्य लेंस में।
इसकी भूमिका दोहरी है:
एक तरीका यह है कि उत्तेजित प्रकाश को ऐपिस में अवशोषित कर लिया जाए और अवरुद्ध कर दिया जाए, ताकि प्रतिदीप्ति में व्यवधान न आए और आंख को नुकसान न पहुंचे।
दूसरा है विशिष्ट फ्लोरोसेंट को चुनना और उसे गुजरने देना, जिससे विशिष्ट फ्लोरोसेंट रंग दिखाई दे। दो प्रकार के फिल्टर का चयन करना चाहिए और उनका संयोजन में उपयोग करना चाहिए।
