प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का सिद्धांत, विशेषताएँ और उपयोग
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का सिद्धांत और संरचनात्मक विशेषताएं: प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप एक रंग फिल्टर प्रणाली के माध्यम से उत्तेजना प्रकाश के रूप में प्रकाश की एक निश्चित तरंग दैर्ध्य (जैसे पराबैंगनी प्रकाश 3650 या बैंगनी नीली रोशनी 4200) उत्सर्जित करने के लिए एक अत्यधिक कुशल बिंदु प्रकाश स्रोत का उपयोग करता है, जो प्रतिदीप्ति के विभिन्न रंगों को उत्सर्जित करने के लिए नमूने में फ्लोरोसेंट पदार्थों को उत्तेजित करता है, और फिर उद्देश्य लेंस और ऐपिस के आवर्धन के माध्यम से देखता है। इस तरह, मजबूत पृष्ठभूमि में कमजोर प्रतिदीप्ति के साथ भी, इसे पहचानना आसान है और इसमें उच्च संवेदनशीलता है। इसका उपयोग मुख्य रूप से कोशिका संरचना, कार्य और रासायनिक संरचना के अध्ययन के लिए किया जाता है। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप की मूल संरचना एक नियमित ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और कुछ सहायक उपकरण जैसे फ्लोरोसेंट प्रकाश स्रोत, उत्तेजना फिल्टर, दोहरे रंग बीम स्प्लिटर और ब्लॉकिंग फिल्टर से बनी होती है। फ्लोरोसेंट प्रकाश स्रोत - आमतौर पर अल्ट्रा {{7} उच्च दबाव पारा लैंप (50-200W) का उपयोग करता है, जो विभिन्न तरंग दैर्ध्य के प्रकाश का उत्सर्जन कर सकता है, लेकिन प्रत्येक फ्लोरोसेंट पदार्थ में एक उत्तेजना प्रकाश तरंग दैर्ध्य होता है जो सबसे मजबूत प्रतिदीप्ति पैदा करता है। इसलिए, उत्तेजना फिल्टर (आमतौर पर पराबैंगनी, बैंगनी, नीला और हरा उत्तेजना फिल्टर) को जोड़ने की आवश्यकता होती है ताकि उत्तेजना प्रकाश की केवल एक निश्चित तरंग दैर्ध्य को पार किया जा सके और अन्य सभी प्रकाश को अवशोषित करते हुए नमूने को विकिरणित किया जा सके। उत्तेजना प्रकाश से विकिरणित होने के बाद, प्रत्येक पदार्थ बहुत ही कम समय में विकिरण तरंगदैर्घ्य से अधिक लंबी तरंगदैर्घ्य के साथ दृश्य प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करता है। प्रतिदीप्ति में विशिष्टता होती है और यह आमतौर पर उत्तेजना प्रकाश से कमजोर होती है। विशिष्ट प्रतिदीप्ति का निरीक्षण करने के लिए, ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे एक अवरुद्ध (या दबाने वाला) फ़िल्टर जोड़ने की आवश्यकता होती है।
इसके कार्य दो प्रकार के हैं: पहला, प्रतिदीप्ति में गड़बड़ी और आंखों को नुकसान पहुंचाने से बचने के लिए उत्तेजना प्रकाश को अवशोषित करना और उसे ऐपिस में प्रवेश करने से रोकना; दूसरा, एक विशिष्ट फ्लोरोसेंट रंग प्रदर्शित करते हुए, विशिष्ट फ्लोरोसेंस का चयन करना और उसे गुजरने की अनुमति देना। दो प्रकार के फिल्टर का संयोजन में उपयोग किया जाना चाहिए।
