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ऑप्टिकल और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी नमूनों की तैयारी के तरीके

Jan 30, 2024

ऑप्टिकल और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी नमूनों की तैयारी के तरीके

 

सूक्ष्म तैयारी विधियों में आम तौर पर चार श्रेणियां शामिल हैं: सेक्शनिंग विधि, संपूर्ण माउंट विधि, स्मीयर विधि और टैबलेटिंग विधि।


①स्लाइसिंग विधि। ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप की स्लाइस की मोटाई 2 से 25 माइक्रोन के बीच होती है। आम तौर पर, जानवरों और पौधों की सामग्री के लिए लगभग 10 माइक्रोन की स्लाइस मोटाई उपयुक्त होती है। एम्बेडिंग माध्यम के आधार पर सेक्शनिंग विधियाँ अलग-अलग होती हैं। आम तौर पर इस्तेमाल की जाने वाली विधियाँ पैराफिन सेक्शनिंग विधि, कॉटन कोलाइड सेक्शनिंग विधि, फ्रोजन सेक्शनिंग विधि और एथिलीन ग्लाइकॉल मेथैक्रिलेट विधि (जिसे GMA विधि कहा जाता है) हैं। पैराफिन सेक्शनिंग विधि में फिक्सेशन, एम्बेडिंग, सेक्शनिंग, स्टेनिंग, डिहाइड्रेशन और माउंटिंग जैसे चरण शामिल हैं। कुंजी पैराफिन में जैविक सामग्री को एम्बेड करना, पैराफिन को एक सहारे के रूप में उपयोग करना और मोम ब्लॉक में डूबी जैविक सामग्री को आदर्श पतली स्लाइस में काटना है। ऑपरेशन प्रक्रिया इस प्रकार है: फिक्सेशन → पानी से धोना → अल्कोहल निर्जलीकरण चरण दर चरण कम सांद्रता से उच्च सांद्रता तक → ज़ाइलीन पारदर्शिता → मोम डुबाना → एम्बेडिंग → सेक्शनिंग → पैच → ज़ाइलीन डीवैक्सिंग → उच्च सांद्रता से कम सांद्रता तक चरण दर चरण अल्कोहल उपचार। अंत में, यह पानी में बदल जाता है → रंगाई → कम सांद्रता से उच्च सांद्रता अल्कोहल तक चरणबद्ध निर्जलीकरण → ज़ाइलीन पारदर्शिता → राल गोंद सीलिंग। सभी उत्पादन तकनीकों में मूल चरण समान हैं।


②इंटीग्रल सीलिंग विधि। एकल कोशिकाओं, छोटे जीवों या बिखरे हुए अंगों के लिए संपूर्ण-माउंट तैयारी विधि। इस विधि में फिक्सेशन, धुंधलापन, निर्जलीकरण, पारदर्शिता और माउंटिंग के विभिन्न चरणों की भी आवश्यकता होती है। इस विधि का उपयोग पैरामीशिया और कीट मुखपत्र तैयार करने के लिए किया जाता है।


③स्मीयर विधि। एक तैयारी विधि जिसमें आसानी से फैलने वाले जैविक नमूनों को कांच की स्लाइड पर फैलाया जाता है। रक्त स्मीयर इसका एक उदाहरण है।


④टैबलेट प्रेसिंग विधि। प्राकृतिक और आसानी से फैलने वाले ऊतकों या प्रसंस्करण के बाद आसानी से फैलने वाले ऊतकों, जैसे कि पशु शुक्राणुकोशिकाओं और जड़ की नोक कोशिकाओं को एक ग्लास स्लाइड पर रखें, एक कवर स्लिप जोड़ें, और कोशिकाओं या कोशिकाओं के अंदर की संरचना को बनाने के लिए ऊतक को बल से कुचल दें। उत्पादन विधि की एक परत में फैल गया है। दबाने की विधि का उपयोग अक्सर गुणसूत्रों का निरीक्षण करने के लिए किया जाता है, आमतौर पर मैजेंटा एसीटेट, लाइकेन लाल और कार्बोलिक फ्यूचिन के साथ दाग दिया जाता है।

 

2 Electronic microscope

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