माइक्रोस्कोपी - संरचना कार्य विवरण
उद्देश्य लेंस
ऑब्जेक्टिव लेंस पहली इमेजिंग के लिए माइक्रोस्कोप का ऑप्टिकल हिस्सा है, जो एक साथ चिपके हुए लेंस के कई समूहों से बना होता है। फोकल लंबाई लेंस समूह की कुल फोकल लंबाई है।
रंगीन विपथन, विपथन, क्षेत्र वक्रता आदि के लिए सुधार की डिग्री और उनकी मालिकाना विशेषताओं के आधार पर, कई प्रकार के उद्देश्य होते हैं: (योजना) अक्रोमेटिक उद्देश्य, (योजना) एपोक्रोमैट उद्देश्य, सुपर-प्लान और विशेष उद्देश्य, आदि .
रंगीन विपथन: दृश्य प्रकाश स्रोतों (पॉलीक्रोमैटिक प्रकाश) की इमेजिंग में रंग का अंतर। एक सफेद वस्तु बिंदु एक सफेद छवि बिंदु नहीं बना सकता, बल्कि एक रंगीन छवि स्थान बना सकता है।
विपथन: ऑप्टिकल अक्ष के बाहर वस्तु बिंदु द्वारा उत्सर्जित प्रकाश किरण के ऑप्टिकल सिस्टम द्वारा अपवर्तित होने के बाद छवि तल पर बना फैला हुआ स्थान (भ्रम का चक्र)।
कोमा विपथन: ऑप्टिकल अक्ष के बाहर किसी वस्तु बिंदु द्वारा उत्सर्जित प्रकाश किरण के ऑप्टिकल सिस्टम द्वारा अपवर्तित होने के बाद धूमकेतु जैसी असममित इमेजिंग त्रुटि।
अक्रोमेटिक ऑब्जेक्टिव लेंस अक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव: साधारण ऑब्जेक्टिव लेंस, खोल पर "Ach" से चिह्नित। मुख्य रूप से रंगीन विपथन (लाल, नीला), गोलाकार विपथन (पीला, हरा) और ऑप्टिकल अक्ष इमेजिंग के कोमा को ठीक करें। क्षेत्र की वक्रता बड़ी है.
एपोक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव लेंस एपोक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव: सटीक और जटिल संरचना वाला उच्च-ग्रेड ऑब्जेक्टिव लेंस, फ्लोराइट जैसे विशेष ग्लास से बना होता है, और खोल पर "एपो" से चिह्नित होता है। अक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव लेंस के आधार पर, इसे द्वितीयक स्पेक्ट्रम, लाल, हरे और नीले विपथन और लाल और नीले गोलाकार विपथन को भी ठीक करने की आवश्यकता होती है। एपोक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव लेंस में उत्तम विपथन सुधार, बड़ा संख्यात्मक एपर्चर, उच्च रिज़ॉल्यूशन, उच्च प्रभावी आवर्धन और बेहतर इमेजिंग गुणवत्ता है।
सेमी एपोक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव लेंस: प्रदर्शन लागत और इमेजिंग गुणवत्ता अक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव लेंस और एपोक्रोमैटिक ऑब्जेक्टिव लेंस के बीच होती है, जिसे फ्लोरस्पार (फ्लोराइट) ऑब्जेक्टिव लेंस के रूप में भी जाना जाता है, जिसे "एफएल" के साथ चिह्नित किया जाता है। लाल और नीले रंग के रंगीन विपथन और गोलाकार विपथन को ठीक किया जा सकता है।
योजना उद्देश्य: यह मुख्य रूप से क्षेत्र वक्रता के दोषों को ठीक करता है, ताकि देखने का क्षेत्र समतल हो, इमेजिंग यथार्थवादी हो और अवलोकन सुविधाजनक हो। यह एक अर्धवृत्ताकार रियर लेंस है जिसे ऑब्जेक्टिव लेंस असेंबली में जोड़ा गया है। इसे अक्रोमैट उद्देश्यों, एपोक्रोमैट उद्देश्यों में भी जोड़ा जा सकता है।
विशेष वस्तुनिष्ठ लेंस: उपरोक्त वस्तुनिष्ठ लेंस के आधार पर, विशेष अवलोकन प्रभाव प्राप्त करने के लिए वस्तुनिष्ठ लेंस का डिजाइन और निर्माण किया जाता है।
ऐपिस
ऐपिस वस्तुनिष्ठ लेंस की वास्तविक छवि को बड़ा करता है, जो मध्यवर्ती छवि का आवर्धन है और दूसरे आवर्धन से संबंधित है। ऐपिस की संरचना अपेक्षाकृत सरल है, जिसमें कई समूहों में कई लेंस शामिल हैं। वह बिंदु जहां नेत्रिका से गुजरने वाली प्रकाश किरणें ऊपर से टकराती हैं, नेत्र बिंदु कहलाता है, जो इमेजिंग अवलोकन के लिए सबसे अच्छी स्थिति है।
ऐपिस में आवर्धन के विभिन्न प्रकार के विन्यास हैं, 10X का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है; 5X में इमेजिंग रिड्यूसिबिलिटी अधिक है, लेकिन आवर्धन अपेक्षाकृत छोटा है; 20X ऐपिस में सबसे बड़ा आवर्धन होता है, लेकिन छवि स्पष्टता कम हो जाती है। इसका चयन वास्तविक आवश्यकताओं के अनुसार किया जाना चाहिए।
कंडेनसर
कंडेनसर का उपयोग प्रकाश की कमी को पूरा करने, प्रकाश स्रोत के प्रकाश गुणों को उचित रूप से बदलने, नमूने पर ध्यान केंद्रित करने और रोशनी में सुधार करने के लिए किया जाता है। यह स्टेज के नीचे स्थित होता है और NA ग्रेटर दैन या उसके बराबर 0.40 ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते समय इसे इसके साथ सहयोग करना चाहिए। इसमें विभिन्न प्रकार की संरचनाएं हैं, और ऑब्जेक्टिव लेंस के विभिन्न संख्यात्मक एपर्चर में कंडेनसर के लिए अलग-अलग आवश्यकताएं होती हैं।
1. एब्बे कंडेनसर (एब्बे कंडेनसर): एब्बे कंडेनसर दो लेंसों से बना होता है, जिसकी प्रकाश एकत्र करने की क्षमता बेहतर होती है। जब साधारण माइक्रोस्कोप के ऑब्जेक्टिव लेंस का NA 0.60 से अधिक या उसके बराबर होता है, तो रंगीन विपथन और गोलाकार विपथन का सुधार पूरा नहीं होता है, और इसे एक साथ उपयोग करने की आवश्यकता होती है।
2. अक्रोमैटिक अप्लानेटिक कंडेनसर: अक्रोमैटिक कंडेनसर लेंस की एक श्रृंखला से बना होता है, जो संतोषजनक इमेजिंग प्राप्त करने के लिए रंगीन विपथन और गोलाकार विपथन को ठीक कर सकता है। उज्ज्वल क्षेत्र अवलोकन में यह सर्वोत्तम है। यह उन्नत माइक्रोस्कोप और कम आवर्धन वाले ऑब्जेक्टिव लेंस से सुसज्जित है जो लागू नहीं होता है।
3. अन्य कंडेनसर उपर्युक्त उज्ज्वल क्षेत्र के अलावा अन्य प्रयोजनों के लिए उपयोग किए जाने वाले कंडेनसर को संदर्भित करते हैं, जैसे डार्क फील्ड कंडेनसर, चरण कंट्रास्ट कंडेनसर, ध्रुवीकरण कंडेनसर, विभेदक हस्तक्षेप कंडेनसर, आदि।
प्रकाश विधि
प्रकाश स्रोत की स्थिति और किरण की दिशा के अनुसार माइक्रोस्कोप रोशनी विधियों को दो श्रेणियों में विभाजित किया गया है: संचरित रोशनी और एपि-रोशनी।
1. संचरित रोशनी (पारदर्शी रोशनी) संचरित रोशनी पारदर्शी या पारभासी नमूनों के लिए उपयुक्त है, और अधिकांश जैविक सूक्ष्मदर्शी इस प्रकार की रोशनी से संबंधित हैं। इनमें केंद्रीय प्रकाश और तिरछा प्रकाश दो प्रकार के होते हैं।
(1) केंद्रीय रोशनी का मतलब है कि रोशनी किरण की केंद्रीय धुरी और माइक्रोस्कोप की ऑप्टिकल धुरी एक ही सीधी रेखा पर हैं, जो सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली ट्रांसमिसिव रोशनी विधि है। इस विधि को क्रिटिकल लाइटिंग और कोहलर लाइटिंग में विभाजित किया गया है।
1) गंभीर रोशनी, सामान्य रोशनी विधि। लाभ: प्रकाश स्रोत की किरण को कंडेनसर द्वारा चित्रित किया जाता है और नमूने पर विकिरणित किया जाता है, और किरण संकीर्ण और मजबूत होती है। दोष: प्रकाश स्रोत की फिलामेंट छवि नमूना विमान के साथ मेल खाती है, इमेजिंग रोशनी असमान है, और प्रकाश और अंधेरे के बीच अंतर है। उन्मूलन: प्रकाश को अधिक समान बनाने के लिए प्रकाश स्रोत के सामने एक दूधिया सफेद गर्मी-अवशोषित रंग फ़िल्टर रखें, या एलईडी प्रकाश स्रोत को बदलें।
2) कोहलर रोशनी, जिसका नाम ज़ीस इंजीनियरों द्वारा आविष्कृत "माध्यमिक इमेजिंग" के सम्मान में रखा गया है। यह क्रिटिकल रोशनी की कमी को दूर करता है, इसमें अच्छा इमेजिंग प्रभाव और अच्छा फोटोमाइक्रोग्राफ है। मुख्य विशेषताएं हैं: प्रकाश स्रोत का फिलामेंट कंडेनसर और दृश्य डायाफ्राम के चर क्षेत्र से गुजरने के बाद, फिलामेंट छवि पहली बार कंडेनसर के एपर्चर के विमान पर गिरती है, और कंडेनसर दूसरी फिलामेंट छवि बनाता है वहां बैक फोकस प्लेन पर। थर्मल फोकस अब नमूने के तल पर नहीं है, और नमूने को दीर्घकालिक रोशनी के साथ देखा जा सकता है।
(2) तिरछी रोशनी (तिरछी रोशनी), बीम का केंद्रीय अक्ष माइक्रोस्कोप के ऑप्टिकल अक्ष के साथ मेल नहीं खाता है, और नमूना एक निश्चित कोण पर तिरछा रोशन होता है। इसका उपयोग आमतौर पर चरण कंट्रास्ट, डार्क फील्ड और स्टीरियो माइक्रोस्कोप में किया जाता है।
2. आपतित रोशनी: आपतित रोशनी को परावर्तक रोशनी भी कहा जाता है। प्रकाश स्रोत नमूने के ऊपर है, और प्रकाश किरण वस्तुनिष्ठ लेंस से गुजरने के बाद नमूने पर गिरती है। ऑब्जेक्टिव लेंस कंडेनसर के रूप में कार्य करता है और गैर-पारदर्शी नमूनों के लिए उपयुक्त है। प्रतिदीप्ति, त्रिविम, उल्टे और कन्फोकल सूक्ष्मदर्शी इस रोशनी का उपयोग करते हैं।
ऑप्टिकल अक्ष समायोजन
माइक्रोस्कोप ऑप्टिकल सिस्टम में, प्रकाश स्रोत, कंडेनसर लेंस, ऑब्जेक्टिव लेंस और ऐपिस के ऑप्टिकल अक्ष और डायाफ्राम के केंद्र को माइक्रोस्कोप के ऑप्टिकल अक्ष के साथ मेल खाना चाहिए, और उपयोग से पहले ऑप्टिकल अक्ष के समायोजन को नजरअंदाज नहीं किया जा सकता है .
1. कंडेनसर के केंद्र का समायोजन कंडेनसर के केंद्र का समायोजन माइक्रोस्कोप ऑप्टिकल अक्ष के समायोजन का फोकस है। विधि: सबसे पहले फ़ील्ड डायाफ्राम को कम करें और 10× ऑब्जेक्टिव लेंस से निरीक्षण करें। यदि डायाफ्राम की समोच्च छवि केंद्र में नहीं है, तो इसे केंद्र में समायोजित करने के लिए कंडेनसर के बाहर दो स्क्रू समायोजित करें; फिर धीरे-धीरे फ़ील्ड डायाफ्राम को तब तक बढ़ाएं जब तक कि समोच्च छवि केंद्र के अनुरूप न हो जाए। देखने के क्षेत्र के किनारे मेल खाते हैं, जो दर्शाता है कि वे पहले से ही समाक्षीय हैं, और थोड़ा बड़ा उपयोग करना बेहतर है।
2. एपर्चर डायाफ्राम समायोजन एपर्चर डायाफ्राम कंडेनसर में स्थापित होता है। रिसर्च-ग्रेड माइक्रोस्कोप के कंडेनसर के बाहरी किनारे पर स्केल के निशान होते हैं, जो ऑब्जेक्टिव लेंस के संख्यात्मक एपर्चर से मेल खाने के लिए कंडेनसर को समायोजित करने के लिए सुविधाजनक है। ऑब्जेक्टिव लेंस को प्रतिस्थापित करते समय इसे समकालिक रूप से समायोजित करने की आवश्यकता होती है।
