माइक्रोबियल माइक्रोस्कोप प्रत्यक्ष गिनती विधि

माइक्रोबियल माइक्रोस्कोप प्रत्यक्ष गिनती विधि

प्रायोगिक चरण (माइक्रोबियल माइक्रोस्कोप प्रत्यक्ष गिनती विधि)

1. तनुकरण

ब्रूइंग यीस्ट के सस्पेंशन को उचित रूप से पतला करें। यदि जीवाणु घोल सांद्रित नहीं है, तो इसे पतला करना आवश्यक नहीं है।

2. सूक्ष्म परीक्षण एवं मतगणना कक्ष

नमूने जोड़ने से पहले, काउंटिंग बोर्ड के काउंटिंग कक्ष की सूक्ष्म जांच करें। यदि गंदगी है तो गिनती से पहले उसे साफ करना होगा।

3. नमूने जोड़ें

साफ और सूखी रक्त कोशिका गिनने वाली प्लेट को एक कवर ग्लास से ढक दें, और फिर कवर ग्लास के किनारे से पतला खमीर समाधान की एक छोटी बूंद (बहुत ज्यादा नहीं) गिराने के लिए एक बाँझ महीन मुँह वाले ड्रॉपर का उपयोग करें। जीवाणु समाधान को केशिका प्रवेश द्वारा अंतराल के साथ गिनती कक्ष में प्रवेश करने की अनुमति दें। आम तौर पर, गिनती कक्ष को जीवाणु समाधान से भरा जा सकता है। सावधान रहें कि बुलबुले न बनें।

4. सूक्ष्मदर्शी गिनती

5 मिनट तक आराम करने के बाद, रक्त कोशिका गिनती बोर्ड को माइक्रोस्कोप स्टेज पर रखें, गिनती कक्ष के स्थान का पता लगाने के लिए पहले कम-शक्ति वाले माइक्रोस्कोप का उपयोग करें, और फिर गिनती के लिए उच्च-शक्ति माइक्रोस्कोप पर स्विच करें। यदि गिनती से पहले बैक्टीरिया का घोल बहुत गाढ़ा या बहुत पतला पाया जाता है, तो गिनती से पहले पतलापन फिर से समायोजित किया जाना चाहिए। सामान्य नमूना तनुकरण की आवश्यकता यह है कि प्रति छोटी कोशिका में लगभग 5-10 जीवाणु निकाय होने चाहिए। गिनती के लिए प्रत्येक मतगणना कक्ष से 5 कक्षों (वैकल्पिक 4 कोने और केंद्र कक्ष) का चयन करें। ग्रिड लाइन पर स्थित माइसेलियम आम तौर पर केवल ऊपरी और दाहिनी रेखाओं पर ही गिना जाता है। यदि यीस्ट अंकुरित हो जाता है और कली का आकार मातृ कोशिका के आधे तक पहुंच जाता है, तो दो जीवाणुओं की गणना की जाती है। किसी नमूने की गिनती करने के लिए, नमूने की जीवाणु सामग्री की गणना दो गिनती कक्षों से प्राप्त मूल्यों के आधार पर की जानी चाहिए।

5. रक्त कोशिका गणना बोर्ड को साफ करें

उपयोग के बाद, रक्त कोशिका गिनती बोर्ड को पानी के नल पर पानी के कॉलम से धो लें। इसे धोने के लिए कठोर वस्तुओं का प्रयोग न करें। धोने के बाद इसे अपने आप हवा में सुखाएं या हेयर ड्रायर से ब्लो ड्राई करें। सूक्ष्म परीक्षण, निरीक्षण करें कि क्या प्रत्येक छोटी कोशिका में अवशिष्ट जीवाणु शरीर या अन्य अवक्षेप हैं। यदि यह साफ नहीं है तो इसे साफ होने तक बार-बार धोना चाहिए।