माइक्रोस्कोप स्लाइड बनाने की विधि
माइक्रोस्कोप स्लाइड बनाने की तीन विधियाँ हैं:
1. स्मीयर विधि
स्मीयर विधि तैयारी की एक विधि है जिसमें सामग्री को स्लाइड पर समान रूप से फैलाया जाता है।
स्मीयर सामग्रियों में एककोशिकीय जीव, छोटे शैवाल, रक्त, जीवाणु संवर्धन, पौधों और जानवरों के ढीले ऊतक, शुक्राणु घोंसले, परागकोष आदि शामिल हैं।
लेप करते समय ध्यान देना चाहिए:
(1) स्लाइड साफ़ होनी चाहिए.
(2) स्लाइड को समतल रखा जाना चाहिए।
3) कोटिंग एक समान होनी चाहिए। कोटिंग लिक्विड की बूंद स्लाइड के केंद्र के दाईं ओर लगाएं और इसे विच्छेदन चाकू या टूथपिक आदि के ब्लेड से अच्छी तरह फैलाएं।
4) कोटिंग पतली होनी चाहिए। एक अन्य स्लाइड को पुशर के रूप में उपयोग करें, धीरे से स्लाइड की सतह पर दाएं से बाएं ओर एप्लिकेशन सॉल्यूशन की बूंद के साथ धक्का दें (दो स्लाइड के बीच का कोण 30 डिग्री से 45 डिग्री होना चाहिए), और एक समान रूप से पतली परत लगाएं।
5) स्थिरीकरण: यदि स्थिरीकरण की आवश्यकता है, तो रासायनिक स्थिरीकरण या सुखाना (जीवाणु) स्थिरीकरण का उपयोग करें।
6) धुंधलापन। बैक्टीरिया के लिए मेथिलीन ब्लू और खून के लिए रेचेल के दाग का उपयोग करें। धुंधलापन समाधान को पूरी लेपित सतह को कवर करना चाहिए।
7) धो लें। अब्सॉर्बेंट पेपर पर सुखा लें या सुखाकर बेक करें।
8) फिल्म को सील करें। लंबे समय तक भंडारण के लिए, कैनेडियन ट्री फिल्म का उपयोग करें।
2. फिल्म प्रेसिंग विधि
दबाव फिल्म विधि स्लाइड और कवर शीट के बीच रखी गई जैविक सामग्री है, एक निश्चित दबाव लागू करने से, ऊतक कोशिकाओं को अलग करने की तैयारी की एक विधि होगी।
(1) सामग्री लें। कोशिका विभाजन का अवलोकन, कोशिका विभाजन के लिए प्रचुर, ताजा ऊतक कोशिकाओं को सामग्री के रूप में चुना जाना चाहिए। जैसे कि जड़ की नोक, तने की नोक मेरिस्टेमेटिक ऊतक, अस्थि मज्जा कोशिकाएं, परागकोष (पराग माँ कोशिकाएँ)। शुक्राणु घोंसला (शुक्राणुजन्य) और इसी तरह।
(2) फिक्सेशन। सामग्री फिक्सेशन को जरूरत के हिसाब से निर्धारित किया जा सकता है, सामग्री दबाव फिल्म अवलोकन लेने के तुरंत बाद, एक अलग निश्चित उपचार (और धुंधला तुल्यकालिक) नहीं कर सकते हैं; निरीक्षण के तुरंत बाद सामग्री नहीं ले लो, सामग्री को एक फिक्सेटिव (आमतौर पर अल्कोहल एसीटेट फिक्सेटिव के साथ) के साथ तय किया जा सकता है। 95% इथेनॉल के साथ धोने के बाद 2 ~ 24 घंटे (सामग्री के आधार पर) तय किया गया, 70% इथेनॉल में संरक्षित, स्टैंडबाय।
(3) पृथक्करण। कोशिकाओं को हाइड्रोलिसिस पृथक्करण समाधान (जैसे 1 एन एचसीएल या हाइड्रोक्लोरिक एसिड एक शराब समाधान) उपचार, सामान्य उपचार 6 ~ 20min, पृथक्करण के बाद और धुंधला होने से पहले पानी के साथ rinsing के साथ सामग्री को फैलाने के लिए आसान नहीं है।
(4) धुंधलापन। कई तरह के दाग होते हैं। गुणसूत्रों का अवलोकन आमतौर पर मैजेंटा एसीटेट धुंधलापन समाधान के साथ धुंधला करने के लिए उपयोग किया जाता है।
(5) फिल्म प्रेसिंग। सामग्री को स्लाइड पर रखें, पानी या स्टेनिंग सॉल्यूशन की एक बूंद डालें, कवरस्लिप को ढकें और अपने अंगूठे से स्लाइड को धीरे से दबाएँ।
(6) अवलोकन। फिल्म को दबाने के बाद, इसे माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जा सकता है।
