लेजर स्कैनिंग मल्टीहोटन माइक्रोस्कोपी के बेहतर लाभों का परिचय
लेजर स्कैनिंग मल्टीहोटोन माइक्रोस्कोप ऑप्टिकल माइक्रोस्कोपी का एक महत्वपूर्ण सुधार है, जो मुख्य रूप से जीवित कोशिकाओं, निश्चित कोशिकाओं और ऊतकों की गहरी संरचनाओं का निरीक्षण करने की क्षमता में प्रकट होता है, और स्पष्ट और तेज बहु-परत जेड-प्लेन संरचनाओं को प्राप्त करता है, अर्थात् ऑप्टिकल स्लाइस, जो कि तीन-आयामी ठोस संरचनाओं के निर्माण के लिए उपयोग किया जा सकता है। Confocal माइक्रोस्कोप एक लेजर लाइट स्रोत का उपयोग करता है, जिसे ऑब्जेक्टिव लेंस के पूरे फोकल प्लेन को भरने के लिए विस्तारित किया जाता है, और फिर ऑब्जेक्टिव लेंस के लेंस सिस्टम के माध्यम से नमूना के फोकल प्लेन पर बहुत छोटे बिंदुओं में परिवर्तित हो जाता है। ऑब्जेक्टिव लेंस के संख्यात्मक एपर्चर के अनुसार, उज्ज्वल रोशनी का व्यास 0 के बारे में है। 25-0। 8 μ मीटर, और गहराई 0 के बारे में है। 5-1। कन्फोकल पॉइंट का आकार माइक्रोस्कोप डिजाइन, लेजर तरंग दैर्ध्य, उद्देश्य विशेषताओं, स्कैनिंग यूनिट स्टेट सेटिंग्स और नमूना गुणों द्वारा निर्धारित किया जाता है। एक क्षेत्र माइक्रोस्कोप की रोशनी सीमा और गहराई बड़ी है, जबकि एक कन्फोकल माइक्रोस्कोप की रोशनी फोकल विमान पर एक फोकल बिंदु पर केंद्रित है। कन्फोकल माइक्रोस्कोपी का मूल लाभ यह है कि यह मोटी फ्लोरोसेंट नमूनों (5 0 μ मीटर या उससे अधिक) पर ठीक ऑप्टिकल सेक्शनिंग कर सकता है, लगभग 0.5 से 1.5 μ मीटर की मोटाई के साथ। ऑप्टिकल स्लाइस छवियों की श्रृंखला माइक्रोस्कोप के जेड-एक्सिस स्टेपर मोटर का उपयोग करके नमूना को ऊपर और नीचे ले जाकर प्राप्त की जा सकती है। छवि जानकारी के संग्रह को * * विमान के भीतर नियंत्रित किया जाता है, नमूने पर अन्य पदों से उत्सर्जित संकेतों से हस्तक्षेप के बिना। पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति के प्रभाव को हटाने और सिग्नल-टू-शोर अनुपात को बढ़ाने के बाद, पारंपरिक क्षेत्र रोशनी प्रतिदीप्ति छवियों की तुलना में confocal छवियों के विपरीत और संकल्प में काफी सुधार हुआ है। कई नमूनों में, जटिल संरचनात्मक घटक जटिल सिस्टम बनाने के लिए इंटरव्यू करते हैं, लेकिन एक बार जब पर्याप्त ऑप्टिकल सेक्शन एकत्र किए जा सकते हैं, तो हम उन्हें तीन आयामों में पुनर्निर्माण करने के लिए सॉफ्टवेयर का उपयोग कर सकते हैं। इस प्रायोगिक पद्धति का उपयोग जैविक अनुसंधान में व्यापक रूप से कोशिकाओं या ऊतकों के बीच जटिल संरचनात्मक और कार्यात्मक संबंधों को स्पष्ट करने के लिए किया गया है।
