चरण विपरीत माइक्रोस्कोपी के मूल सिद्धांतों का परिचय
चरण विपरीत माइक्रोस्कोपी एक विशेष माइक्रोस्कोप है जो प्रकाश के पारदर्शी नमूने के विवरण से गुजरने पर उत्पन्न ऑप्टिकल पथ अंतर (यानी, चरण अंतर) को प्रकाश तीव्रता अंतर में परिवर्तित करता है।
जब प्रकाश अपेक्षाकृत पारदर्शी नमूने से होकर गुजरता है, तो प्रकाश की तरंगदैर्घ्य (रंग) और आयाम (चमक) में कोई स्पष्ट परिवर्तन नहीं होता है। इसलिए, जब एक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के साथ बिना रंगे नमूनों (जैसे जीवित कोशिकाओं) का निरीक्षण किया जाता है, तो इसकी आकृति विज्ञान और आंतरिक संरचना को भेद करना अक्सर मुश्किल होता है। हालांकि, सेल के विभिन्न हिस्सों के अपवर्तनांक और मोटाई में अंतर के कारण, जब प्रकाश इस नमूने से होकर गुजरता है, तो प्रत्यक्ष प्रकाश और विवर्तित प्रकाश की ऑप्टिकल पथ लंबाई अलग-अलग होगी। जैसे-जैसे ऑप्टिकल पथ की लंबाई बढ़ती या घटती है, प्रकाश तरंगों का चरण जो तेज या पीछे हो जाता है, बदल जाता है (एक चरण अंतर बनाता है)। प्रकाश के चरण अंतर को नग्न आंखों से महसूस नहीं किया जा सकता है, लेकिन चरण विपरीत माइक्रोस्कोप अपने विशेष उपकरण - कुंडलाकार डायाफ्राम और चरण प्लेट का उपयोग करके प्रकाश के चरण अंतर को एक आयाम अंतर (प्रकाश और अंधेरा) में परिवर्तित करने के लिए प्रकाश की हस्तक्षेप घटना का उपयोग कर सकता है जिसे मानव आंख द्वारा देखा जा सकता है। अंतर), ताकि मूल पारदर्शी वस्तु प्रकाश और अंधेरे में स्पष्ट अंतर दिखाती है, और इसके विपरीत बढ़ाया जाता है, जिससे हमें जीवित कोशिकाओं और इंट्रासेल्यूलर घटकों को अधिक स्पष्ट रूप से देखने की इजाजत मिलती है जिन्हें सामान्य ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप के तहत स्पष्ट रूप से नहीं देखा जा सकता है या नहीं देखा जा सकता है। कुछ माइक्रोस्ट्रक्चर।
चरण विपरीत माइक्रोस्कोप का इमेजिंग सिद्धांत: सूक्ष्म परीक्षण के लिए प्रकाश स्रोत केवल कुंडलाकार डायाफ्राम की पारदर्शी अंगूठी से गुजर सकता है, और फिर कंडेनसर द्वारा एक प्रकाश किरण में संघनित किया जा सकता है। जब यह प्रकाश किरण निरीक्षण की जाने वाली वस्तु से गुजरती है, तो प्रत्येक भाग की अलग-अलग ऑप्टिकल पथ लंबाई के कारण प्रकाश अलग-अलग होगा। विक्षेपण (विवर्तन) की डिग्री। क्योंकि पारदर्शी रिंग द्वारा बनाई गई छवि ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे के फोकल प्लेन और चरण प्लेट पर संयुग्म तल के साथ मेल खाती है। इसलिए, अप्रभावित प्रत्यक्ष प्रकाश संयुग्म सतह से गुजरता है, जबकि विक्षेपित विवर्तित प्रकाश क्षतिपूर्ति सतह से गुजरता है। चरण प्लेट पर संयुग्म सतह और क्षतिपूर्ति सतह के विभिन्न गुणों के कारण, वे क्रमशः इन दो भागों से गुजरने वाले प्रकाश में एक निश्चित चरण अंतर और तीव्रता कमजोर पड़ने का उत्पादन करेंगे। यात्रा करते समय, प्रत्यक्ष प्रकाश और विवर्तित प्रकाश एक दूसरे के साथ हस्तक्षेप करेंगे, जिससे चरण अंतर एक आयाम अंतर में बदल जाएगा। इस तरह, चरण विपरीत माइक्रोस्कोपी के दौरान, रंगहीन पारदर्शी शरीर से गुजरने वाला प्रकाश चरण अंतर को परिवर्तित करता है जो मानव आंख के लिए अप्रभेद्य है, एक आयाम अंतर (प्रकाश और अंधेरे के बीच का अंतर) में जिसे मानव आंख पहचान सकती है।
