मल्टीफोटोन लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी के फायदे और नुकसान का परिचय
1. उत्तेजित करने के लिए लाल प्रकाश या अवरक्त प्रकाश का उपयोग करने पर, प्रकाश का प्रकीर्णन छोटा होता है, और छोटे कणों का प्रकीर्णन तरंगदैर्घ्य की चौथी शक्ति के व्युत्क्रमानुपाती होता है।
2. इमेजिंग क्रॉस-सेक्शन से अधिक बिखरे हुए फोटॉनों को पिनहोल की आवश्यकता के बिना एकत्र किया जा सकता है।
3. पिनहोल डीफोकस क्षेत्र या फोकस क्षेत्र से उत्सर्जित बिखरे हुए फोटॉनों में अंतर नहीं कर सकता है, और गहरी परतों में बहु-फोटॉन इमेजिंग का सिग्नल-टू-शोर अनुपात अच्छा है।
4. एकल-फोटॉन उत्तेजना के लिए प्रयुक्त पराबैंगनी या दृश्य प्रकाश, किरण के फोकल तल तक पहुंचने से पहले नमूने द्वारा आसानी से अवशोषित और क्षीण हो जाता है, तथा गहरी परतों को उत्तेजित करना कठिन होता है।
5. जैविक माइक्रोस्कोप अवलोकन के संदर्भ में, पहला विचार जीव की सक्रिय अवस्था को नुकसान न पहुंचाना और पानी, आयन सांद्रता, ऑक्सीजन और पोषक तत्वों के प्रवाह को बनाए रखना है। प्रकाश अवलोकन के मामले में, ऊष्मा और फोटॉन ऊर्जा दोनों को विकिरण राशि और प्रकाश ऊर्जा के भीतर रहना चाहिए ताकि कोशिकाओं को नुकसान न पहुंचे।
6. मल्टीफोटोन माइक्रोस्कोपी के कई फायदे हैं। जैसे कि तीन आयामी रिज़ॉल्यूशन, गहराई पैठ, बिखराव दक्षता, पृष्ठभूमि प्रकाश, सिग्नल-टू-शोर अनुपात, नियंत्रण, आदि, सभी में ऐसी विशेषताएं हैं जो पिछले लेजर माइक्रोस्कोप में नहीं थीं या जिनकी तुलना नहीं की जा सकती थी।
मल्टीफोटोन लेजर स्कैनिंग माइक्रोस्कोपी के नुकसान:
1. यह केवल प्रतिदीप्ति का प्रतिबिंबन कर सकता है।
2. यदि नमूने में क्रोमोफोरस मौजूद हैं जो उत्तेजना प्रकाश को अवशोषित करते हैं, तो नमूना तापीय रूप से क्षतिग्रस्त हो सकता है।
3. रिज़ॉल्यूशन थोड़ा कम हो गया है। हालाँकि इसे एक ही समय में कॉन्फ़ोकल होल का उपयोग करके सुधारा जा सकता है, लेकिन सिग्नल की हानि होती है।
4. महंगी अल्ट्राफास्ट लेजरों द्वारा सीमित, मल्टीफोटोन स्कैनिंग माइक्रोस्कोप की लागत अपेक्षाकृत अधिक है।
