ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के बारे में कुछ ज्ञान का परिचय
एक उपकरण या युक्ति जो अवलोकन के लिए किसी छोटी वस्तु या वस्तु के छोटे हिस्से को उच्च आवर्धन पर बढ़ाती है। इसका व्यापक रूप से औद्योगिक और कृषि उत्पादन और वैज्ञानिक अनुसंधान में उपयोग किया जाता है। जीवविज्ञानी और चिकित्साकर्मी भी अपने व्यवसाय में सूक्ष्मदर्शी का बहुत उपयोग करते हैं। मोटे तौर पर ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप में विभाजित किया गया है।
ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप एक माइक्रोस्कोप है जो प्रकाश स्रोत के रूप में दृश्य प्रकाश का उपयोग करता है। साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप को दो भागों में विभाजित किया जा सकता है: ऑप्टिकल सिस्टम और मैकेनिकल डिवाइस। ऑप्टिकल प्रणाली में मुख्य रूप से ऐपिस, ऑब्जेक्टिव लेंस, कंडेनसर, डायाफ्राम और प्रकाश स्रोत शामिल हैं। यांत्रिक उपकरण में मुख्य रूप से लेंस बैरल, दर्पण स्तंभ, चरण, दर्पण आधार, मोटाई समायोजन पेंच और अन्य भाग शामिल हैं (चित्र 1)। इसका मूल ऑप्टिकल सिद्धांत चित्र 2 में दिखाया गया है। चित्र में बाईं ओर छोटा उत्तल लेंस कम फोकल लंबाई वाले लेंस के एक समूह का प्रतिनिधित्व करता है, जिसे ऑब्जेक्टिव लेंस कहा जाता है। दाईं ओर बड़ा उत्तल लेंस लंबी फोकल लंबाई वाले लेंस के एक समूह का प्रतिनिधित्व करता है, जिसे ऐपिस कहा जाता है। देखी जाने वाली वस्तु (एबी) को ऑब्जेक्टिव लेंस के फोकल बिंदु (एफ1) से थोड़ा बाहर रखा गया है। वस्तु से निकलने वाला प्रकाश वस्तुनिष्ठ लेंस से गुजरने के बाद ऐपिस फोकस (f2) से थोड़ा अंदर एक उलटी आवर्धित वास्तविक छवि (B'A') बनाता है। प्रेक्षक की आंखें ऐपिस के माध्यम से वास्तविक छवि (बी'ए') को एक उलटी आभासी छवि (बी'ए') में बढ़ा देती हैं।
ऐपिस माइक्रोस्कोप बैरल के ऊपर स्थित होता है और इसमें आम तौर पर दो उत्तल लेंस होते हैं। ऑब्जेक्टिव लेंस द्वारा बनाई गई वास्तविक छवि को और विस्तारित करने के अलावा, यह आंखों द्वारा देखे जाने वाले दृश्य क्षेत्र को भी सीमित करता है। आवर्धन के अनुसार, आमतौर पर तीन प्रकार के ऐपिस उपयोग किए जाते हैं: 5 गुना, 10 गुना और 15 गुना।
ऑब्जेक्टिव लेंस आम तौर पर माइक्रोस्कोप बैरल के नीचे, देखी जा रही वस्तु के करीब स्थित होता है। इसमें 8 से 10 लेंस होते हैं। इसका कार्य बड़ा करना (ऑब्जेक्ट के लिए एक बड़ी वास्तविक छवि बनाना), दूसरा छवि की गुणवत्ता सुनिश्चित करना और तीसरा रिज़ॉल्यूशन बढ़ाना है। आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले ऑब्जेक्टिव लेंस को आवर्धन के अनुसार कम आवर्धन (4×), मध्यम आवर्धन (10× या 20×), उच्च आवर्धन (40×) और तेल विसर्जन ऑब्जेक्टिव लेंस (100×) में विभाजित किया जा सकता है। मिरर चेंजर व्हील पर मल्टीपल ऑब्जेक्टिव लेंस लगे होते हैं, और आवश्यकतानुसार टर्नटेबल को घुमाकर अलग-अलग मल्टीपल वाले ऑब्जेक्टिव लेंस का चयन किया जा सकता है।
सूक्ष्मदर्शी का आवर्धन नेत्रिका के अभिदृश्यक से गुणा किया गया गुणज है। उदाहरण के लिए, यदि ऐपिस 10 गुना है और ऑब्जेक्टिव लेंस 40 गुना है, तो आवर्धन 40×10 गुना (आवर्धन 400 गुना) है। एक अच्छा सूक्ष्मदर्शी 2000 गुना आवर्धन कर सकता है और 1×10-5 सेमी दूरी वाले दो बिंदुओं को अलग कर सकता है।
जब सफेद प्रकाश उत्तल लेंस से होकर गुजरता है, तो कम तरंग दैर्ध्य (नीला-बैंगनी) वाले प्रकाश में लंबी तरंग दैर्ध्य (लाल-नारंगी) वाले प्रकाश की तुलना में अधिक अपवर्तन होता है। इसलिए, इमेजिंग करते समय, छवि के चारों ओर विभिन्न स्पेक्ट्रम होते हैं, और नीले या लाल प्रकाश का एक चक्र होता है। इस रंग दोष को रंगीन विपथन कहा जाता है। विभिन्न कोणों के कारण जिस पर प्रकाश लेंस की सतह के विभिन्न हिस्सों में प्रवेश करता है (और बाहर निकलता है), लेंस की परिधि से गुजरने वाला प्रकाश लेंस के केंद्र से गुजरने वाले प्रकाश की तुलना में बड़े कोण पर अपवर्तित होता है। इसलिए, इमेजिंग के दौरान छवि परिधि के आसपास धुंधली और विकृत छवियां दिखाई देती हैं। इमेजिंग सतह वक्रता के इस दोष को गोलाकार विपथन कहा जाता है। विभिन्न आकृतियों, संरचनाओं और दूरियों वाले उत्तल और अवतल लेंस समूहों की एक श्रृंखला रंगीन विपथन और गोलाकार विपथन को सबसे बड़ी सीमा तक ठीक करने के लिए एक-दूसरे के साथ सहयोग करती है, जिससे एक उज्ज्वल, स्पष्ट और सटीक छवि बनती है। यही कारण है कि ऐपिस या ऑब्जेक्टिव लेंस क्रमशः लेंस के एक सेट से बना होता है। ऐसे लेंसों को प्लान एक्रोमैट्स कहा जाता है।
जब प्रकाश को एक माध्यम (जैसे हवा) से दूसरे सघन माध्यम (जैसे कांच) में प्रक्षेपित किया जाता है, तो यह "सामान्य रेखा" (माध्यम के इंटरफ़ेस के लंबवत रेखा) की ओर झुक जाएगा, जैसे चित्र में बीओए रेखा 3. जब प्रकाश घने माध्यम (कांच) से गैर-घने माध्यम (हवा) में प्रवेश करता है, तो यह "सामान्य रेखा" से विचलित हो जाएगा, जैसे कि एओबी रेखा (चित्रा 3 ए)। जब प्रकाश कंडेनसर ग्लास (अपवर्तक सूचकांक 1.51) से गुजरता है और हवा में प्रवेश करता है, तो यह भी विचलित हो जाएगा और बाहर की ओर अपवर्तित हो जाएगा, इसलिए ऑब्जेक्टिव लेंस में प्रवेश करने वाले प्रकाश की मात्रा बहुत कम हो जाती है, और छवि का रिज़ॉल्यूशन भी कम हो जाता है। 100x ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते समय, यदि हवा को अलग करने के लिए ऑब्जेक्टिव लेंस और कवर ग्लास (अपवर्तक सूचकांक भी 1.51 है) के बीच तेल भरा जाता है, तो प्रकाश लगभग बिना अपवर्तन के ऑब्जेक्टिव लेंस में प्रवेश कर सकता है, जिससे चमक और रिज़ॉल्यूशन बढ़ जाता है छवि । ऐसे उद्देश्यों को तेल विसर्जन उद्देश्य कहा जाता है (चित्र 3बी)।
कंडेनसर माइक्रोस्कोप चरण के नीचे स्थित है, जो प्रकाश के स्रोत से प्रकाश को एकत्रित कर सकता है, नमूने पर प्रकाश को केंद्रित कर सकता है, और नमूने को मध्यम प्रकाश तीव्रता के साथ समान रूप से विकिरणित कर सकता है। कंडेनसर का निचला सिरा बीम की मोटाई को नियंत्रित करने के लिए एपर्चर स्टॉप (डायाफ्राम) से सुसज्जित है।
साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप का रोशनी स्रोत कंडेनसर के नीचे स्थित होता है, जो समान रोशनी वाला एक विशेष मजबूत प्रकाश बल्ब होता है, और प्रकाश की तीव्रता को बदलने के लिए एक चर अवरोधक से सुसज्जित होता है।
चूँकि एक साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप का प्रकाश स्रोत प्रकाश लेंस बॉडी के नीचे से संचारित होता है, कंडेनसर लेंस, ऑब्जेक्टिव लेंस से होकर गुजरता है, और ऐपिस तक पहुंचता है, देखे जाने वाले नमूने को लगभग 2 इंच की मोटाई के साथ पतले स्लाइस में काटा जाना चाहिए। 6 माइक्रोमीटर जो चिकित्सा और जैविक अनुसंधान में प्रकाश संचारित कर सकता है। और विभिन्न ऊतकों और कोशिकाओं और अन्य बारीक संरचनाओं को दिखाने के लिए दाग लगाना। संपूर्ण प्रसंस्करण प्रक्रिया को पारंपरिक ऊतक स्लाइस तकनीक कहा जाता है, जिसमें उपयुक्त ऊतक सामग्री का चयन करना, उन्हें फॉर्मेल्डिहाइड (फॉर्मेलिन) समाधान के साथ ठीक करना, चरण दर चरण अल्कोहल के साथ निर्जलीकरण करना, पैराफिन में एम्बेड करना, ऊतक को माइक्रोटोम के साथ पतली स्लाइस में काटना और उन्हें माउंट करना शामिल है। कांच की स्लाइडों पर, और फिर हेमेटोक्सिलिन-ईओसिन डाई से रंगने के बाद, ऊतक स्लाइडों को अंततः ऑप्टिकल राल गोंद में लगाया गया। तैयार टिश्यू स्लाइड को लंबे समय तक संग्रहीत किया जा सकता है।
माइक्रोस्कोप के ऐपिस और ऑब्जेक्टिव लेंस को लेंस बैरल के दोनों सिरों पर स्थापित किया जाता है, और उनकी दूरी तय की जाती है। टिश्यू स्लाइड को स्टेज पर रखें और स्टेज को ऑब्जेक्टिव लेंस के करीब लाने के लिए मोटे एडजस्टमेंट स्क्रू को घुमाएं। ऊतक का टुकड़ा वस्तुनिष्ठ लेंस के फोकल तल में प्रवेश करता है, और नमूने में ऊतक की छवि ऐपिस में देखी जा सकती है। फिर ऐपिस में छवि को देखने के लिए स्पष्ट बनाने के लिए बारीक समायोजन पेंच का उपयोग करें। आवर्धन बदलते समय, ऐपिस या ऑब्जेक्टिव लेंस को अवश्य बदला जाना चाहिए।
