सामान्य ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप का परिचय
माइक्रोस्कोप कोशिकाओं का निरीक्षण करने के लिए प्राथमिक उपकरण है। विभिन्न प्रकाश स्रोतों के अनुसार, उन्हें दो श्रेणियों में विभाजित किया जा सकता है: ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप। पहला दृश्य प्रकाश (यूवी माइक्रोस्कोप पराबैंगनी प्रकाश का उपयोग करता है) को प्रकाश स्रोत के रूप में उपयोग करता है, जबकि दूसरा प्रकाश स्रोत के रूप में इलेक्ट्रॉन बीम का उपयोग करता है। साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और लेजर कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप दोनों ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप हैं।
साधारण जैविक सूक्ष्मदर्शी तीन भागों से बने होते हैं, अर्थात्: ① प्रकाश स्रोत और कंडेनसर सहित रोशनी प्रणाली; ② ऑप्टिकल आवर्धन प्रणाली, जिसमें ऑब्जेक्टिव लेंस और ऐपिस शामिल हैं, जो माइक्रोस्कोप का मुख्य भाग है। गोलाकार विपथन और रंगीन विपथन को खत्म करने के लिए, ऐपिस और ऑब्जेक्टिव लेंस दोनों जटिल लेंस समूह से बने होते हैं; ③ यांत्रिक उपकरण, जिसका उपयोग सामग्री को ठीक करने और अवलोकन को सुविधाजनक बनाने के लिए किया जाता है।
माइक्रोस्कोप की छवि स्पष्ट है या नहीं यह न केवल आवर्धन पर निर्भर करता है, बल्कि माइक्रोस्कोप के रिज़ॉल्यूशन पर भी निर्भर करता है। रिज़ॉल्यूशन माइक्रोस्कोप (या लक्ष्य से 25 सेमी दूर मानव आँख) की वस्तुओं के बीच सबसे छोटी दूरी को भेदने की क्षमता को संदर्भित करता है। रिज़ॉल्यूशन का आकार प्रकाश की तरंग दैर्ध्य, लेंस खोलने के अनुपात और माध्यम के अपवर्तनांक के आधार पर निर्धारित करता है, सूत्र इस प्रकार व्यक्त किया जाता है:
आर=0.61λ/नाना =ｎसिन /2
सूत्र में: n=माध्यम का अपवर्तनांक; =दर्पण एपर्चर कोण (ऑब्जेक्टिव लेंस एपर्चर के लिए नमूने का उद्घाटन कोण), NA=संख्यात्मक एपर्चर। दर्पण कोण हमेशा 180 डिग्री से कम होता है, इसलिए सिना/2 का अधिकतम मान 1 से कम होना चाहिए।
ऑप्टिकल लेंस बनाने के लिए इस्तेमाल किए जाने वाले कांच का अपवर्तनांक 1.65~1.78 होता है। इस्तेमाल किए जाने वाले माध्यम का अपवर्तनांक कांच के अपवर्तनांक के जितना करीब होगा, उतना ही बेहतर होगा। शुष्क ऑब्जेक्टिव लेंस के लिए, माध्यम हवा है, और लेंस खोलने का अनुपात आम तौर पर 0.05~0.95 होता है; तेल लेंस के लिए, देवदार के तेल को माध्यम के रूप में इस्तेमाल किया जाता है, और लेंस खोलने का अनुपात 1.5 के करीब हो सकता है।
साधारण प्रकाश की तरंगदैर्घ्य 400~700nm होती है, इसलिए माइक्रोस्कोप का रिज़ॉल्यूशन मान 0.2μm से कम नहीं होगा। मानव आँख का रिज़ॉल्यूशन 0.2 मिमी है, इसलिए सामान्य माइक्रोस्कोप डिज़ाइन का अधिकतम आवर्धन आमतौर पर 1000X होता है।
