उल्टे सूक्ष्मदर्शी और प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के बीच चयन करने का परिचय
माइक्रोस्कोप कोशिका संवर्धन और संबंधित व्युत्पन्न प्रयोगों में एक महत्वपूर्ण उपकरण है। वर्तमान में, बाज़ार में विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मदर्शी उपलब्ध हैं, और ऐसा सूक्ष्मदर्शी चुनना जो आवश्यकताओं को पूरा करता हो और उपयुक्त हो, एक चुनौती है। नीचे, हम आसान चयन के लिए उल्टे सूक्ष्मदर्शी और प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के सिद्धांतों का परिचय देंगे।
उल्टे माइक्रोस्कोप की संरचना एक नियमित माइक्रोस्कोप के समान होती है, जिसमें मुख्य रूप से तीन भाग होते हैं: यांत्रिक भाग, रोशनी वाला भाग और ऑप्टिकल भाग। एक उल्टे माइक्रोस्कोप की संरचना एक नियमित ईमानदार माइक्रोस्कोप के समान होती है, सिवाय इसके कि ऑब्जेक्टिव लेंस और रोशनी प्रणाली उलट जाती है, पहला स्टेज के नीचे और दूसरा स्टेज के ऊपर होता है। यह संरचना रोशनी फोकसिंग प्रणाली और मंच के बीच प्रभावी दूरी में उल्लेखनीय वृद्धि की अनुमति देती है, जिससे मोटे अवलोकन उपकरणों जैसे कि कल्चर डिश और सेल कल्चर बोतलें (बेशक, ग्लास स्लाइड भी स्वीकार्य हैं) को रखना आसान हो जाता है, जबकि ऑब्जेक्टिव लेंस और सामग्री के बीच काम करने की दूरी बहुत बड़ी होने की आवश्यकता नहीं है। उल्टे माइक्रोस्कोप का उपयोग चिकित्सा और स्वास्थ्य संस्थानों, विश्वविद्यालयों और अनुसंधान संस्थानों द्वारा सूक्ष्मजीवों, कोशिकाओं, बैक्टीरिया, ऊतक संस्कृति, निलंबन, तलछट आदि का निरीक्षण करने के लिए किया जाता है। यह लगातार संस्कृति माध्यम में कोशिका और जीवाणु प्रजनन और विभाजन की प्रक्रिया का निरीक्षण कर सकता है, और इस प्रक्रिया के दौरान किसी भी स्थिति को पकड़ सकता है। साइटोलॉजी, पैरासाइटोलॉजी, ऑन्कोलॉजी, इम्यूनोलॉजी, जेनेटिक इंजीनियरिंग, औद्योगिक माइक्रोबायोलॉजी, वनस्पति विज्ञान आदि जैसे क्षेत्रों में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी का उपयोग कोशिकाओं के भीतर पदार्थों के अवशोषण, परिवहन, वितरण और स्थानीयकरण का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। परीक्षण की गई वस्तु के लिए, प्रतिदीप्ति उत्पन्न करने के दो तरीके हैं: सहज प्रतिदीप्ति, जो यूवी विकिरण के बाद सीधे प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करती है; द्वितीयक प्रतिदीप्ति तब होती है जब देखी गई वस्तु को फ्लोरोसेंट रंगों से उपचारित किया जाता है और फिर प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करने के लिए पराबैंगनी प्रकाश से विकिरणित किया जाता है। कोशिकाओं में कुछ पदार्थ, जैसे क्लोरोफिल, पराबैंगनी विकिरण के संपर्क में आने पर सहज प्रतिदीप्ति उत्पन्न करते हैं; कुछ पदार्थ स्वयं प्रतिदीप्ति उत्सर्जित नहीं कर सकते हैं, लेकिन यदि उन्हें फ्लोरोसेंट रंगों या फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी से रंगा जाए, तो वे पराबैंगनी प्रकाश से विकिरणित होने के बाद द्वितीयक प्रतिदीप्ति भी उत्सर्जित कर सकते हैं। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप उत्तेजना प्रकाश के रूप में एक रंग फिल्टर प्रणाली के माध्यम से प्रकाश की एक निश्चित तरंग दैर्ध्य (पराबैंगनी प्रकाश 365 एनएम या बैंगनी नीली रोशनी 420 एनएम) उत्सर्जित करने के लिए एक अत्यधिक कुशल बिंदु प्रकाश स्रोत का उपयोग करता है, जो प्रतिदीप्ति के विभिन्न रंगों को उत्सर्जित करने के लिए नमूने के अंदर फ्लोरोसेंट पदार्थों को उत्तेजित करता है, और फिर उद्देश्य लेंस और ऐपिस के आवर्धन के माध्यम से देखता है। इस तरह, मजबूत पृष्ठभूमि में कमजोर प्रतिदीप्ति के साथ भी, इसे पहचानना आसान है और इसमें उच्च संवेदनशीलता है। इसका उपयोग मुख्य रूप से कोशिका संरचना, कार्य और रासायनिक संरचना के अध्ययन के लिए किया जाता है।
