लेजर स्कैनिंग मल्टीफोटोन माइक्रोस्कोप के बेहतर फायदे
लेजर स्कैनिंग मल्टीफोटोन माइक्रोस्कोप ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप का एक महत्वपूर्ण सुधार है, जो मुख्य रूप से दर्शाता है कि यह जीवित कोशिकाओं, स्थिर कोशिकाओं और ऊतकों की गहरी संरचना का निरीक्षण कर सकता है, और स्पष्ट और तेज मल्टी-लेयर जेड-प्लेन संरचना, यानी ऑप्टिकल स्लाइस प्राप्त कर सकता है। , जिसका उपयोग नमूनों की त्रि-आयामी ठोस संरचना के निर्माण के लिए किया जा सकता है। कन्फोकल माइक्रोस्कोप लेजर प्रकाश स्रोत का उपयोग करता है, जो विस्तार के बाद ऑब्जेक्टिव लेंस के पूरे बैक फोकल प्लेन को भर देता है, और फिर ऑब्जेक्टिव लेंस के लेंस सिस्टम से होकर नमूने के फोकल प्लेन पर बहुत छोटे बिंदुओं में परिवर्तित हो जाता है। ऑब्जेक्टिव लेंस के संख्यात्मक एपर्चर के अनुसार, सबसे चमकीले रोशनी बिंदु का व्यास लगभग 0.25 ~ 0.8μm है और गहराई लगभग 0.5 ~ 1.5 μm है .. कोपोलिमराइजेशन फोकस का आकार माइक्रोस्कोप डिजाइन, लेजर तरंग दैर्ध्य, उद्देश्य लेंस विशेषताओं, स्कैनिंग यूनिट राज्य सेटिंग और नमूना गुणों पर निर्भर करता है। फ़ील्ड माइक्रोस्कोप की रोशनी सीमा और गहराई बहुत बड़ी है, जबकि कन्फोकल माइक्रोस्कोप की रोशनी फोकल प्लेन पर * *फोकस पर केंद्रित होती है। कन्फोकल माइक्रोस्कोप का सबसे बुनियादी लाभ यह है कि यह मोटे फ्लोरोसेंट नमूनों (जो 5 {{12 }} μm या अधिक तक पहुंच सकता है) के बारीक ऑप्टिकल स्लाइस बना सकता है, और स्लाइस की मोटाई लगभग 0.5 से 1.5 μ मीटर है। माइक्रोस्कोप की जेड-अक्ष स्टेपिंग मोटर द्वारा नमूने को ऊपर और नीचे ले जाकर ऑप्टिकल स्लाइस छवियों की एक श्रृंखला प्राप्त की जा सकती है। छवि जानकारी का अधिग्रहण पहले स्तर पर नियंत्रित किया जाता है और नमूने पर अन्य स्थितियों से आने वाले संकेतों से परेशान नहीं होगा। पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति के प्रभाव को हटाने और सिग्नल-टू-शोर अनुपात को बढ़ाने के बाद, पारंपरिक क्षेत्र रोशनी प्रतिदीप्ति छवि की तुलना में कन्फोकल छवि के कंट्रास्ट और रिज़ॉल्यूशन में स्पष्ट रूप से सुधार हुआ है। कई नमूनों में, एक जटिल प्रणाली बनाने के लिए कई जटिल संरचनात्मक घटकों को आपस में जोड़ा जाता है, लेकिन एक बार जब पर्याप्त ऑप्टिकल अनुभाग एकत्र किए जा सकते हैं, तो हम सॉफ्टवेयर द्वारा उन्हें तीन आयामों में फिर से बना सकते हैं। कोशिकाओं या ऊतकों के बीच जटिल संरचनात्मक और कार्यात्मक संबंधों को स्पष्ट करने के लिए जैविक अनुसंधान में इस प्रयोगात्मक विधि का व्यापक रूप से उपयोग किया गया है।
