प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी में उज्ज्वल क्षेत्र और अंधेरे क्षेत्र की इमेजिंग विधियाँ
(1) ब्राइट फील्ड इमेजिंग (बीएफआई) विधि, जो केवल पैराक्सियल क्षेत्र में संचरित इलेक्ट्रॉन बीम को ऑब्जेक्टिव एपर्चर से गुजरने की अनुमति देती है, जिससे चमकदार पृष्ठभूमि पर एक गहरी छवि बनती है। वस्तुनिष्ठ एपर्चर का एपर्चर जितना छोटा होगा, उज्ज्वल क्षेत्र छवि का कंट्रास्ट उतना ही अधिक होगा; (2) डार्क फील्ड इमेजिंग (डीएफआई) एक ऐसी तकनीक है जो संचरित किरण को अवरुद्ध करते हुए, बड़े कोण पर बिखरी हुई किरण या क्रिस्टल के एक निश्चित विवर्तन किरण के केवल एक हिस्से को उद्देश्य एपर्चर से गुजरने की अनुमति देती है। यह एक गहरे रंग की पृष्ठभूमि पर एक चमकदार ग्राफ़िक छवि बनाता है। यह डार्क फील्ड इमेजिंग विधि छवियों के कंट्रास्ट में सुधार कर सकती है और यह एक महत्वपूर्ण इमेजिंग तकनीक है।
लीका प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का उपयोग करके अंधेरे क्षेत्र की छवियां प्राप्त करने के लिए लगभग चार तरीके हैं: (1) उद्देश्य एपर्चर को घुमाते समय ऑप्टिकल अक्ष के साथ लंबवत रोशनी बनाए रखना; (2) ऑप्टिकल अक्ष की दिशा में बिखरी हुई किरणों को पकड़ने के लिए तिरछी रोशनी के उपयोग को सेंट्रल डार्क फील्ड इमेजिंग (सीडीएफआई) कहा जाता है; (3) एक केंद्रीय बीम स्टॉप और एक गोलाकार पारदर्शी क्षेत्र के साथ एक उद्देश्य एपर्चर; (4) प्रकाश संवेदन के लिए एक गोलाकार पारदर्शी कंडेनसर लेंस और ऑब्जेक्टिव लेंस के लिए एक केंद्रीय गोलाकार एपर्चर का उपयोग करें। यहां * विधि सबसे सरल है, लेकिन यह डिस्टल स्लीव क्षेत्र में इलेक्ट्रॉनिक इमेजिंग का उपयोग करती है, इसलिए विपथन बड़ा है और छवि गुणवत्ता बहुत अच्छी नहीं है। दूसरी विधि उपरोक्त कमियों से बच सकती है, लेकिन लीका प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के उद्देश्य एपर्चर को बिखरे हुए विवर्तित इलेक्ट्रॉनों का केवल एक छोटा सा हिस्सा प्राप्त होता है, जिसके परिणामस्वरूप कम दक्षता होती है। एपर्चर का किनारा अक्सर बड़ी मात्रा में इलेक्ट्रॉन बमबारी के अधीन होता है, जो आसानी से असममित संदूषण का कारण बन सकता है और छवि गुणवत्ता को प्रभावित कर सकता है। इस पहलू में कुंडलाकार उद्देश्य लेंस में सुधार किया गया है, लेकिन नुकसान यह है कि इसका उत्पादन करना मुश्किल है और पूर्ण अक्षीय समरूपता प्राप्त करना मुश्किल है। प्रकाश व्यवस्था के लिए अपेक्षाकृत आरामदायक आवश्यकताओं को देखते हुए, बाद वाले समाधान को अपनाया जा सकता है, जिसमें नमूने के लिए खोखली बीम रोशनी प्रदान करने के लिए कंडेनसर पर एक कुंडलाकार एपर्चर जोड़ना शामिल है। इस यंत्र का प्रभाव. इसका छवि रिज़ॉल्यूशन उज्ज्वल क्षेत्र छवियों के करीब हो सकता है, जबकि कंट्रास्ट में काफी सुधार हुआ है।
