प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी लेजर कन्फोकल माइक्रोस्कोपी से किस प्रकार भिन्न है
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी
1, प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी पराबैंगनी प्रकाश को प्रकाश स्रोत के रूप में उपयोग करना है, जिसका उपयोग जांच की जाने वाली वस्तु को विकिरणित करने के लिए किया जाता है, ताकि यह प्रतिदीप्ति उत्सर्जित करे, और फिर माइक्रोस्कोप के नीचे वस्तु के आकार और उसके स्थान का निरीक्षण करें। प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का उपयोग कोशिकाओं में रासायनिक पदार्थों के अवशोषण, परिवहन, वितरण और स्थानीयकरण का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। कोशिका में कुछ पदार्थ, जैसे क्लोरोफिल, पराबैंगनी प्रकाश द्वारा विकिरण के बाद प्रतिदीप्ति कर सकते हैं; कुछ पदार्थ ऐसे होते हैं जो स्वयं प्रतिदीप्ति नहीं कर सकते हैं, लेकिन यदि फ्लोरोसेंट रंगों या फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी से रंगे जाते हैं, तो वे पराबैंगनी प्रकाश द्वारा विकिरण के बाद भी प्रतिदीप्ति कर सकते हैं, और प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी इस तरह के पदार्थों के गुणात्मक और मात्रात्मक अनुसंधान के लिए उपकरणों में से एक है।
2, प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी सिद्धांत:
(ए) प्रकाश स्रोत: प्रकाश स्रोत प्रकाश की विभिन्न तरंगदैर्ध्य (पराबैंगनी से अवरक्त तक) विकीर्ण करता है।
(बी) उत्तेजना फिल्टर स्रोत: नमूने के माध्यम से प्रकाश की एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य के प्रतिदीप्ति का उत्पादन कर सकते हैं, जबकि प्रतिदीप्ति बेकार प्रकाश की उत्तेजना को अवरुद्ध.
(सी) फ्लोरोसेंट नमूना: आमतौर पर फ्लोरोक्रोम से रंगा हुआ।
(डी) ब्लॉकिंग फिल्टर: नमूने द्वारा अवशोषित नहीं होने वाले उत्तेजक प्रकाश को प्रतिदीप्ति को चुनिंदा रूप से प्रसारित करने से रोकते हैं और प्रतिदीप्ति में कुछ तरंग दैर्ध्य को भी चुनिंदा रूप से प्रसारित किया जाता है। एक माइक्रोस्कोप जो विकिरणित वस्तु को प्रतिदीप्ति बनाने के लिए प्रकाश स्रोत के रूप में पराबैंगनी प्रकाश का उपयोग करता है। इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप को पहली बार 1931 में बर्लिन, जर्मनी में नॉर और हारोस्का द्वारा इकट्ठा किया गया था। यह माइक्रोस्कोप प्रकाश किरण के बजाय एक उच्च गति वाले इलेक्ट्रॉन बीम का उपयोग करता है। क्योंकि इलेक्ट्रॉन धारा की तरंग दैर्ध्य प्रकाश तरंग से बहुत छोटी होती है, इसलिए इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप का आवर्धन 800,000 गुना तक हो सकता है, न्यूनतम सीमा 0.2 नैनोमीटर का रिज़ॉल्यूशन।
3, अनुप्रयोग का दायरा: छोटी वस्तुओं की छवि को बड़ा करने के लिए उपयोग किया जाता है। आम तौर पर जीव विज्ञान, चिकित्सा, सूक्ष्म कणों और अन्य अवलोकनों में उपयोग किया जाता है।
कन्फोकल माइक्रोस्कोप
1, सड़क पर परावर्तित प्रकाश में कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप प्लस एक आधा परावर्तक आधा लेंस, अन्य दिशाओं में मुड़े हुए परावर्तित प्रकाश के लेंस के माध्यम से किया गया होगा, एक पिनहोल के साथ एक बाधक पर अपने फोकस में, छेद फोकस में स्थित है, बाधक के पीछे एक फोटोमल्टीप्लायर ट्यूब है। यह कल्पना की जा सकती है कि इस कॉन्फोकल सिस्टम के सेट के माध्यम से डिटेक्टर प्रकाश के फोकल बिंदु से पहले और बाद में परावर्तित प्रकाश, छोटे छेद पर ध्यान केंद्रित करने में सक्षम नहीं होगा, बाधक द्वारा अवरुद्ध हो जाएगा। इसलिए फोटोमीटर फोकल बिंदु पर परावर्तित प्रकाश की तीव्रता को मापता है।
2, सिद्धांत: पारंपरिक ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप एक क्षेत्र प्रकाश स्रोत का उपयोग करता है, नमूने पर प्रत्येक बिंदु की छवि पड़ोसी बिंदुओं से प्रकाश के विवर्तन या बिखराव से बाधित होगी; लेजर स्कैनिंग कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप नमूने पर प्रत्येक बिंदु की स्कैनिंग के फोकल प्लेन में नमूने पर प्रकाश का एक बिंदु स्रोत बनाने के लिए रोशन पिनहोल के माध्यम से एक लेजर बीम का उपयोग करता है, नमूना विकिरणित होता है, इमेजिंग में पिनहोल का पता लगाने में, फोटोमल्टीप्लायर ट्यूब (पीएमटी) या कोल्ड इलेक्ट्रोकपलिंग डिवाइस (सीसीसीडी) बिंदु से बिंदु या बिंदु से बिंदु या बिंदु से बिंदु के बाद पिनहोल का पता लगाने के द्वारा, प्रकाश की तीव्रता को एक फोटोमीटर द्वारा मापा जाता है। सीसीसीडी) बिंदु से बिंदु या रेखा से रेखा प्राप्त करता है, और तेजी से कंप्यूटर मॉनीटर स्क्रीन पर एक फ्लोरोसेंट छवि बनाता है। उद्देश्य लेंस के फोकल प्लेन के सापेक्ष रोशनी पिनहोल और डिटेक्शन पिनहोल संयुग्मित है, फोकल प्लेन पर बिंदु एक ही समय में रोशनी पिनहोल और उत्सर्जन पिनहोल पर ध्यान केंद्रित करता है, फोकल प्लेन के बाहर बिंदु इमेजिंग में डिटेक्शन पिनहोल में नहीं होगा, ताकि कन्फोकल छवि ऑप्टिकल क्रॉस-सेक्शन का नमूना हो, जो साधारण माइक्रोस्कोप की धुंधली छवियों की कमियों पर काबू पा सके।
3, अनुप्रयोग क्षेत्र: चिकित्सा, पशु और पौधे अनुसंधान, जैव रसायन, जीवाणु विज्ञान, कोशिका जीव विज्ञान, ऊतक भ्रूण विज्ञान, खाद्य विज्ञान, आनुवंशिकी, औषध विज्ञान, शरीर विज्ञान, प्रकाशिकी, विकृति विज्ञान, वनस्पति विज्ञान, तंत्रिका विज्ञान, समुद्री जीव विज्ञान, सामग्री विज्ञान, इलेक्ट्रॉनिक विज्ञान, यांत्रिकी, पेट्रोलियम भूविज्ञान, खनिज विज्ञान।
