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क्या आपने कभी चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के बुनियादी सिद्धांतों को समझा है?

Mar 18, 2023

क्या आपने कभी चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के बुनियादी सिद्धांतों को समझा है?

 

चरण-विपरीत माइक्रोस्कोप का आविष्कार 1935 में डच वैज्ञानिक ज़र्निक द्वारा बिना दाग वाले नमूनों के अवलोकन के लिए किया गया था। जीवित कोशिकाओं और बिना दाग वाले जैविक नमूनों के लिए, कोशिका के प्रत्येक भाग के अपवर्तक सूचकांक और सूक्ष्म संरचना की मोटाई में अंतर के कारण, जब प्रकाश तरंग गुजरती है, तो तरंग दैर्ध्य और आयाम नहीं बदलते हैं, केवल चरण बदलता है (आयाम अंतर) ), जो मानव आँख के लिए अदृश्य है। अवलोकन करना। चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप चरण अंतर को बदलता है और जीवित कोशिकाओं और दाग रहित नमूनों का निरीक्षण करने के लिए चरण अंतर को आयाम अंतर में बदलने के लिए प्रकाश विवर्तन और हस्तक्षेप घटना का उपयोग करता है। एक चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप और एक साधारण माइक्रोस्कोप के बीच अंतर यह है कि एक चर डायाफ्राम के बजाय एक कुंडलाकार डायाफ्राम का उपयोग किया जाता है, एक सामान्य उद्देश्य लेंस के बजाय एक चरण प्लेट के साथ एक उद्देश्य लेंस का उपयोग किया जाता है, और समाक्षीयता के लिए एक दूरबीन प्रदान की जाती है।


चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के मूल सिद्धांत:
वस्तु के विभिन्न संरचनात्मक घटकों के बीच अपवर्तक सूचकांक और मोटाई में अंतर का उपयोग करके, वस्तु के विभिन्न हिस्सों से गुजरने वाले ऑप्टिकल पथ अंतर को आयाम (प्रकाश की तीव्रता) में अंतर में परिवर्तित किया जाता है, और एक कुंडलाकार डायाफ्राम के साथ कंडेनसर लेंस के माध्यम से और एक चरण प्लेट के साथ चरण अंतर वस्तुनिष्ठ लेंस अवलोकन माइक्रोस्कोप का एहसास करता है। इसका उपयोग मुख्य रूप से जीवित कोशिकाओं या बिना दाग वाले ऊतक वर्गों का निरीक्षण करने के लिए किया जाता है, और कभी-कभी इसका उपयोग दाग वाले नमूनों का निरीक्षण करने के लिए भी किया जा सकता है जिनमें कंट्रास्ट की कमी होती है।


नमूने से गुजरने वाले दृश्य प्रकाश के ऑप्टिकल पथ अंतर को आयाम अंतर में बदल दिया जाता है, जिससे विभिन्न संरचनाओं के बीच विरोधाभास में सुधार होता है और विभिन्न संरचनाएं स्पष्ट रूप से दिखाई देती हैं। नमूने से गुजरने के बाद प्रकाश अपवर्तित हो जाता है, मूल ऑप्टिकल पथ से भटक जाता है, और 1/4λ (तरंग दैर्ध्य) तक विलंबित हो जाता है। यदि इसे 1/4λ तक बढ़ाया या घटाया जाता है, तो ऑप्टिकल पथ अंतर 1/2λ हो जाता है, और दो किरणें प्रकाश की धुरी के बाद हस्तक्षेप करती हैं, आयाम को मजबूत करती हैं, बढ़ाती हैं या घटाती हैं, कंट्रास्ट में सुधार करती हैं।


चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप के दो कार्य हैं जो अन्य माइक्रोस्कोप में नहीं होते हैं: ① यह वस्तु द्वारा विवर्तित प्रकाश से प्रत्यक्ष प्रकाश (दृश्य क्षेत्र में पृष्ठभूमि प्रकाश) को अलग करता है; ② यह चरण से लगभग आधी तरंग दैर्ध्य को हटा देता है ताकि यह परस्पर क्रिया न कर सके, जिसके परिणामस्वरूप तीव्रता में परिवर्तन होता है।

 

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