प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के उपयोग के तरीके और सावधानियां
उपयोग की विधि:
(1) सामग्री शीट को वाहक चरण पर रखें।
(2) फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप वोल्टेज रेगुलेटर को चालू करें। फिर यूवी लैंप को प्रज्वलित करने के लिए स्टार्ट ग्रुप को दबाएं, इसे 15 मिनट तक बंद नहीं किया जाना चाहिए, और इसे बंद करने के बाद 3 मिनट तक पुनः चालू नहीं किया जाना चाहिए।
(3)उत्तेजना फिल्टर को v पर, डाइक्रोइक फिल्म को v पर घुमाएं, 495 या 475nm अवरोधन फिल्टर चुनें।
(4) uvFL40, uvFL100 प्रतिदीप्ति प्राप्त ऑब्जेक्टिव लेंस माइक्रोस्कोपी चुनें।
(5) स्लाइड पर गैर-फ्लोरोसेंट तेल डालें, पहले 40 x, और फिर 100 x फोकसिंग माइक्रोस्कोपी। प्रतिदीप्ति दिखाएँ।
(7) क्योंकि पराबैंगनी विकिरण द्वारा प्रतिदीप्ति सामग्री प्रतिदीप्ति की वृद्धि के साथ धीरे-धीरे समय के साथ कमजोर हो जाती है, इसलिए सूक्ष्म परीक्षा में अक्सर दृश्य के क्षेत्र को बदलना चाहिए।
(8) uvFL10 या uvFL20 कम-आवर्धन माइक्रोस्कोपी सामग्री (गैर-फ्लोरोसेंट तेल जोड़े बिना कम-आवर्धन के साथ) का भी उपयोग कर सकते हैं।
प्रतिदीप्ति छवि रिकॉर्डिंग विधि:
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी द्वारा देखी गई प्रतिदीप्ति छवि, एक रूपात्मक विशेषताओं के साथ है, दूसरा प्रतिदीप्ति के रंग और चमक के साथ है, परिणामों का न्याय करने में, दोनों को एक व्यापक निर्णय के साथ जोड़ा जाना चाहिए। परिणाम व्यक्तिपरक संकेतकों के अनुसार दर्ज किए जाते हैं, यानी, कार्यकर्ता द्वारा दृश्य अवलोकन द्वारा। एक सामान्य गुणात्मक अवलोकन के रूप में, मूल रूप से विश्वसनीय। प्रौद्योगिकी और विज्ञान के विकास के साथ, अलग-अलग डिग्री तक, निर्णय के परिणामों को रिकॉर्ड करने के लिए वस्तुनिष्ठ संकेतकों का उपयोग, जैसे सेल स्पेक्ट्रोफोटोमीटर, छवि विश्लेषक और अन्य उपकरणों का उपयोग। हालांकि, इन उपकरणों द्वारा दर्ज किए गए परिणामों को व्यक्तिपरक निर्णय के साथ भी जोड़ा जाना चाहिए।
प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप फोटोग्राफी तकनीक प्रतिदीप्ति छवियों को रिकॉर्ड करने के लिए बहुत आवश्यक है, क्योंकि प्रतिदीप्ति को फीका करना और कमजोर करना आसान है, फोटोग्राफी के परिणामों को तुरंत रिकॉर्ड करने के लिए। विधि मूल रूप से साधारण माइक्रोग्राफी के समान ही है। बस उच्च गति वाली फोटोग्राफिक फिल्म जैसे कि ASA200 या 24. ऊपर का उपयोग करने की आवश्यकता है। क्योंकि प्रतिदीप्ति फटने के प्रभाव पर पराबैंगनी प्रकाश, जैसे कि FITC मार्कर, पराबैंगनी प्रकाश विकिरण 30s में, प्रतिदीप्ति चमक 50% कम हो जाती है। इसलिए, प्रतिदीप्ति छवि को पकड़ने के लिए एक्सपोज़र की गति बहुत धीमी है। सामान्य अनुसंधान प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप में अर्ध-स्वचालित या पूरी तरह से स्वचालित माइक्रोफोटोग्राफी सिस्टम डिवाइस होते हैं।
सावधानियां:
(1) प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप फैक्टरी मैनुअल की आवश्यकताओं के साथ सख्त अनुसार काम करते हैं, मनमाने ढंग से प्रक्रिया में बदलाव नहीं करते हैं।
(2) निरीक्षण डार्करूम में किया जाना चाहिए। डार्करूम में प्रवेश करने के बाद, बिजली की आपूर्ति को कनेक्ट करें, अल्ट्रा-हाई-प्रेशर मर्करी लैंप को 5-15 मिनट तक जलाएं, तब तक प्रतीक्षा करें जब तक कि प्रकाश स्रोत स्थिर होने के लिए एक मजबूत प्रकाश उत्सर्जित न करे, और आंखें पूरी तरह से डार्करूम के अनुकूल न हो जाएं, और फिर नमूने का निरीक्षण करना शुरू करें।
(3) पराबैंगनी प्रकाश से आँखों को होने वाले नुकसान को रोकने के लिए, प्रकाश स्रोत को समायोजित करते समय सुरक्षात्मक चश्मा पहनना चाहिए।
(4) प्रत्येक बार 1 ~ 2h तक समय की जांच करना उचित है, 90 मिनट से अधिक, अल्ट्रा-उच्च दबाव पारा दीपक चमकदार तीव्रता धीरे-धीरे कम हो जाती है, प्रतिदीप्ति कमजोर हो जाती है; पराबैंगनी प्रकाश 3 ~ 5min द्वारा विकिरणित नमूने, प्रतिदीप्ति भी काफी कमजोर हो जाती है; इसलिए, * 2 ~ 3h से अधिक नहीं होना चाहिए।
(5) प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी प्रकाश स्रोत का जीवन सीमित है, समय बचाने और प्रकाश स्रोत की सुरक्षा के लिए नमूने का केंद्रीकृत निरीक्षण किया जाना चाहिए। जब यह गर्म हो, तो पंखे को ठंडा करना चाहिए, नए बल्ब को उपयोग के समय से शुरू होने से रिकॉर्ड किया जाना चाहिए। जब दीपक बुझ जाता है और फिर से उपयोग करना चाहता है, तो प्रकाश से पहले बल्ब को पर्याप्त रूप से ठंडा किया जाना चाहिए। प्रकाश स्रोत को कई बार टाला जाना चाहिए।
(6) धुंधला होने के तुरंत बाद नमूने का निरीक्षण करें, क्योंकि समय के साथ प्रतिदीप्ति धीरे-धीरे कम हो जाएगी। यदि नमूने को 4 डिग्री पर संग्रहीत पॉलीथीन प्लास्टिक बैग में रखा जाता है, तो यह प्रतिदीप्ति कमजोर होने के समय में देरी कर सकता है और सीलिंग एजेंट के वाष्पीकरण को रोक सकता है।
(7) प्रतिदीप्ति चमक के लिए निर्णय मानदंड: आम तौर पर चार स्तरों में विभाजित, अर्थात्, 'एक' - कोई या दृश्यमान कमजोर प्रतिदीप्ति नहीं। '+' - केवल स्पष्ट दृश्यमान प्रतिदीप्ति। '+ +' - एक उज्ज्वल के साथ दृश्यमान
