(दो-फोटोन, कॉन्फोकल) प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी और साधारण सूक्ष्मदर्शी के बीच अंतर
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी पराबैंगनी प्रकाश का उपयोग प्रकाश स्रोत के रूप में करता है, जिसका उपयोग जांच की जाने वाली वस्तु को विकिरणित करने के लिए किया जाता है, ताकि वस्तु एक प्रकाश स्रोत उत्सर्जित करे, और फिर वस्तु का अवलोकन सूक्ष्मदर्शी के नीचे किया जाए। इसका उपयोग मुख्य रूप से इम्यूनोफ्लोरेसेंस कोशिकाओं के लिए किया जाता है, जो मुख्य रूप से प्रकाश स्रोत, फ़िल्टर प्लेट सिस्टम और ऑप्टिकल सिस्टम से बना होता है, जो ऐपिस और ऑब्जेक्टिव लेंस के आवर्धन के माध्यम से नमूनों की प्रतिदीप्ति छवि का निरीक्षण करता है। आइए देखें कि प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी और साधारण ऑप्टिकल सूक्ष्मदर्शी में किस तरह का अंतर है।
1, रोशनी मोड में
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की रोशनी आम तौर पर गिरने वाले प्रकार के साथ होती है, यानी प्रकाश स्रोत परीक्षण नमूने पर उद्देश्य लेंस के माध्यम से डाला जाता है।
2, संकल्प में
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी प्रकाश स्रोत के रूप में पराबैंगनी प्रकाश का उपयोग करता है, तरंगदैर्घ्य अपेक्षाकृत छोटा होता है, लेकिन संकल्प साधारण ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप से अधिक होता है।
3, फ़िल्टर में अंतर
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी में दो विशेष फिल्टर का उपयोग किया जाता है, प्रकाश स्रोत के सामने दृश्य प्रकाश को फ़िल्टर करने के लिए उपयोग किया जाता है, उद्देश्य लेंस और ऐपिस के बीच पराबैंगनी प्रकाश को फ़िल्टर करने के लिए उपयोग किया जाता है, जो मानव आंख की रक्षा कर सकता है।
प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी भी एक प्रकार के ऑप्टिकल सूक्ष्मदर्शी से संबंधित है, मुख्य रूप से प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी की उत्तेजना तरंगदैर्ध्य छोटी होती है, इसलिए इसने प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी और साधारण सूक्ष्मदर्शी की विविध संरचना निर्माण और उपयोग को अलग-अलग बना दिया है, प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी में से अधिकांश में कमज़ोर प्रकाश को पकड़ने का अच्छा कार्य होता है, इसलिए अत्यंत कमज़ोर प्रतिदीप्ति में, इसकी इमेजिंग क्षमता और अच्छी होती है। हाल के वर्षों में प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के निरंतर सुधार के साथ, शोर भी बहुत कम हो गया है। इसलिए, अधिक से अधिक प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी लागू किए गए हैं।
दो-फोटोन प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के कई लाभ हैं:
(1) प्रकाश की लम्बी तरंगदैर्घ्य, प्रकाश की छोटी तरंगदैर्घ्य की तुलना में, आसानी से नमूने में प्रवेश कर जाती है, तथा प्रकीर्णन से कम प्रभावित होती है;
(2) फोकल प्लेन के बाहर फ्लोरोसेंट अणु उत्तेजित नहीं होते हैं ताकि अधिक उत्तेजना प्रकाश फोकल प्लेन तक पहुंच सके, ताकि उत्तेजना प्रकाश नमूने में गहराई से प्रवेश कर सके;
3) निकट-अवरक्त प्रकाश की लम्बी तरंगदैर्घ्य, छोटी तरंगदैर्घ्य की तुलना में कोशिकाओं के लिए कम विषाक्त होती हैं;
4) जब किसी नमूने का निरीक्षण करने के लिए दो-फ़ोटॉन माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जाता है, तो फोटोब्लीचिंग और फोटोटॉक्सिसिटी केवल फ़ोकल प्लेन पर मौजूद होती है। इसलिए, मोटे नमूनों का निरीक्षण करने, जीवित कोशिकाओं का निरीक्षण करने या स्पॉट फोटोब्लीचिंग प्रयोग करने के लिए दो-फ़ोटॉन माइक्रोस्कोप एकल-फ़ोटॉन माइक्रोस्कोप की तुलना में अधिक उपयुक्त होते हैं।
