चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के लिए डिबगिंग के तरीके और चरण

चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोपी के लिए डिबगिंग के तरीके और चरण

एक। कुहलर प्रकाश व्यवस्था को समायोजित करने के आधार पर, नमूने को स्पष्ट रूप से फोकस करने के लिए उज्ज्वल क्षेत्र विधि का उपयोग करें;

बी। स्पॉटलाइट को Ph1 पर घुमाएं और इसे टर्नटेबल पर स्केल लाइन के साथ संरेखित करें। एक 10 x चरण कंट्रास्ट उद्देश्य का चयन करें और इसे देखे जाने वाले पारदर्शी नमूने से बदलें;

सी। एक ऐपिस को हटा दें, इसे एक सेंटरिंग टेलीस्कोप से बदल दें, और दृश्य क्षेत्र में दो कंट्रास्ट रिंगों पर ध्यान केंद्रित करें (ऑब्जेक्टिव लेंस की काली कंट्रास्ट रिंग और कंडेनसर लेंस की ट्रांसमिटेंस कंट्रास्ट रिंग);

डी। देखने के क्षेत्र में दो अंतर वलय आवश्यक रूप से मेल नहीं खाते। स्पॉटलाइट पर दो समायोजन उपकरणों को समायोजित करें (आगे और पीछे की स्थिति को समायोजित करने के लिए समायोजन छड़ों और घर्षण प्रकार के नॉब के साथ अंतर रिंगों की बाईं और दाईं स्थिति को समायोजित करें), ताकि पारदर्शी रिंग काली रिंग के साथ मेल खाने के लिए आगे और पीछे चले। ;

ई. समायोजन के बाद, अवलोकन ऐपिस पर वापस जाएं और नमूने की चरण अंतर छवि का निरीक्षण करने के लिए हरे फिल्टर को ऑप्टिकल पथ में दबाएं;

एफ। 20 x और 40 x ऑब्जेक्टिव लेंस के साथ अवलोकन करते समय, स्पॉटलाइट को स्थिति Ph2 पर सेट किया जाना चाहिए, और 100 x ऑब्जेक्टिव लेंस का उपयोग करते समय, स्पॉटलाइट को स्थिति Ph3 पर सेट किया जाना चाहिए।

आवेदन का दायरा: पारदर्शी, बिना दाग वाले या बिना दाग वाले नमूनों, जैसे कि विभिन्न कोशिकाएं, जीवित ऊतक, बिना दाग वाले या बिना दाग वाले ऊतक के टुकड़े, जलीय जीव आदि के अवलोकन के लिए उपयुक्त।

चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप का मूल सिद्धांत
जब प्रकाश अपेक्षाकृत पारदर्शी नमूने से होकर गुजरता है, तो प्रकाश की तरंग दैर्ध्य (रंग) और आयाम (चमक) में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं होता है। इसलिए, जब एक नियमित ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप के तहत बिना दाग वाले नमूनों (जैसे जीवित कोशिकाओं) का अवलोकन किया जाता है, तो उनकी आकृति विज्ञान और आंतरिक संरचना में अंतर करना अक्सर मुश्किल होता है। हालाँकि, कोशिका के विभिन्न भागों के अपवर्तनांक और मोटाई में अंतर के कारण, इस नमूने से गुजरते समय प्रत्यक्ष और विवर्तित प्रकाश के ऑप्टिकल पथ में अंतर होगा। जैसे-जैसे प्रकाशीय पथ बढ़ता या घटता है, प्रकाश तरंगों के त्वरित या विलंबित होने का चरण बदल जाएगा (परिणामस्वरूप चरण अंतर होगा)। प्रकाश के चरण अंतर को नग्न आंखों द्वारा महसूस नहीं किया जा सकता है, लेकिन चरण अंतर माइक्रोस्कोप अपने विशेष उपकरण - एक गोलाकार एपर्चर और एक चरण प्लेट का उपयोग कर सकता है, और प्रकाश के चरण अंतर को आयाम अंतर में बदलने के लिए प्रकाश की हस्तक्षेप घटना का उपयोग कर सकता है। (प्रकाश और अंधेरे का अंतर) जिसे मानव आँख द्वारा पहचाना जा सकता है। यह मूल रूप से पारदर्शी वस्तु को स्पष्ट प्रकाश और अंधेरे अंतर दिखाता है, कंट्रास्ट को बढ़ाता है, और हमें जीवित कोशिकाओं और कोशिकाओं के अंदर कुछ ठीक संरचनाओं का स्पष्ट रूप से निरीक्षण करने की अनुमति देता है जिन्हें सामान्य ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप और डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप के तहत देखा या स्पष्ट रूप से नहीं देखा जा सकता है।

चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप का इमेजिंग सिद्धांत: ऑप्टिकल स्रोत केवल एक गोलाकार एपर्चर की पारदर्शी रिंग से गुजर सकता है, जिसे बाद में प्रकाश की किरण में केंद्रित किया जाता है। जब प्रकाश की यह किरण परीक्षण की जा रही वस्तु से होकर गुजरती है, तो यह प्रत्येक भाग के अलग-अलग ऑप्टिकल पथों के कारण अलग-अलग डिग्री के विचलन (विवर्तन) से गुजरती है। इस तथ्य के कारण कि पारदर्शी रिंग द्वारा बनाई गई छवि चरण प्लेट पर संयुग्म सतह और ऑब्जेक्टिव लेंस के पीछे फोकल विमान के साथ मेल खाती है। इसलिए, प्रत्यक्ष प्रकाश जो विचलित नहीं हुआ है वह संयुग्मी सतह से होकर गुजरता है, जबकि विवर्तित प्रकाश जो विचलित हुआ है वह क्षतिपूर्ति सतह से होकर गुजरता है। चरण प्लेट पर संयुग्म सतह और क्षतिपूर्ति सतह के विभिन्न गुणों के कारण, वे क्रमशः इन दो भागों से गुजरने वाले प्रकाश की एक निश्चित चरण अंतर और तीव्रता में कमी उत्पन्न करेंगे। फिर प्रकाश के दो सेट पीछे के लेंस के माध्यम से एकत्रित होंगे और एक ही ऑप्टिकल पथ पर यात्रा करेंगे, जिससे प्रत्यक्ष और विवर्तित प्रकाश के बीच हस्तक्षेप होगा, जिससे चरण अंतर आयाम अंतर में बदल जाएगा। इस प्रकार, चरण विपरीत माइक्रोस्कोपी के दौरान, चरण अंतर जिसे मानव आंख द्वारा अलग नहीं किया जा सकता है, उसे आयाम अंतर (चमक अंतर) में परिवर्तित कर दिया जाता है जिसे मानव आंख द्वारा रंगहीन पारदर्शी शरीर के प्रकाश के माध्यम से पहचाना जा सकता है।